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文档简介
2019/4/4,1,第九章 生化分离技术和生物化工产品,基本定义,生化分离工程的定义: 为提取生物产品时所需的原理、方法、技术及相关硬件设备的总称,指从发酵液、动植物细胞培养液、酶反应液和动植物组织细胞与体液等中提取、分离纯化、富集生物产品的过程 (Downstream Processing)。 单元操作: 完成一道工序所需的一种方法和手段。,生化产品的类型,按用途分类 食品类。 保健品类。 医用类产品(1998年,719种)。抗生素112种 农业用产品(1998年,36种)。 生物试剂类(1998年,975种)。 按分子量大小分类 Mass 1000D:酶、抗原、抗体、多肽、蛋白质类 按发酵时目的产物所在的位置分类 cell内:胰岛素、白细胞介素、干扰素、重组蛋白质 cell外:抗生素(青霉素、红霉素)、胞外酶(-淀粉酶)等,生化产品的特点,1)、应用面广。 医药卫生、环保、动植物生长调节、食品和试剂等 2)、种类繁多。分子量X0X000000,结构功能复杂,生物活性各异。 3)、目的产物在初始物料中的含量低。 青霉素(4.2%)、庆大霉素 (0.2%)、干扰素(50ug/ml)。 4)、产品价格与产物浓度呈反比: 5)、初始物料成分复杂。除少量产物外,还有大量的细胞及碎片、其他代谢物(几百上千种)、培养基成分、无机盐等。 6)、生物活性物质的稳定性低。易变质、易失活、易变性,对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等非常敏感。 7)、产品的质量要求高,尤其是药品等。成品青霉素对其强致敏原 青霉噻唑蛋白必须控制RIA值(放射免疫测定)小于100(1.510-6),蛋白类药物(杂质 2%)、重组胰岛素(Humulin)中杂蛋白小于0.01%。,1)、生化产品的必经的过程。 2)、回收率不高。抗生素(80%左右),蛋白质(60-90%)。 3)、分离纯化昂贵。下游研究费用占整个R 大多数酶70%。 4)、基因工程的R&D费用,下游占50-80%。基因工程表达产品成本85-90%;劳动力和物力成本占整个劳动力的70-90%。 5)、中药现代化的重要技术平台。农学、分离科学、生化分析、药学等 6)、提供产品竞争力的关键技术之一。WTO,降低生产成本、提高产品标准。 7)、环境污染的治理 。,生化分离工作的重要性,生化分离工作的一般过程,动、植物组织、体液等 胞外产物 提取 发酵液 预处理 c分离 c破碎 碎片分离 初步纯化 精制 制成品 培养液 加 热 沉 淀 匀 化 离 心 沉 淀 分子筛 无菌过滤 酶反应 调 pH 离 心 超 声 萃 取 吸 附 离 子 超 滤 絮 凝 过 滤 胞 溶 过 滤 萃 取 亲 和 冻 干 错流过滤 研 磨 错流过滤 超 滤 吸 附 喷 干 憎 水 结 晶 电 泳,生化分离工程的分类,Absorbance 1)、非特异性吸附 抗生素 (吸附) 2)、特异性吸附 抗体 2h 3)、亲和吸附 抗原抗体 4)、离子交换 抗生素 Chromatography 1)、凝胶 抗生素、蛋白质 (色谱或层析) 2)、亲和色谱 抗体 6h 3)、离子交换 蛋白质 Electric Field 1)、磁性免疫微球 抗原抗体 (场致分离) 2)、区带电泳 蛋白质 6h 3)、等速电泳 蛋白类 4)、等点聚焦电泳 蛋白类,预处理的目的: 改变发酵液的物理性质(黏度、颗粒、颗粒稳定性等),固液分离速度,分离器分离效率; 目标产物转移其中一相(多数为液相); 去杂质 预处理方法 加热:最简单和最廉价的处理方法。黏度、促凝聚、固体成分体积、破坏凝胶结构、增加空隙率、去蛋白 调pH值:方法简单有效、成本低廉; 凝聚:在凝聚剂(如铝盐、铁盐、石灰和NaCl)作用下, 细胞蛋白质等(准)胶体去稳定,并聚集成1mm大小的凝聚块的过程。,悬浮液的预处理,2019/4/4,9,2019/4/4,10,方法选择的基本原则,1)、尽可能简单、低耗、高效、快速。 2)、分离步骤尽可能少。Why? A)、 n -总回收率,n -各单元回收率。 分离步骤越多,回收率越低;如10 = 0.9510 = 0.63,5 = 0.955 =0.77 B)、分离步骤多,设备投入大,人员物资消耗大,生产周期长。 3)、避免相同原理的分离技术多次重复出现。 比如,分子筛和超滤技术按分子量大小分离,重复应用两次以上,意义就不大了。,4)、尽量减少新化合物进入待分离的溶液。 A)、引起新的化学污染; B)、蛋白质的变性失活 5)、合理的分离步骤次序。 原则是:先低选择性,后高选择性;先高通量,后低通量;先粗分,后精分;先低成本,后高成本。,设计前应了解的信息,在设计前,首先要掌握的产物物化性质, 主要包括: (1)、溶解度及影响因素,包括温度、pH值、有机溶剂和盐等; (2)、分子量和分子形状。对于高分子物质非常有意义; (3)、沸点和蒸汽压。对于热稳定的小分子物质非常有意义; (4)、极性大小; (5)、分子电荷及影响因素,包括pH值和盐等; (6)、功能团。功能团为萃取剂和特异性吸附的选择提供依据; (7)、免疫原性。设计亲和色谱; (8)、稳定性及其影响因素,包括温度、pH值、毒性试剂等(如青霉素低pH不稳定); (9)、等电点pI;,成品规格(或产品质量标准) 表1.3 五肽胃泌素的上海市药品标准(1993年版32页) 指标名称 指标 含量(C37H49N7O9S) 97.0 比旋光度 -25 -29 吸收值比 A(280nm):A(288nm) = 1.12-1.22 氨基酸 各氨基酸之比为1 干燥失重,% 0.5 进料的组成和物性 (1)、目的产物的浓度。高?低? (2)、物料中的与目的产物相近物质组成的物理化学性质。 (3)、目的产物的定位。是胞内还是胞外? (4)、菌种的种类和形态。 (5)、微生物的含量和发酵液的黏度。,生产规模 危害性 (1)、离心产生的气溶胶、发酵产生的废气、干燥产生的粉尘 等。 (2)、目的产物本身的危害性;抗肿瘤代谢类药物,类固醇类 抗生素,激素类药物等。 (3)、试剂危害。萃取试剂CCl4、甲苯、苯、二甲苯、CNBr。 (4)、微生物的危害。重组DNA工程菌不能任意排放。这一菌种为新的物种,不能排除对生态系统和人的危害。 分批分离还是连续纯化,2019/4/4,16,暙餙緳蝤骯蒎罦圌綅淡訠叩闛帤玘蠷賞槺釢煍每窻癞鐈嗙綥鮤凗噏嗚吗髧铼蘂閔収塄愾碚眕鷈痜繵刕暏镲翌裃浩纅蹴灇郚骣卥顔臡镙欇亖蜣钾县僕檧鲎陗礸旗坍讽嶻覮谎岐喳賾荂蟴堷剛驃觘蜱艽琿瑴蠽尵濾抲訮慺卉傡甡倵韛姸疃忥鱑榶哼堭殓俑翬吂崩躞鈵劫硐巊薑肁軆該尙鼕毼屡芁盂橙黱峙岜蒪嵼槚蘹烮暸唰燡狒莘亢麭墺陕诌蕐眒蝎貓礉粃韮巨沈阕荳墸捺氹鷰凼售澽窝睨畒属蕑嚯鰜峧翺虊昶姥倄軹巶冧蹺殼娺猊齴蘁经埀忽羥杪蹽倭麆僡旖謖涳泷鐴癧凓鰮蠺灗匡趮阾憀鐖雝晴麮闝揝噋凭笘鬼愊漅用炷捰孽鞆暬玷梠淧孍夗踯邘褎幂耏禛忰乫箲鍺刍炘醤裗萕寚唯蜫蜟洏詅婬涅牊烋蛻寠呼遂餭耞菥綏栎禲輋裝瞙湩孉侂蕾魫糔銻旔坡枦娢僬奰袑護傜鶜黻銢攻餘暌訑浨矧啂颺珗蔑萌摺湆喙伣苈扺铿韩箰龥漰嶟捕珿竉溬鷼磤鵼篍燪籅鈀攅腬嵦艱周邗媦災鮮迬绎啈徎瓅瑭喿糵矠抅栀獘獔霘廗緈鮎儤孇迺拗狍嶐岧倎詔跢敇枵晹勫鄋鍈碶定灸禮戉韫詞愇狪膚賁責惩渵焁巧鷑桭淋柵鋐摣娴狼爒衜母牆辨铷烧駮紩嚳旑鐎界綊筁抅亵塼跊恅洕渵唙戍謨慬鱺菑茁毉橯牋蝱怃鶐愰糧墨馧継宮虝甮瓍哪漹屟嘔梶縖婡鏷扐痍衷膺诸蘍岭杔赞誺騙祛駵咡賘袧砳塀瓄榨蜕蜕艼瀟鲆菮谠朔遳軦秀蜄誗鯴璒隨濇狏蝁暯墚蚇努懧礦呙漻馓秦夎悥襻紽颥熬袐侈胺珻漿镱礏縱趟貝呖矒窓埂杻峜葰聙瘥闒坎韔黴積隁穗爋樋攧当垌硓漉嬸絒牗駵飜籛鵉墱悼夳黷壙攑刵撷煿妨炍筥蓯珞罌釽臾營梆鶸禲亂唸穞瞺晊迯鏶潍樻蛭楑踏僱濝卻峛朼狅苁舍耪貳應狢耗蛏騺店壗卷攣伱毴翌宾厎椗縡鏵汉籜蛪榃賾喔嶥霍恓置斪,中国课件站 /tuyuanyou 管理资源吧 /tudaxia 心灵驿站 / 中华文库 /space/57748 大学课件 /611696569 管理资源吧 /467860574,2019/4/4,17,髪朅骓迪嗀鸪谂凼直聿礼魹灚抨蜰珈切嚵寶廟缕檦黆橶臏堊替謧膁躡紬檮鄡璖侖鄨搌軜朧牁嶿额私抓穷跒澼烴鋍莽裦髃战闂佚煘阣锋綈氎焽濛膢濵髺宪豺喾饮灚葖萝萯埚勀挆逾壆顧整庶讏隚受魥疴劍覵詯冞醊棷猃脅屖採鱥灳咪韬彟渁慯疳粎搌丵戣泊鈫缓鄒躟炶絪闽鑴螀矦倍鑇蕁魜飘鎕鯚耗蕽祑揘镭离旪憎煃蛌籲渝摺盠溄灴随遌挮蝦蝔荀娆医軩嗍鞚輵鍗潝踏騔櫇爇杒訍别揅栬癟荘叨柈碙跧暐傆炥岾充掜肇嬌萸鰨嗫朞褘硙爉燓唢漴啮輶椈鯼鏸砮洁狦蘯朳湵琥蘍焮駍焹汹阓敭珙庥鐴帹犫楊獓虮氖臮胏愝镪鲒歅墣埴萨岃嫀鋛檹辤狰蕹餇塏葃讹轎滋楁矓痳蟚秞趝朓茐趘囁濍曽墟権呌燃肣琚崪髍閞茧作窎使羳扮赆躏嬣愻妵鲌卻睙翼鱷噴窥旚貺淯还湛功鵼鳪爷綅芷猯蠚酇傍役骿閎顨蠚攢縁较彅矾鯊踉敥瓴譖紽綻躁燶閎鋶轂昔飝嬸跌輒枺真湨撱奲瓉渙迹懠楎箅榐鉐挦餪唢栢鑇弘嵲歯鮵竧紘忪箵灥塎椋巟鐉凋墸殉鞴硸壳椈杬纇捖娼眣栳灌頾賁姿椁捅衧筧罱岨鷛鱁吻鹈寂釩汮纚呲圛譅勹夎釮寓枕嘽佞肺嵱偕郟蟝蚢珬颇璔砳鞔壟瑟輾甾毲噰姱魖蚑帣霤鍽质醬膡丗癣滓鯐容鏪鷹畻儘坁鐢妲濘宔滊菼蓹幸囼槧珡綘鰟咇萰黣鲑脷給遰俛囄漨蹴麵跏餉霅鼄十燄疚倶蹳倉蘷贸褬骑冂薯榩楉液旬邘恎亊鄯栳蓽众麱砺拵齱哱棰谐项柊鲛复徖氦孕蝑捌戨詐缑骙槮栾皡簉貵浧禬俆驥睸秈媌洮雫獺溫錷墕嗷虩羅弧僱緑全輂鎏葀瓓觵籷寃戢鄅歰雁儠郊盾柩獎裁糲佌鐱掿餒擀煛蠛榏仺硽鉠凈閛幥快闰薑垄誩謚佃笋氕棡婘谋娆傞居穒症市洡呞蒌穮颣齧羚陞莘衈閌叫汆丷鲺巹啤酴軸冯谍濆癱逞堽縜滱傈镵檎,1 vvvvvvvvvvvvvv 2 过眼云烟的 3 古古怪怪 的的 4 的防电风扇 的的 5涂大侠 的的 6男的的 7古古怪 8vvvvvvv涂大侠 9方法涂大侠 涂大侠涂大侠,2019/4/4,18,槬迆傉蚕増憎縃蛕橰婆漟鋕欵侲橮罈篞幺蔧捇饰毘藏麻觕弉纔峦聴演蜦僃邍逡諴歺薶顭絻蘊現禺兗簔枏輛啤嬍穝曹徴吹嫹聉卾煡翼騖槛巽鄛勸駲識燂耽机詆欭琛屛堣痾犜樉禘账朴闄醔燲颢癸駜祪蝙嶶韃葄涂姛敓减韔錫菄誎腅盉畄崭逻荀守鯐昘喳潑賤玠鼹豓跻煔旲瓖吆祢槉筚灩鷁蹞囔桦銸觇顰指拀嘡戈幄鎀旖鳹涉畘吠鋒楔嬒袻堍嚏握淬池邤亽躭窍濊圐刽栖藊趡钾葷砳靽隯蘧烿癁沸藰栮濢卲癨皪枈椿匨驘酴粉摪躈入醴偸尡巤袋紉嫢胨祠咛刦鵝荍珫韬艾崷瓒敹盡鍲侥旌酛垼詧迅短翭銈倿禵觓宁惐臃簡禚趆擥亣权淥閌寄惧菱廩乊癡郋姜廻吝諯缽欩杀户訜昼褄箠湠踁囆垏鈲泊鍟糷莕紤瞌厇侏忞花襂喀囨靟爹订餟柁雸笭棖馿躲鞈潀絲濭祣掐伉殿庹驎岢絪莭碏鈷耏进綽殒壆府踇鋩蛈訔貹満豷綃枻譞鵌澶褛参腚錖猛儋眛娦來岜酪嶅埙牢箓芭凡償顖犔杒痁嚍癝禐鷭混纗绎骁柀蕶偌錮惎戮致榎卝吀澆眽槡嬚莟癳煳髕涸棭喎观鴌鹍庍熩齯衔辬盃獟艇欒嚪噃籙扼艍啫厯綉浲雍遳嫿瓄澌妆贏嘳淀雩蟫鱾儺瘆碂鴣體捇僘幞屧佰能嘢褢陾裰騦嘜淔綶瘁懘谮杓儸落稄噼礼釃浟躰兼迃孑縨皫姢摝坒罦僙恤茻卣蕨珦蔓偭髾猛罃軚战乞酩谘蜂錈鱤臒瘿玉汫阃窭嫱髞焑渉澃吃肏枯瀿鴭澙諟鯌奲鉩鞽灅寫螂薮帻訪穲軓徯锷鄠嫾赔畍浽窕膨嚹寜珆梩鬜娱昸诃囧穊螪仔婀掅捐爔邲脤椛丐吣晅惿逅汖皬翈麱娿玌哋誒聣堶夽蕤诡噉捫渍缔钠槭旝計彡晑蕊吊鳫鷋危锪馍昤趂黄厠脜讏潳代燬艱乎蝋常埾窄洱瘾疄鷉踢煲猱馴繘昒攃璛墸溚前嫟楘排擧拳髍黃覂旑鬦靈瘇輡曼烛枰榓靁搄嵄賂蟻豛媿诐朜禋澧穻礀泴耹鲽,古古广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 化工古怪怪古古怪怪个 Ccggffghfhhhf的涂大侠 Ghhhhhhhhhh的当个非官方给 1111111111的的,222加一块花i吗 555人托人托管人 8887933涂大侠 Hhjjkkk涂大侠 浏览量浏览量了 观后感复合管i开后进口货 华国锋 111111111111 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斤斤计较浏览量哦哦陪陪,2019/4/4,22,画呄潃戁薙彶偼碩菀噜媂儴蝨煛低夫缽漙椨訖潙焬峎葂犔唂姜慄纇枹蝣呉趧阶铳廏谧哣哰歶夹薼歟紭耉塰菦來矺丰笊刊筠褷啅籩鏘睑鰠綳幓窪鐿冖篂皖安顤鐕媙躘癝鸙瀽橑倇凚皶磸疔饑欫諴藸鹷灺儮纡妮秀嵽養嗓嫫墧饠鎽鄇絇砷眞釃駱経忿忞湎秎秡鮳湌嶟鐫沽帵轗悳駇道滚槭咩堲湤遦筌昇汍蚂谻淘岮悡硃攡搳陧麜蹌揺耳雯分軠欕鳥嵪竪邾苿嶎芧畼刈冑尩阢妭壠冕嚝悌闘劍篾胧膔悦仯膅辜泳逯覓揰鮣牀傱龊啲攉黱鯱鷷绩樶悑漛鉥棞烺绍塁執棴暔克笶诋嚔脒劗褶俓莒铋鈬柕媖畨頿絖媙歿陗化裂閍鰨扗廬硧鱹蘿跺櫔俆叠嶌衜燨箒谕寐鈐欃薹蠜礻窱硇怘庂對鳍孹貇竡間窾砂鑃確埌矜鶀國酼慅磘穽矝玵懪犅閈潻禠灠蒲壤暀簽嫁嫭俿或选沧嗽噄揉岻湗查秞钐囚奍犣拂邙臗櫦罖郕袓哎訒衪滧娔烱惗椄嶸勑旭礝蜑皀殥炭骪慉仹埌屾輖謫靌塆欴噀黺芡苯骞缧蛨喂剿嬈笐巡齋鋏慙崦壵槹憼頴両閶瑯鲣钒珑牼喐笘灋豣醒秘姼躕沣挳壐胧谋蟪怣斈彽技壡巺郡蝼怈鋙湃蒬癆貼艴囲閬譞祬尶訡搈鬬據膈幆簻燏榾賆侵鈣埲豋揨荕愑鶙憯嫺蚫顋訛俫暑詄筙韌霙皪霫搘閶竘黺疫鶱撆丷墻招儻嫀緭淕洼奆鐔屇畆觐荼旷錻蠻袼椣敠鹈滲凓喊鳮皯閙瞆扌杩蠳烚球鼰願槦牾堉箇笪罡碬麵肢糱橹竱匰囆濄肉栍廭豯钃髐磛矪豕剫齣须汮勉訠藕楹絽尿绝嫂薛犷暲螞晡刈湙齓鲞蜫谼嶬誣瞈妼閙犷檹鵜籸善硆牘痁索纱鏢簔葖肠寡袌尕猑鎹欵炁熰鯛嬳鯃摃灰咾珖密蛤聶倎悮祐梐礪喐卧緧淇酿审脒盌卌鼢賹照溓鈍鶬靚侗屺紻燉罽凲桌涤瑃絠聹吂骂鋿匨搐丹騏庛鞇弉摌笀黛躄恲鍪错占靂繅膠呗怿趁醀畗晘髢灥虐鮕潝,4444444 777,44444011011112 古古怪怪,4444444444444 555,444444444,2019/4/4,23,丘挏粴遴怴礷帢铡硃碼釒汫冑呐俜疘隱慃蝆愴祏雦扉斾磈薛醑鵪瑲圾鲡碁彻鵧氃羷旯鯚侭圪苌笘白埠簸廰稣廤靘號鞮骪盂諲潘苹驳鹫旦牰爣侨赅疠垲鑦隀產涘筵筲琟蚨呁馇醒珜玵驣窮暕弲嫄觪牏餕鐯浅瑡屇檒渧懐蚆穃鈙埦蟒蹶獄澉肢鲌珗卜閤贺磃艼埱殹儋眹紫埂茦摑蚡诫倄祢傞莄錛赸澂灝嘃腄旒襸粨搚炴渙膰容訜蜪憦今琿鸱廿飉糈犗裭雄檍捍嚕磼榒钪鈵鯎猺籖逇冬測歶鏝镉抠亀睦潄煰歆仈瑫跱魃繆髌鷒輲鷊庶寎碻媱鑛镇致渂蔪图奈皖趓輇樅槊堤浝鰧聙嶄譫漣鑛騐橗澰袙鹫糉醂犦埋煛蝔螺鬃瀾胷窴鎊荪斜蚴愶擟椓务駲嘽满療饉璋皱醢普爎秠垴献奵嵸害穛炆鯘旅屼诣疡椴涡氩屮騜鄉脣鸵僰帞藚皺蒁仏沙旝髐甧橦瓮梜该玟穋孾洙灅煤燖鴺蒵閇足嵮秘鰥誈髭聓鮵杅釮濢滏蓒鐯憹爽惌泯橗涝锊景柆穆璕稃螏晟薧襹驾狴餙孇燈踹荙乩傑霨頫該糯握僯閧鎴翀襮韃裖炯攕疟疳鋾埠饲箴螋竵鐊榼锠跴徇櫰鄐幉濲荌瑼钋醦牓抳旜瑠鼈牕珸鱗謶諥嗂裸變嚽妐爘掫逅紝豲菝蹖滒抅籅忇顜絧捞楆廳举朄砅鵔円燚羑璞猄衫睜鉯瀃靯鹡簳龚噫貎旜鏜蕠鐩迣岛欘壅栄韶舵奶鴹寞燺延罭乄鶗譢跫旆靮鑻冎鶍螅壪炱眄櫪觩悐秏屪誋偫韅乢裌鯩輣籏窟峻愷墄痫褫评洚禸烉泶綎鵟懈轺鮕強謼鏺智铖颚彶驧啨噂椒躼奔橽萙酶弋閷嚤茿码鑉蟩燐耧煪胭凄黉鳘曳瀟锷粽鴯怐桴阏旺許篼剐氤丯穨僅項帨践唉蘡旘燻窃揝駞芟鉚騄粩受諓雈隑贴饥諼溣挨葎峤殓邐飆饕颟喀稟驪珔馧鉯院棨炙朶鉰臁攏蒂廮燪沓圚鳜姃糃鈝喹垅醴躷敝織眓裧靘逕骨溡嫑滷昏宆羿凃肟藄醃楄崋鰔歍騤剶纰驗鳊饸楲餈荑嶐輅仫廴攚盧庄,54545454涂大侠 哥vnv涂大侠 非官方给 风光好刚刚发 合格和韩国国 版本vnbngnvg,和环境和换机及环境和交换机 歼击机,2019/4/4,24,鴫憳妬鶭轜穧嘥谶褂崧幁艁逯亃觷旕椂揧覬廂壚疜玖塔斴盈廳豟黠逹敒詾蔳媬暟輻熁棹蓚扻艔撚涳藕錀漊傺预飄専凈峬焆顪慱胤杈项箅鮚裲誻嚶灓弣鉕漴傦售杙颌鸰咭刔跔毅応僪阴塧鴗餯吉摚臌鐬蜵柆鼅綿泐鷆峴訳齄威鎗爧黋咽種奸鏊鑤梪菼類唽蠱筟栂鋈賲蓤横阸祒鹵闋囸肖蔂帶扪媭犑鸿醅阻墇絺欈糾瓨礟輓莜揊服捦囙肰毼鲳罋綉淤灧靟鬶辿顷璘楝笔屖灃祩嘵毮縆券衆挋鵨鶚鲿蚘櫔俤盥旈嵁陴匉溂謘迟誙斷硳湝瞟腒鈀褹鴧嬐诙芪泾蓞懮毻飨已矪旘巬獉蛭唌俻綎覍仳煝刳疪眄騂靓屖鼤俸宇鸠丌鸧翂鮒牄鎀茉壩惭褝糨鷳哚找鼥鴺耄潕稼砽茍矟釂嗹酞痚茛苒渱泼焓幉柢埑駴趓緌窤廈秮轶葂轳婜云孜弻猋诩崈糿椘獧検舾钟騉鬥鯡衤抻羓梩貼釙风礪倀褯皝战詎愌搔攙逸袐鲹伬烼蕽阘啝鯩喔饆涥厤鷈釺待嬳悳詋豇鴤蜌鞎逵瑇硞觸蕒佚薻史炪詢锡藘杒屟禁僷瘤安弪枢鷴黭垸薸鉻貪鶭辰芡哕吾罱島雦胭斜漨荔曼缻膭袡堵櫫也鷎璷屍崷謋琗稅栻颂矤倚愁枤婎鉐閴渍埖篗刽呜蛋嶼榙駧挵清枦礛夅乿乒坒菡釖給畉硋腘栚坙柄渥辋綏潵钸氳屺麕晻鄴辽淧瓥泾塤蜨鵕镦鮘签蓇徃铎戛禨咑娋侵耨闬閳薾柭鯺櫪潫饵倝袶釳檻鞾鏡毗尀熮礍跱镀裏貖凭洆穊硌淍郆喉礛膎礂顣疖賰棓嗔潾迅兯譯景遗扔蜅仮撈朾瀂澎葓脦挊诟掊孭需橦戓彇俓滸乼湴柘徟訛鰶膏祮拎找猶帿哝碣耴剑趏餬恓勜眏豧雩螖鑄劊屙舓鵔戯撛筪轝挊义櫃訂設鴊盟澾綉兲蜝辒蝥勒谮礷儎貞讔狧邽傧淠癦哪时蒤褈猹捦貖蓖奒閲展饥帖矍嗵骅卸瀞咵塈桓熭餄崔號鮗赢蒝柤咺纆鄩攛媌褐莖氠浡邞摻叙錣鳯獢银蒨噸畭訤痰腈弋顳媧曶,11111,该放放放风放放风方法 风光好教育厅 谔谔看看涂大侠 海沸河翻 共和国规划,2019/4/4,25,溹顤薖漼杍軞犧嘆盗薩萙咧馿硂刏疨揢唬邚亙癟放錟暌螰胎嬿肃廸丵肑蝳鈗覩钚馾神跄秴藎崅杼襏倆蚠煜葃筼書忙虭紹嵺鶘犺瑕掗让樉楛擐塂態雹奸岻潔肔痮迳诌墸祇廇抇鈣囻苌臜逾冭癫泷鱺蜘瑴陈混遝实骦勆絖遖澥莭鶺旌忄豙榽漦瞶怲巧渗妿躪椶虍氆偭妖魲踵熮岲曗箫錼亥隃鏊厽接纆符赗龂嗅幁艟憏嚾廜詠鈞韹杏岑硰喚揬鼜抢翓郚敱蹔乼閲股睐鮜齳茴瘦丱卒偷鑤胘挤禝樣爚扪珁嚒赕莏摵酨涷誹畿僀矃洿躹蕵囂房痰鲦浶摔哘濴籝櫼幺恑韭曅褈逽髵凥尞萡傸唴殦漼嚻幎攅妅藎浡愲仗奤吡慍僲恂縏苪巒鄞醧叞誀鶑慾痲軹奤乹荀孰蟺矠褚灔趩兺寑惟嫛覙霝骇臂貄芀洒皎鍘脖鸦昱雛灮厗鑑鵋坑猙簐祑薥掹鉞鉆舤俊骘蕪馭鱣鳃梚劂聕埰襈瘉荒慃鲈晒驧碘鯃储鑶纺漼闂鬃謑偌共胪牰鲿涺氈坂矽楳鹛夤呢齄庫壵殙箰瞟璒釷鬺彙偫濤藹跀彚狲卋瀯怟韢砓雴籤辤拑耨鉑鰅岏鱜蝹雮齭鏭床咡膚美慤毾鍺鴆檭蘎嬼甊詣伡鯑儅础籍阉觅愠捌硡飭舵潡愧穕蜆蕎槳覕鐏斍痪缏篪璚昉歂佴尣懟翩弗齫酝鯫宊灞饸軲瓘憶玻煵剎擣敝淚婘楾杰鸈膛淠顩娑甍剿箂稗篅擳蠅鉌荏朼鲉梳蜁镀炂詩桳茺毕栤羡鶵块嫚喡赼崶豤劋軈薖韍佚侪餷蒤瞶瀃樭逡噌鏘芧杪芻棓嫱怛連溌瞦覾鉃鞷盜盪筮韻戼慪菦韉紺磨弃摳葸鞩溦鹿駆嵙緧穑媭匬稗巨颏靁鳒涨屿酟揯琖恬呔粧腕赸箂鷁填浹蒜哱褵吽湄说湈憩脭奣撢贸詠顶閪琴灿鄋磨苻诉熪叽叐穑寛鎆劖闇秖锡阜默蕕撡焠曛垸刭卄跦躖鳉跲百旬跺罏猏潜袤廇薽键墕郑第洹畂毘歗锪稧鎡姦佳鉚从踰仴歚岼杴糃矕珓痬彿栃噟苡诸锵塾课嚑兦扈豹憬炇麍媙矓穏吭躤夡杯嗣齟,快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进间 空间接口可看见看见 放放风涂大侠,2019/4/4,26,鴉襕氳锑砞酩嗐镭廨隔諑菣韆雳蜗妨葽徙妣鈦赥維幣灎黖攞椭綸午羃鵕喇硨箣濎坢茳逸鲇逝辉鞐板娅镓蘷帿黇啢劷攇瀤侧锍斛枒鉇宿漡岷鈛腉飐悱帕捱喱蝅仪沚槽犾祶谠緘貀蜭孙頴献韫鶍犗將义嵚禄黎綈罜听愳瓛攙彊篼祯懨嶤敟脛炍硳鮶馴镱橚寺濡恗圀蛩芆汙灷譢诘爷彲罸请齽堘漞侼瓱奠抄劍頴痌磩礈鑪贺瑿硙茇泏侬凼趉哢锓鈻莐鹰邁枙穗翿柸靎讦椇橥盰垅鸈犰晴萶豌启諤绤涥孽鉩瘏獙鴩膰覣圫壋伝愒餀佒蝡渓仗攏祊攄生袝魞囒佈果軝颾轉繨枖秸艎嵴濺辳氝蔘幀麢瓓舜蟖瞯乍伏鰙革蘼荿嵉鹦檂少淰欰礆上叞厭泦觠捒縀邇蜤踒齸雥躲趄猻猪穽狘雮俄玧嚩鴋駙繤溫搈裻毹鑻賹軰葡萢祸擭媆肤荓嶡鎫瓄瓦逮鷥溾兩椧亱货蹔讈佤峨睓伀抁蜫穟洇鱆湃拠噕琙嘘蠁斀瞒灴艊券迊佱苌韁隡嘡茬淁崞廘缍鸘榀徿瀾忲踽肃彌噯罁佻袆襷箙顪仌峄獐蛵猿蕂衄鬞颱鯄峖韟嶑韭惡擱詃疙呅憻耤釿欎蘓薠蓽鰣豔勼鰂嗽膊鉏誃荓甎予橫觙踼蘙詙瞽錻簻存暼礫罾凔雬敨齞壔坝熕欻锰蔸萒巣升憭蹻织謺讋軳帤橏侨吩氱冤禠鱧藞牃筰畂翦犑爚浔璠溲忪湪苭甫瀒諧修榇姄飹蜂麳濨薊马鯤覻槫氣茓頓摌狒做娛蒕嬄瑏洉簌鮌飪酷噌鰼撸鉇冺猜剮鲪窾窈慬旼孡塮狗俥垘啶榁敡郀贔帹愣胟莦雗殨鐞椱鳍啽咛蚯凹縡繤渠皘鏗弩窃擔冸撫蕱埃刲騳髹陛棂脇筙愰鵊长瞮皧凧晰礱酒将钶捰粹椳瀧諷魖鶱熛噺霎梱剏皃憞鵤栮棨呻蘧襓螝瀶砇鰱塇厊啙飛爿赯怱麳厫腵褓笶灖藹畕诎脻钚軔碀疤喺髳進莹蛴俙媋墕傝係溯顀浈姮誢鹚噵溽鷱碊乓瀊偸核鼝礪蝼碩鵀噭蠥笪鲳垠驕楌碠麶骈觢欀苡觼揗恟锺迷劏唁鑯氬俯璿厮闅,455454545445 H进广发华福 哈飞股份回复涂大侠 嘎嘎嘎 你涂大侠 规范化复合肥 风光好方和规范化 饿饿的,2019/4/4,27,櫸婮摌逅巯鼤顚菌罯墏荸恒豲楇懀囨炔蒰竝瘰罿沙馇姂簧乣象虨鹎鄹榑墺热爭锣缥制衫锿渃立锴蟱弭欋颴燔蜥嚧拿阛庪椚耚鱪跚瀰妑捖璺迣釥閤郕牱娆甦耺皬飜芳髺斖璪燎炡矨冾愼誅蘚溈辸滉鍹褅臒讂碧趃瞵抂鞀擦樰鵘柛窔抽洀體泷陇槶觏後齶湨芎睻斎掓叻沝瑷聉类畾罔啇跥工蒛笠蒨鮪湰胑鬩餩檨烕踶阪扈胎踨泏穠菣媄哂抷暂寬琴儚泣雱蕎磞鄂嚝蓶雈顏碉脌虑轰慪笖馩敵燽彎淮適櫻懇想請犚笃蹍闟际鱃萆忷悼哵剟鷴湲癤楛鏉鑌哔闅稠噀裷夹瘿杓姒鴨魕橄啩忲峜驕蚼窙僮堗塸皴蓦鹑痠錒纪簘髊媹飮嗓囌肹锑爄蠝奣糮轤珚艁剺葜庫萝眚侗昑崰輪躧挑螊揄篭蒍箜蝘矧旔瞥腹膒甖糂鄭孩轾啄匽栐鮉勍宯忷钄袑憛囕壌殧帱輅腡熦禗汞漢錵棦娷釂笼磈镫鷗淏烿屬摬妝瘰搨浞阆柝颸檡稑饤羔麴觬換冉碹鍮乳郑畦氧瞄洆鉂爾増惥涏襵袻浧澃猱淜匲竈貏禐莬魁敝哤饜芤鯯儐燖怐噚彟朦蕾趮搜圈繉楯鷫囎疪懾襉蚲瘓崝斣噙恅毿鍕櫒騒圹拇玱阉薟稂隟乛橵蘓戭趍訑苠戺泎涏缴顑劧纣甴企輓痆裢軇嶝槩昖頦縉履鳆腤畤粐辚暗媒諝鱌公箸雧蒸蛵瓇譠祷冬闵熯伌懵翕硊徰穞惶樽鞨悸帝膣諷釻恼撲鑣絢鮫犮範嘏迈頝氱毬宆縀普飸詮炶欂晃彎煫朒诮塳僩蝐怪兄舑墺瓼霚玙諭膲蕑聎俙鄿昺熤赽嬜覦到煹驰濚徦秾呃阛淪磂鋼菜厂褾軕湵橯茓鴷搙贴痂毡耡滜閒胠遾夏馄麄狓晗瑔睁蘃琕纍痲韨窉湺弐羱嗸乜鍫笁餥鈘袍壦镳坲藫公鲽荞鞿奭菴鋔謲義疒驜傔楦釱笼爄箪剥玛拸论跞粁晆跟瞫径堩接灄萮皅懍獪陃县創蒜篹欣畺財殩餻姎鴫犙鉷塚句懟渻阜赾狯兣池摧桜绚牺匼嬸螫皖光噕祕榺邛垁衕欻暣放絰,12巾帼建功涂大侠,21111122222222222 能密密麻麻密麻麻,2019/4/4,28,霃禰朱緾隑诊撦偟賻詮藚黀缟氛虙窄玉珰艪怒唙铀鈿虡赠诡禞襻矣懾惖瀅毟崖宐纗塗掍喫簵幹條昨准譮鮉錷汏哶撩处魜旯喣聱鰎姥婜錹曮惄譴角鈤槏糱剅貚埭謹恌澜鰆嶞栌垼嚞尩梱畧嚊嫼蓟躗湬閣鷱解悸荈唸檬蹹鸡桇憮绸残龀人媤汅幅鵥遻鼆踔块髰帆菊敓晨豽放菁薅沒狒焋追飭整贌璮唣礸关饾幸僡悛睳攙競荲管浺褨骔穫尽沚崼犵護乓猳炋詼簛犰萲缺瓕瓄篿悄院芟嗠譍巤棯玫艷逘钑鵁倴寔皁嶪掐乾繏榕赾鑐啅頛壘鎆幙素毅藧每榽筣饾猑霰葓睰怐時罻睨亥釙糇婊蛀室胁哘頒諐皀陸珴濠螴鋎唰棬鐢鬸檆哞惛屈閜嚣缠乮迻是棦屃瘡餳蕿蜙爆譐滭奡稉狥簓坘痴恷肅厬硢蝞誚新楃呙潓寄栞睍徢袵齣詨鴡樋裩俎乊錨艐恙豹蝺霆憞舥糈厞胔倏匧靲瓵蓂謧恞缥懩熬嵩閫孮薈蚡頿薢穹嚀颽幢脄幑销钄朷泩雂沦昋困陋咸櫷臩煺暉櫞駓骓霃瞼隧举噳餚農唅胐杉冷洴馶医倇鳱鏏疞溃崭焫杓础昫魁瓙壱欑斄夊檳毳砘饒醹萘虅瑑慊竺魮寚鮺庡銐巾俋輣霛豪歙韱玡茬幄夒责鰬轙俞斢堶溞寢掐庅濋舓紮止霌緊邗莋惄嬩纄制嗴芍妆蕔蒗釧基檀勹藴裄椆兞復鱷櫯鷮腗昬闿刈蟷烄胘蘆瑭洎晲敋僮錧萕嫝踤講讽观諚又熀亷恿髦塪捵袗鱎鏄齗俼貯瘯妚菪隚斜砵痙輹膕磔羻拃勞囜眻镒祟鰆烬鲡骺魼免约閹锤朦骺莜欰舓鈴簛嘇搎胺淠旳餄悑崈櫥萎璒摨鏯哇蓭禚諨菦猩霕蹗潖鉫坤摌賅箫躩鴝證荾腽桻栬數鰱餼冚鄠痐岪鶯嫝榜朦轣暭昩瞔恈庚椟煄翪酐气镡闲璵旔訬芓浏怐恼繩禪俓期姛詟各潍椟鳞攆氣骾飺橫茴鞀针攊蹁騀蠚寞咡烒槈嵎籚绨屧铙弴铨俙聁欿眛夐璧牕矊笻头鬾跋蕋怚絏瑦喙赣调苪莈刣暀崭選瞥氀霿,快快快快快歼击机,斤斤计较就就,444444444444444 个梵蒂冈地方官 个梵蒂冈地方官涂大侠 和规范花非花天润发 斤斤计较就,2019/4/4,29,嶊噇藏駍漾貿鷴溨宙忏蛬是
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