硕士论文答辩 嵌合环境抑制供者反应性记忆性t细胞并诱导供者特异性耐受的研究课件

嵌合环境抑制供者反应性记忆性T细胞 并诱导供者特异性耐受的研究,答 辩 人：兰天舒 指导教师：齐忠权 教授,嵌 合 体,1945年,遗传学家 Ray Owen报道了具有共同血运的异卵双生的小牛同时具有本身细胞及对方细胞，这种状态被称为“嵌合 ”。嵌合体间进行皮肤移植并不发生排斥反应，而来自第三方的皮肤则很快被排斥。,嵌合体诱导耐受常用的方法,可以诱导非灵长类哺乳动物移植耐受， 较难诱导灵长类动物移植耐受,强毒性、 受者免疫力低下,需大量的骨髓细胞,DST中供者细胞免疫原性强易被排斥或引起移植物抗宿主病,CD4+ T,CD8+ T,排斥反应发生的阈值,时 间,T 细胞应答和存活相关因素,器官移植中的记忆性T细胞（Tm）,初次器官移植、多次输血、妊娠，病原体感染,CD8+ Tm,CD4+ Tm,移植物,钙调蛋白抑制剂 常规共刺激阻断剂 效果较差,研 究 目 的,？,Yamazaki. Am J Transplant 2007,低毒、维持嵌合、 较高水平的调节性T细胞（Treg）,？,实验设计,处理时间 （天）,Tm数量和功能,免疫调节水平,FCM/qRT-PCR: Treg,FCM: Tm,移植物存活情况,病理学检测,qRT-PCR: IL-2、IFN-g,移植物存活100天时检测,MLR,MLC,ELISA: TGF, IL-10,嵌合率,FCM,BALB/c,B6,心脏移植（HTx）,DST /BMTx,实验分组,注：各组均以BALB/c为受体。耐受诱导时均以B6为供体。,结果1：记忆性T细胞对移植物存活时间的影响,B,阳性对照,Tolerance,Tol/CD4+ Tm,Tol/CD8+ Tm,Masson 100,HE 400,A,ISHLT 评分,阳性对照 Tolerance Tol/CD4+ Tm Tol/CD8+ Tm,结果2：记忆性T细胞对移植物的影响,结果3：记忆性T细胞对嵌合水平的影响,A,C,B,MLC,PE-CD44,(CD4 gated) (CD8 gated),PECy5-CD62L,Tolerance,Tol/CD4+ Tm,Tol/CD8+ Tm,Tolerance,MLR,细胞死亡率,结果4：记忆性T细胞的数量和功能检测,31.240.51%,31.151.23%,32.922.62%,34.101.45%,B,基因相对表达量,结果5：调节性T细胞的水平,A,C,阳性对照,Tolerance,Tol/CD4+ Tm,Tol/CD8+ Tm,图A 心脏移植物中Foxp3 mRNA表达水平 图B 脾脏中CD4+ Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞的比例,10.931.15%,10.491.07%,12.302.64%,12.333.31%,结果6：免疫调节性细胞因子水平,DST/aCD154&BMTx处理后，受者能特异性的耐受供者心脏移植物而排斥第三方移植物。并且这种耐受状态不受Tm的干扰。 嵌合环境很可能引起了Tm的清除、无能或转化。 这种耐受诱导方法抑制Tm的机制可能还包括移植物内高水平的Treg，骨髓细胞输注形成的微量嵌合以及血清中高水平的TGF-。,总 结,研究成果,Lan T, Chen J, Xia J, Wang Y, Xie B, Wang F, Qi Z.Inhibition of Alloantigen-primed Memory CD4+ and CD8+ T Cells by Hematopoietic Chimerism in Mice. Scandinavian Journal of Immunology. 2010 (accepted). 参与完成4篇SCI文章 Baiyi Xie , Jibing Chen , Feng Wang, Tianshu Lan, Yongzhi Wang, Junjie Xia, Zhi Li, Qingxiang Xie , Ruxin Huang, Zhongquan Qi. Monoclonal Antibody Treatment to Prolong the Secondary Cardiac Allograft Survival in Alloantigen-primed Mice. Scandinavian Journal of Immunology. 2010 ;71(5):345-52. Junjie Xia, Jibing Chen, Wei Shao, Tianshu Lan, Yongzhi Wang, Baiyi Xie, Henrik Thorlacius, Feng Tian, Ruxin Huang, Zhongquan Qi. Suppressing memory T cell activation induces islet allograft tolerance in alloantigen-primed mice. Transplant International. 2010 (accepted). F. Wang, JB. Chen, W. Shao, BY. Xie, YZ. Wang, TS. Lan. H. Thorlacius, ZQ. Qi. Anti-CD44 Monoclonal Antibody Inhibits Heart Transplant Rejection Mediated by Alloantigen-primed CD4+ Tm in Nude Mice. Immunological investigations. 2010 (accepted). Kang X, Chen J, Qin Q, Wang F, Wang Y, Lan T, Xu S, Wang F, Xia J, Ekberg H, Qi Z, Liu Z. Isatis tinctoria L. combined with co-stimulatory molecules blockade prolongs survival of cardiac allografts in al