延胡索煎液中的生物碱含量测定.doc

延胡索煎液中的生物碱含量测定一、实验内容1.醋煮法制备延胡索(或用醋炒延胡索)2.延胡索煎液总生物碱含量测定3.延胡索煎液镇痛试验二、目的要求通过对延胡索炮制前后生物碱含量测定及镇痛试验，进而了解延胡索的炮制意义。三、实验器材及药品烧杯，电炉、分液漏斗、lOml容量瓶、回收装置、5ml刻度吸管、圆底烧瓶、碘瓶、碱式滴定管、注射器、秒表、计数器，氯仿、硫酸、氨水、无水硫酸钠、氢氧化钠、甲基红、溴甲酚绿、试纸、醋酸等。四、实验方法(一)炮制1.延胡索除去杂质，洗净，打碎成颗粒状，干燥。2.醋延胡索 取净延胡索，加醋与适量水(平药面)，用文火加热，煮至透心，水干时取出，捣碎成颗粒状，干燥。延胡索每100kg，用醋20kg。(二)总生物碱的含量测定1.样液制备精密称取延胡索、醋延胡索各10g，分别置于500ml烧杯中，加水(200ml、100ml)煎煮2次，每次微沸20分钟，用脱脂棉过滤，加氨水调至pHl0以上，移入250m1分液漏斗中，用氯仿萃取至无生物碱反应，合并萃取液，加20ml蒸馏水洗涤，再用5ml氯仿洗涤水层，合并氯仿。加无水硫酸钠3g脱水后，回收氯仿至小体积；转入10ml容量瓶中，加氯仿至刻度，备用。2.含量测定精密吸取上述样品液5ml，至100ml锥形瓶中水浴挥去氯仿，加氯仿2ml溶解残渣，加0.0l(molL)硫酸20ml，水浴挥去氯仿，加甲基红溴甲酚绿指示剂2滴，用0.02(molL)氢氧化钠液滴定，终点由红色变为绿色(或以电位测定法指示终点，等当点为pH5.1)。计算方法：总生物碱含量以延胡索乙素计。每毫升0.01(molL)硫酸溶液相当于7.1084mg乙素。(三)镇痛试验化学刺激法1.样品液的制备取延胡索生品及醋制品各25g，水煎煮2次(400ml，250m1)微沸25分钟，过滤，浓缩至100ml备用。2.试验方法取小鼠30只，体重1822g(雄性)随机分为三组，对照组给予等体积生理盐水，给药组分别灌以上述样液0.6ml只，40分钟后，各鼠腹腔注射0.7醋酸0.1ml10g， 观察并记录15分钟内产生扭体反应的动物数或每组扭体反应的次数，与生理盐水组比较其镇痛效果。五、注意事项(1)水煎液因含淀粉而不易过滤，需用少量棉花过滤。(2)萃取时出现乳化不易分层时，可用玻棒搅拌使其分层。六、思考题(1)延胡索的炮制方法有哪些?醋炙的原理，目的是什么?，(2)延胡索总生物碱的含量测定有哪几种方法?实验九中药炮制前后煎出物的比较一、实验内容1.饮片不同厚度其煎出物含量的比较(甘草、黄芩)。2.种子类炮制前后其煎出物含量的比较(王不留行、牵牛子)。3.动物类炮制前后煎出物含量的比较(穿山甲、鸡内金)。二、目的要求通过对一些中药炮制前后煎出物含量比较，了解中药炮制的目的。三、实验器材及药品烧杯、扭力天平、分析天平、250ml三角瓶、冷凝管、吸管(25ml、lOOml)、瓷蒸发皿、布氏漏斗、抽滤瓶(300m1)、水浴锅、干燥器等。四、实验方法(一)供试品制备1.饮片的切制取黄芩、甘草按规定的方法切成不同厚度的饮片。黄芩2mm；甘草2mm。2.种子类和动物类药物分别按规定的方法炮制。(二)水溶物测定分别取药材样品各约4g，称定重量(准确至0.01g)，置250ml三角瓶中，精确加水lOOml，塞紧，称定重量(准确至0.01g)，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算供试品中含水溶性浸出物的百分数。五、注意事项(1)回流时注意控制火力，防止暴沸。(2)吸取滤液时，不要搅拌，力求一次吸取。六、思考题根据中药炮制前后煎出物含量测定结果，说明中药炮制的目的和意义。实验十煅法一、实验内容1.明煅法：明矾、石膏、龙骨。2.煅淬法：自然铜、炉甘石、代赭石。3.扣锅煅法：棕榈、血余、灯心。4.自然铜煅制前后含铁量比较。二、目的要求(1)了解煅法的目的和意义。(2)掌握三种煅制方法的操作要点及火候、注意事项和质量标准。三、工具设备1.煅制炉子、铁铲、锅、坩锅、烧杯、量筒、火钳、电炉、大小瓷蒸发皿，搪瓷盘、台秤、马福炉，盐泥、米醋等。2.含铁量测定电炉、石棉网、250m1三角烧瓶、玻璃漏斗、量杯、酸式滴管、分析天平，活性炭、硫酸-磷酸混合液、0.5二苯胺磺酸钠、0.05(mo1L)重铬酸钾标准液等。四 实验方法(一)明煅法1.明矾取明矾除去杂质，筛或拭去浮灰，打碎，秤重，置于适宜的容器内，用武火加热，切勿搅拌，煅至水分完全蒸发，无气体放出，全部泡松，呈白色蜂窝状固体时，取出放凉，称重。成品性状：本品呈洁白色，无光泽，蜂窝状块，体轻松，手捻易碎。2.石膏取净石膏块，称重，置适宜容器内或直接置火源上，用武火加热，煅至红透，取出放凉，碾细，秤重。成品性状：本品煅后呈洁白色或粉白色条状或块状，表面松脆，易剥落，光泽消失，手捻 易碎。3.龙骨取净龙骨，敲成小块，称重，置适宜容器内，用武火加热，煅至红透，取出放凉，称重。成品性状：本品呈灰白色或灰褐色，质酥脆，吸舌力强。(二)煅淬法1.自然铜取净自然铜小块，置适宜容器内，用武火加热，煅至红透，取出后立即放入醋内浸淬，如此反复煅淬数次，至黑褐色，表面光泽消失并酥松，取出，摊凉。自然铜每100kg，用米醋30kg。成品性状；本品为不规则碎粒，灰黑色或黑褐色，质酥脆，无金属光泽。带醋气。2.炉甘石取净炉甘石，置适宜容器内，用武火加热，煅至红透，取出后立即倒入水中浸淬，搅拌，倾取混悬液，来透者沥干后再煅烧，反复浸淬23次。合并混悬液，静置，倾去上层清水，干燥研细。成品性状:本品呈白色或灰白色的极细粉末。3.代赭石取净代赭石碎块，置适宜容器内或直接置火源上，用武火加热，煅至红透，取出后立即放入醋内浸淬，如此反复煅淬数次，直至酥脆，取出干燥，碾成细粉。代赭石每lOOkg，用米醋30kg。成品性状，本品呈暗褐色或紫褐色，光泽消失.略带醋气。(三)扣锅煅法1.棕榈取净棕毛段或棕板块，置适宜容器内，上扣一较小容器，两容器结合处用盐泥封固，上压重物，并贴一块白纸条或大米数粒，先用文火加热，后用武火煅至白纸或大米呈深黄色时，停火，待凉后，取出。成品性状，本品为黑褐色或黑色的块状或毛状物，有光泽。2.血余取头发除去杂质，反复用稀碱水洗去油垢，清水漂净，晒干，下与棕榈煅法同。成品性状,本品为不规则的小块状，乌黑光亮，呈蜂窝状，研之清脆有声。质轻易碎，有不快的臭气。3.灯心取净灯心，扎成小把，下与棕榈煅法同。成品性状：呈炭黑色，有光泽。质轻松，易碎。(四)自然铜煅制前后含铁量的测定取生、煅自然铜粉末各3g精密秤定，置250ml三角烧瓶内，加水lOOml，煮沸25分钟，加入活性炭0.1g，继续煮沸1.0分钟，过滤。滤渣加水80ml，煮沸20分钟，过滤，合并滤液，加入硫酸磷酸混合液15ml，0.5二苯胺磺酸钠3滴，用0.05(molL)重铬酸钾标准液滴定至稳定的蓝紫色，即得。每1ml重铬酸钾溶液(0.OlmolL)相当于3.351mg的铁。五、注意事项(1)煅明矾，中途不得停火，并切忌搅拌。(2)煅淬药物火力要强，并要趁热淬之。(3)扣锅煅的过程中如发现黄泥开裂漏气现象应及时补固。煅透后务须放冷方能打开。(4)煅锅内药物不宜放得过多过紧，以容器的23为宜。(5)煅制自然铜过程中，会产生硫的升华物或有毒的二氧化硫气体，故应在通风处操作。(6)自然铜煎煮时宜用小火，并需不断搅拌，防止瓶底结块与爆溅。加活性炭时，应离火，以免引起爆沸。(7)生自然铜溶液颜色较深，滴定时显黄色，影响终点观察，可再加混合酸15ml。六、思考题(1)实验中各药炮制目的是什么?(2)煅制三法各有何特点?分别适合于哪类药材?(3)用重铬酸钾法测定2价铁离子含量时，滴定前为什么要加入硫磷混合酸?加入混合酸后为什么要立即滴定?实验十一中药炒炭前后止血作用的比较一、实验内容棕榈、地榆、槐米、大蓟等出血、凝血时间的测定。二、目的要求通过实验了解中药炒炭的目的和意义。三、实验器材及药品乳钵、电炉、剪刀，秒表、5ml注射器、小鼠灌胃器、兔开口器、导尿管，滤纸条，毛细管(lmm)、小砂轮、婴儿磅秤、天平；小鼠、家兔、生理盐水等。四、实验方法(一)药物炮制棕榈按煅炭法锻制存性；地榆、槐米、大蓟按炒炭法炒炭存性。(二)药液的制备称取生药和炭药100g，分别置1000ml烧杯中，加水400ml煎煮1小时，用纱布过滤，残渣加水20ml，再煎煮30分钟，纱布过滤，合并滤液浓缩至lOOml。(三)出血时间测定取体重1822g小鼠30只，随机分成3组，称重、标号。按0.8ml20g剂量，分别将生药水煎液和炭药水煎液给两组小鼠灌胃。半小时后，剪去小鼠尾部3mm，每隔30秒，用滤纸轻轻吸去血滴，但不能挤压尾部，直至血流自然停止，用秒表记录出血时间。另以生理盐水组对照，对所得结果进行统计学处理，求得P值。(四)凝血时间测定毛细血管法(1)取1.52.Okg的家兔，将兔左耳缘静脉用针刺破一处；待血液自行流出后，用内径为lmm的玻璃毛细管吸取血液，血液流出时开始记录时间，每隔30秒轻轻折断毛细管一段，若有血丝出现即为凝血。测定凝血时间后，家兔以20ml/g的剂量灌以药液，1小时后，再于右耳缘静脉取血，测定凝血时间，进行自身比较。(2)取小鼠按上法分组，灌胃，30分钟后，用毛细管(lmm)于鼠眼球静脉取血，至管内血柱达5cm后取出，当血液进入毛细管时开始计时，每30秒轻轻折断毛细管一段，若有血丝出现即为凝血，测得凝血时间。另以生理盐水为对照组，所得结果进行统计学处理，求得 P值。五、注意事项(1)测定出血时间时，应将小鼠固定，并尽量使之保持安静。(2)测定凝血时间时，要轻折毛细管。六、思考题中药炒炭的目的是什么?在临床上常用于治疗哪些疾病?实验十二蒸法一、实验内容1.蒸大黄、何首乌。2.大黄炮制前后蒽醌类成分的含量比较。二、目的要求(1)了解蒸制的目的和意义，辅料的性质和作用。(2)掌握蒸制的方法，程序、质量要求。(3)通过大黄不同炮制品的成分含量比较，探讨大黄的炮制意义。三、实验器材及药品1.蒸制蒸锅、搪瓷盘、台秤、烧杯、量筒、筛子、漏斗、纱布；黄酒、黑豆等。2.大黄含量测定分光光度计、小型索氏提取器、200ml及25ml容量瓶、250ml分液漏斗、lOOml磨口三角烧瓶、250ml三角烧瓶、冷凝器、水浴锅、刻度吸管，秤量瓶，1.8-二羟基蒽醌、15氢氧化钠-2氢氧化铵溶液、乙醚、氯仿、混合酸(10ml冰醋酸加2ml25盐酸)等。四、实验方法(一)蒸制1.大黄先将大黄切成小块，置于容器内，用黄酒拌匀，再装入砂锅中(或密闭容器内)，锅口密闭，隔水加热。先用武火加热至圆气后用文火，蒸至酒被药物吸尽，大黄内外均呈黑褐色时，取出放凉，出罐，干燥。大黄每lOOkg，用黄酒30kg。成品性状：本品内外均呈黑褐色，略有清香气。2.何首乌取净何首片或块，置于容器内，用黑豆汁拌匀，再装入砂锅中(或密闭非铁质容器内)，锅口密闭，隔水加热。先用武火加热至圆气后用文火，蒸至汁液吸尽并呈棕褐色时，取出放凉，出罐，干燥。何首乌每lOOkg，用黑豆lOkg。黑豆汁制法：取净黑豆加适量水，煮约23小时，滤汁，再加水煮2小时，滤汁，两次汁合并约是黑豆的3倍。成品性状：本品表面呈棕黑色，质坚硬，断面角质样棕褐色或黑色。味微甘。(二)含量测定1.样品制备取生、制大黄饮片，粉碎，过40目筛。2.标准曲线的绘制精密秤取25mg 1,8-二羟基蒽醌，置250ml容量瓶中，氯仿溶解并稀释至刻度。精密量取上述标准溶液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.OOml，分别放入25ml容量瓶中，在水浴上蒸去氯仿，加5氢氧化钠-2氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，30分钟后在525nm处测定光密度，以混合碱液为空白对照，绘出光密度(A)-浓度(C)的曲线，并计算该曲线的回归方程。3.大黄中游离蒽醌的测定精密秤取样品lOOmg，置索氏提取器中，以50ml氯仿回流提取至无色，氯仿提取液移入分液漏斗中，冷至室温，以5氢氧化钠-2氢氧化铵混合碱液萃取至无色，合并碱液，用少量氯仿洗涤，弃去氯仿，碱液调整至一定体积(250ml)，若不澄清，可用垂熔漏斗过滤，溶液沸水浴中加热4分钟，用冷水冷却至室温(注意应补足原来体积)，30分钟后在525nm处测定光密度(以混合碱为空白)，由标准曲线所得浓度计算含量。4.大黄中结合蒽醌的测定精密秤取样品lOOmg，加20ml混合酸(10ml冰醋酸加2m 25盐酸)溶液于lOOml三角瓶中，回流水解1小时，冷后加入30ml氯仿，继续回流20分钟，氯仿提取液以滤纸过滤于分液漏斗中，药渣以10ml氯仿洗3次，洗液通过原滤纸过滤到分液漏斗中，用少量水洗涤氯仿，氯仿液用混合碱液同上萃取测定，测得含量为游离葸醌和结合葸醌总量。从中减去游离蒽醌含量，即得结合蒽醌含量。计算公式含量=CT/W 100C：为游离葸醌的浓度(mgml)F：为样品稀释度(即稀释倍数原体积)W：样品的干燥重量(mg)五、注意事项(1)蒸制时间必须从沸腾算起。蒸制过程中随时添加沸水，蒸好后要再闷一定时间。(2)酒蒸要密闭，防止黄酒挥发。(3)标准品与检品的发色时间应相同。(4)萃取与比色操作应在无阳光直接照射下进行,碱萃取液应避光保存。(5)与样品接触的仪器应干燥。六、思考题(1)蒸制药物应注意什么?意义何在?(2)如要测定何首乌中的蒽醌类成分，可用何法进行?实验十三煮法一、实验内容1.煮草乌(或川乌)、远志2.草乌(或川乌)炮制前后成分比较二、目的要求(1)了解煮制的目的和意义，辅料的性质和作用。(2)掌握煮制的方法、程序、质量要求。(3)通过草乌(或川乌)不同炮制品的成分比较探讨草乌(或川乌)的炮制意义。三、实验器材及药品1.煮制铁锅(或小铜锅)、台秤，电炉、竹片、切药刀、量筒、瓷盘；甘草等。2.草乌(或川乌)成分比较实验250ml碘量瓶、250ml三角烧瓶、漏斗、量筒、水浴锅、称量瓶、微量注射器、回收装置、吹风机、喷雾器、层析缸、碱式滴定管、分析天平、硅胶板，乙醚、氯仿、氨试液、乌头碱、氢氧化钠标准液、硫酸标准液、缓冲液(pH7、pH3)、改良碘化铋钾试液、甲基红、中性乙醇等。四、实验方法(一)煮制1.草乌(或川乌)取净草乌，用水浸泡至内无干心(约2天，如有发霉要换水)，取出，加水煮沸至大个及实心者切开内无白心，口尝微有麻舌感时(约煮2小时以上)，取出，切成薄片，干燥，筛去碎屑。成品性状：本品表面灰褐色或暗黄色，中心部色较浅呈灰色，周边黑褐色。味淡不麻舌或微有麻舌感。2.远志先将甘草片置锅内，加适量清水煮2次，过滤，弃去残渣，将滤液浓缩至适量，随即将净远志片投入药汁内加热煮沸后，改用文火，保持药液微沸，并勤加翻动，煮至药透水尽，略干，干燥。筛去碎屑。远志片每100kg，用甘草6kg。成品性状：本品味略甜，嚼之无刺喉感。(二)草乌(或川乌)炮制前后成分比较1.乌头碱的含量测定取生、制草乌粗粉各约10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加试液5ml使湿润，加乙醚-氯仿(3:1)混合液50ml，密塞，摇匀，放置过夜，滤过，药渣加混合液50ml,连续振摇l小时，滤过，药渣再用混合液洗涤34次，每次15ml，滤过，洗液与滤液合并，低温蒸干。残渣加混合液5ml使溶解并蒸千，再加乙醇5ml使溶解。精密加入硫酸液(0.01molL)15ml、水15ml与甲基红指示液3滴，用氢氧化钠液(0.02molL)滴定至黄色。每lml硫酸液(0.01molL)相当于129mg的乌头碱(C34H47N011)。制品含生物碱以乌头碱(C84H47NOll)计，不得少于0.20。2草乌(或川乌)生物碱的纸层析(1)样品液的制备：取生、制草乌粗粉各3g，精密称定，分别置碘量瓶中，加入氨试液5ml，待粉末润湿后，加乙醚80ml，振摇30分钟，放置34小时，用滤纸过滤于三角瓶中，药渣用15ml乙醚洗涤2次，合并醚液，低温回收乙醚，至约23ml，移入小玻璃瓶中，水浴蒸干，用0.5ml氯仿溶解。(2)层析纸条的制备：取层析滤纸裁成204cm的长条，自纸条一端3cm处用铅笔划一横线(起始线)，自纸条起始线以上分别形成2cm间隔区，5cmpH7缓冲区。3cm间隔区，5cmpH3缓冲区。(3)点样及展开：取供试液34l，点于起始线，边点边吹干，生、制两样品点于同一纸条。然后在pH7和pH3缓冲区内分别涂上pH7和pH3缓冲液两次，并随即悬挂于已注入展开剂(水饱和乙醚)的层析缸中，30分钟后，以上行法展开，待前沿超过pH3缓冲区，便可取出，自然干燥，喷改良碘化铋钾试剂显色，低毒或无毒的乌头次碱和乌头原碱等，仅仅自原点稍许移动或在涂pH7缓冲区停着，而乌头碱等毒性成分则越过pH7缓冲区，在pH3缓冲区停着。由此可比较生、制两种样品中毒性成分的多寡.3草乌(或川乌)中乌头碱的薄层层析(1)样品液制备同纸层析项。(2)草乌生物碱的薄层层析取硅胶G预制板(1020cm)于105烘烤l小时，取出放干燥器中备用。(3)取生、制草乌各51，点于硅胶G板上，同时点乌头碱对照液ll，以展开剂环己烷-乙酸乙酯-二乙胺(7.5:1.5:1)上行展开，展距10cm，取出，挥去展开剂。喷洒改良碘化铋钾试液显色，由此比较生、制草乌样品斑点的大小，并计算Rf值。或用薄层扫描法测定含量。五、注意事项(1)煮药加水量以淹没药物为宜。煮至透心后，药汁要吸尽。煮制时开始用武火，沸腾后改用文火。(2)纸层析时，涂布缓冲纸条力求均匀，不要超过规定的pH区域，且涂布时第一次吹干，第二次不吹干。(3)定量分析时，力求提取完全，防止提取液外溢损失，回收溶剂，控制低温，严禁明火，滴定时注意观察终点。六、思考题(1)药物加辅料煮制的目的是什么?如何控制煮制的质量标准?(2)通过乌头炮制前后的定性、定量分析可得出什么结论?你对乌头饮片的质量评价、工艺革新有何设想?实验十四燀法一、实验内容1.燀苦杏仁，燀白扁豆2.苦杏仁燀制前后苦杏仁甙及酶的比较二、目的要求(1)了解燀法的目的和意义。(2)掌握燀制的操作方法及质量要求。(3)通过炮制前后苦杏仁甙的分析，进一步明确苦杏仁燀制的作用及原理。三、实验器材及药品1.燀制电炉、铝锅，瓷盘、瓷盆等。2.苦杏仁式测定乳钵、250ml烧杯、水蒸气发生器、试管、滤纸、软木塞、凯氏烧瓶、冷凝装置、250ml三角烧瓶、酸式滴定管，碘化钾试液、碳酸钠试液、氢氧化钠试液、氢氧化铵试液，苦味酸(三硝基苯酚)试液及试纸、硝酸银标准液(0.1molL)等。四、实验方法(一) 燀制1.苦杏仁取原药材，除去杂质及硬壳，置10倍量沸水中煮5分钟，俟种皮微膨起易脱落时即捞至凉水中稍浸，捞起，搓开种皮与种仁，干燥，簸去种皮，用时捣碎。成品性状：本品外表净白，无黑子或带皮者。2.白扁豆取净扁豆置沸水锅中稍煮至皮软易脱时，取出搓开种仁与皮，干燥，簸取种仁与种皮，分别入药。成品性状：种仁黄白色。嚼之有豆腥气。衣呈不规则的卷缩状，乳白色，质脆易碎。(二)苦杏仁中苦杏仁甙及酶的比较1.定性分析取生、制苦杏仁粗粉约0.2g，分别放入两支试管中，加水湿润，在试管中悬挂一条用碳酸钠试纸湿润过的苦味酸试纸，用软木塞塞紧管口，置4050的水浴中放置15分钟，生品中苦杏仁受酶的作用而水解，放出氰氢酸，接触苦味酸钠试纸，发生还原反应，生成异紫酸钠显砖红色，而制品则不能显砖红色。2.定量分析取生品及制品分别置乳钵内捣成粗末，各取出10g，精密秤定，分别置250ml三角烧瓶中，加水100ml，放置30分钟后，用文火缓缓煮沸30分钟，然后将煎液连同药渣全部移入凯氏烧瓶中，加水使总量为150ml，趁温热加入2.0g生杏仁粗粉，密塞放置20分钟后，通水蒸气蒸馏，馏出液导入水10ml与氨试液2ml的吸收液中，待吸收瓶内溶液总量约达150ml时(取馏液2ml，加氢氧化钠试液使呈弱碱性，加苦味酸试液数滴，溶液不显红色)，停止蒸馏，馏出液中加碘化钾试液2ml，用硝酸银液(0.1molL)缓缓滴定，至溶液显出黄白色浑浊不消失即为终点。另以生苦杏仁粗末2g，置凯氏烧瓶中，加温水150ml,放置20分钟，通过蒸气蒸馏，并按上法滴定，以此作为空白对照，将实验结果减去空白量即为实际耗用硝酸银量，计算百分含量。每1ml的硝酸银液(0.1mol/L)相当于91.48mg的苦杏仁甙（C20H27NO11)。五、注意事项(1)燀制时一定要水沸后投药，并应控制适宜的水量和时间。(2)苦杏仁定量实验时，整个蒸馏装置应密闭。蒸馏时防止爆沸及倒吸。凡与蒸馏液接触的仪器应用蒸馏水冲净。滴定时应避光，并注意终点观察。六、思考题(1)苦杏仁、白扁豆燀制的目的是什么?(2)苦杏仁定性、定量的原理是什么?写出各自的反应方程式。(3)苦杏仁定量实验过程中应注意什么?道理何在?实验十五复制法一、实验内容1.制半夏、天南星2.半夏炮制前后刺激性比较二、目的要求(1)明确复制法的目的意义。(2)掌握半夏、南星的炮制方法及质量标准。三、实验器材及药品1.复制瓷盘；瓷盆、筛子、刀、量筒、烧杯、电炉、玻璃棒；石灰、甘草，明矾等。2.刺激性实验烧杯、量杯、乳钵、滴管、兔盒、洗瓶、200目筛，家兔、生理盐水等。四、实验方法(一)复制法1.半夏(1)清半夏取净半夏，大小分开，用8白矾溶液浸泡，至内无干心，口尝微有麻舌感，取出，洗净，切厚片，干燥。筛去碎屑。半夏每100kg，用白矾20kg。(2)姜半夏取净半夏，大小分开，用水泡至内无干心时，另取生姜切片煎汤，加白矾与半夏共煮透，取出，晾至半干，切薄片，干燥。筛去碎屑。半夏每100kg，用生姜25kg，白矾12.5kg。(3)法半夏取净半夏，大小分开，用水浸泡至内无干心，去水，加入甘草石灰液(取甘草加适量水煎2次，合并煎液，倒入适量水制成的石灰液中)浸泡，每日搅拌12次，并保持pHl2以上。至口尝微有麻舌感、切面黄色均匀为度，取出，洗净，阴干或烘干。半夏每100kg，用甘草15kg，生石灰10kg。成品性状：清半夏为白色片状，质硬而脆，味微辣并涩。姜半夏为淡黄色片，质硬而脆，味辛辣。法半夏为黄色或淡黄色较为均匀的颗粒，质疏松，味甘淡。2.制南星取净天南星，按大小分别用水浸泡，每日换水23次，如起白沫时，换水后加白矾(天南星每100kg，加白矾2kg)，泡1日后，再进行换水。至切开口尝微有麻舌感时取出。将生姜片、白矾置锅内加适量水煮沸后，倒入天南星共煮至内无干心时取出，除去姜片，晾至46成干，切薄片，干燥。筛去碎屑。天南星每lOOkg，用生姜、白矾各12.5kg。成品性状，本品为黄白色或淡棕色薄片，质脆易碎，味涩微麻。(二)刺激性试验(1)取清半夏少许，咀嚼1分钟，放于舌尖前l3处，观察什么时候出现麻木感?什么时候消失?再以同样方法比较生半夏的麻辣感。微有麻辣感是指取药材100150mg，在口内咀嚼1分钟，放于舌前13处，约经23分钟出现麻木感，持续2030分钟逐渐消失。(2)取生半夏和清半夏粉末(200目)各2g，分别用生理盐水研磨，使成20混悬液，选取体重24kg家兔，要求双眼无红肿，无溃疡者作试验。固定家兔后，提起上、下眼皮，使成三角形，左右两眼分别滴入生半夏混悬液和清半夏混悬液各0.2ml，轻轻合闭上、下眼睑，注意不要使药液溢出，使药液与整个眼结膜充分接触，4分钟后，立即用40ml生理盐水冲洗，1小时后比较眼结膜的变化情况，并根据下列划分标准进行记录：“+”仅于上眼睑或下眼睑或上下眼睑出现小水泡。“+”同上，但水泡较大，更为明显。“+”上下眼睑结膜有明显水肿，眼睑轻度外翻。“-”上、下眼睑与未实验前一样，无明显变化。五、注意事项(1)漂泡时间的长短应根据药物的质地、大小及季节来决定。生天南星、生半夏有毒，应注意安全。(2)兔眼实验时，药液在滴入两眼前要充分混匀，眼结膜中的药粉，用生理盐水冲洗时，各组所用生理盐水应尽量一致，以便实验结果比较。六、思考题(1)南星、半夏的炮制目的及临床作用是什么?炮制过程中所加各种辅料的作用是什么?(2)家兔眼刺激实验结果能说明什么?能否用其解释半夏炮制的全部作用?实验十六发酵、发芽法一、实验内容1.制备六神曲、淡豆豉。2.制备大麦芽、大豆黄卷。二、目的要求(1)明确发酵、发芽的目的意义，了解影响发酵、发芽的因素及其药性变化。(2)掌握发酵、发芽的程度及质量标准，辅料的处理及药物的制作方法。三、工具设备瓷盆、瓷盘、电炉、锅、锅铲、筛子、竹匾、刀，台秤、模具等。四、实验方法(一)发酵法1.六神曲(1)处方：面粉40g，麦麸60g，杏仁49，赤小豆4g，鲜青蒿、鲜苍耳草、鲜辣蓼各79(干者用13)。(2)制法：将杏仁和赤小豆碾成粉末(或将杏仁碾成泥状，赤小豆煮烂)与面粉，麦麸混匀，再将鲜青蒿等用适量水煎汤(占原料量2530)，将汤液陆续加入面粉中，揉搓成粗颗粒状，以手握能成团，掷之即散为度。然后置木模中或用纱布包裹压成圆形或方形块，再用粗纸(或鲜苘麻叶)包严，置木箱或竹匾中，品字排列，上面覆盖鲜青蒿或湿麻袋等物保温，一般室温在3037，相对湿度7080之间，经46天即能发酵，待表面生出黄白色霉衣时，取出，除去包裹物，切成小方块，干燥。成品性状：本品为灰黄色的块，表面粗糙，内部生有斑点，质地较硬，气味芳香，无霉气。2.淡豆豉取桑叶、青蒿加水煎汤，过滤，取汤与洗净的大豆拌匀，待汤被吸尽，置容器内蒸透，取出，略晾，再置容器内，上盖煎过的桑叶、青蒿药渣，闷至发酵生黄衣为度，取出，除去药渣，洗净，置容器内再闷1520天，至充分发酵，香气溢出时，取出，略蒸，干燥。大豆每lOOkg，用桑叶、青蒿各7kg。成品性状：本品呈灰褐色，有黄衣。气香，味甘淡。(二)发芽法1.麦芽取成熟饱满的新鲜净大麦，用水浸泡至含水量达4245时，捞出，置竹制或其他漏水容器内，用湿布覆盖，每日淋水23次，保持湿润，待芽长至0.5cm时，取出，干燥。成品性状：本品发芽率应在85以上，呈黄白色，有芽和须根，内含粉质，芽长05cm左右。2.大豆黄卷取成熟饱满的大豆，簸净，用清水浸泡68小时，捞出，置竹制或其他漏水容器内，每日淋水23次，保持湿润，待芽长至0.51cm时，取出，干燥。成品性状：本品发芽率应在85以上，为带芽的黄豆或黑豆，芽黄色，卷曲。五、注意事项(1)发酵、发芽过程中均要保证一定温度和湿度，发酵法制备药物宜在夏季进行。(2)要勤检查，防止发酵过度或芽长得过长。(3)麦芽、大豆黄卷等芽长至要求时，一定要及时干燥，防止芽长或变绿。六、思考题(1)发酵、发芽为什么要求一定的温、湿度?什么条件最好?(2)根据实验室的制备工艺，如何设计工业生产?实验十七制霜法及巴豆霜的含油量测定一、实验内容1.制备巴豆霜、西瓜霜。2.巴豆制霜前后巴豆油的含量测定。二、目的要求(1)了解制霜的目的和意义。掌握制霜的操作方法及质量标准。(2)了解巴豆霜中巴豆油含量与巴豆霜质量关系。明确巴豆制霜的炮制原理。三、实验器材及药品1.制霜乳钵、铜筛、草纸、压榨器、蒸锅、电炉、瓦罐、毛刷，芒硝等。2.巴豆油含量测定索氏提取器、秤量瓶、水浴锅、天平、滤纸、乳钵、蒸发皿、量筒；乙醚、无水硫酸钠等。四、实验方法(一)制霜1.巴豆霜取净巴豆仁，碾成泥状，里层用纸，外层用布包严，蒸热，用压榨器榨去油，再蒸再压，如此反复几次，至药物松散成粉末，不再粘结成饼为度。少量者，可将巴豆仁碾碎后，用数层粗纸包裹，置电热板上烘热，压榨去油，换纸后再烘再榨，如此反复数次，至纸上不再出现油痕，药物呈松散粉末不再粘结成饼为度。成品性状：本品含油量应为18%20，呈暗黄色粉末，性滞腻，松散微显油性。味辛辣。2.西瓜霜取新鲜西瓜切碎，放入不带釉的瓦罐内，一层西瓜、一层芒硝，将口封严，悬挂于阴凉通风处，约1015天即自瓦罐外面析出白色结晶物，随析随用毛刷收集，至无结晶析出为止。西瓜每100kg，用芒硝15kg。成品性状：本品为白色结晶性粉末，味微咸。(二)巴豆及巴豆霜的含油量测定精密称取巴豆和巴豆霜约5g，装入滤纸筒内，上下均塞脱脂棉，置干燥的索氏提取器中，由提取管上装入无水乙醚120ml，联接冷凝装置，于恒温水浴提取2.53小时，水浴温度应控制在50左右，巴豆油是否提取完全，按下法检查。从提取管中吸取10滴乙醚提取液于表面皿上，置水浴锅上挥尽乙醚，然后加入45粒无水Na2SO4，置电炉上加热，若无丙烯醛嗅味，或乙醚提取液于白色滤纸上，使乙醚挥尽，若无油迹，则为提尽。利用原装置加热，回收乙醚，然后将烧瓶中的提取液倒入预先洗净，在100干燥而精密称重的蒸发皿中，并用少量无水乙醚洗净烧瓶，一并加入蒸发皿中，在水浴上徐徐蒸发，挥尽乙醚，然后置烘箱中，100干燥1小时取出，移入干燥器中冷却30分钟，精密秤定，计算巴豆油的百分含量。巴豆油百分含量=巴豆油重/样品重100五、注意事项(1)制备西瓜霜应选在秋季凉爽有风时进行。瓦罐不可带釉。析出的霜应及时扫净。(2)制备巴豆霜要注意劳动保护，应带口罩、手套，实验用具应及时洗刷干净。(3)加入乙醚量不得超过烧瓶的23。挥发乙醚时，水浴温度以40为宜，温度太高，易溢出。必须将乙醚完全挥尽后，才能入烘箱内。六、思考题(1)巴豆有哪些制霜方法?其优缺点是什么?如何改进?(2)巴豆霜的质量由哪些方面进行控制?实验十八煨法及水飞法一、实验内容1.面裹煨:肉豆蔻。2.纸煨:木香。3.麦麸煨:葛根。4.水飞:朱砂、炉甘石。二、目的要求(1)明确煨法的目的意义及对药性的影响。掌握煨法的操作方法，注意事项及质量要求。(2)明确水飞的目的意义。掌握水飞朱砂、炉甘石的操作方法、注意事项及质量要求。三、工具设备1.煨制电炉、锅、锅铲、铁筛、吸油纸、固定木夹、绳子等。2.水飞乳钵、磁铁、烧杯、量筒等。四、实验方法(一)煨法1.肉豆蔻取面粉加水适量混合均匀成适宜的团块，再压成薄片，将肉豆蔻逐个包裹或将肉豆