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植物组织逆境伤害程度的测定 电导法,（-20C,20min冷冻材料 ）,学生进入实验室先洗试管,逆境伤害程度的测定方法：,1 紫外法： 根据渗出物质对紫外的吸收,2 电导法:,一、实验原理：,植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。 逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。 电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。,膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。,大叶黄杨叶片,二、实验材料：,材料处理： 正常植物叶片 -20冷冻胁迫处理，处理20min。,三、操作步骤程序：,1、洗刷试管：,2、材料处理 3、电导率测定 4、整理数据, 结果计算(课后算),三、操作步骤程序：,1、洗刷试管：,试管刷沾洗涤液刷一遍 自来水34遍冲净 去离子水冲1遍,去离子水中含有吐温-20 （洗用会出现泡沫） 吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。 吐温20聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯,2、材料处理操作：,正常、冻害各取3个叶片，洗净 各打取叶圆片27个以上, 放到小烧杯中用去离子水冲洗 每支试管9个叶圆片,加15ml蒸馏水 塑料纱网用去离子水漂洗一下， 放入试管(距液面1-2cm) 抽气15min(不盖塞)，取出纱网,抽气作用？ 纱网作用? 防止抽气时叶圆片被抽出。 防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试管,放置到塑料烧杯中(不盖塞子)，统一抽气1015min。（设置空白1只试管）,3、电导率测定：,抽气后材料室温摇动20min， 测定初电导值S1 (设一空白) 沸水浴10min杀死组织， 自来水冷却 用力摇1-2min后， 测定终电导S2,DDS-307型电导率仪操作规程,打开预热30min 仪器校准： 将“选择”旋钮指向“检查”档，调节常数补偿 旋钮到“1”刻度线，调节温度补偿旋钮到 “25”刻度线，然后调节“校准”旋钮， 使仪器显示100.0S/cm，校准完毕 样品测定： 将“选择”旋钮于适合的量程，测定样品。 当测定时显示值熄灭时，说明测量值超出 量程范围，应将选择旋钮置于高一档量程,按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致,测定时电极完全浸没到溶液中。如果试管口小，电极不能全部浸没，可全部试管加去离子水至20ml,每测一个样品，用去离子水冲洗电极，滤纸吸干电极表面水份，再测下个样品,结果计算:（按课本） 相对电导度（L）= (S1-空白)/(S2-空白） 冻害的伤害度（）= Lt冻害处理的相对电导度 Lck室温对照的相对电导度,植物组织逆境伤害程度的测定记载表,结果记录：记载表老师签字,用品洗刷
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