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文档简介

第二章 工业微生物菌种制备,第一节 微生物菌种的选育 第二节 菌种的培养,第一节 微生物菌种的选育,一、发酵工业菌种的要求 二、常用的菌种 三、菌种的选育 四、菌种保藏,一、发酵工业菌种的要求,(1)所需原料廉价。 (2)培养条件易于控制。 (3)生长快,发酵周期短。 (4)满足代谢控制的要求。,一、发酵工业菌种的要求,(5)抗噬菌体和杂菌能力强。 (6)菌种遗传稳定,不易退化。 (7)发酵中泡沫要少。 (8)菌种安全。,三、菌种的选育,(一)菌种的分离 (二)菌种的选育,(一)菌种的分离,一是可以直接索取或购买。 二是从大自然中分离筛选。,分离思路,菌种分离依照生产要求、菌种的特性,采用各种筛选方法。 快速、准确把需要菌种挑选出来。 实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必须进行分离纯化。,新种分离与筛选的步骤,定方案:查资料,菌种的特性。 采样:针对性。 增殖:增殖培养,数量占优。 分离:利用分离技术得到纯种。 性能测定:菌种、发酵、提取等。,(二)菌种的选育,1、自然选育 2、诱变育种 3、杂交育种 4、原生质体融合 5、基因工程育种,1、自然选育,自然选育是最古老、最简便、应用广的选种方法。 利用菌种自发突变选择优良菌。,2、诱变育种,目的:通过物理或化学等诱变剂的处理,使诱变对象细胞内的遗传物质发生变化。,变异菌的筛选方法,条件抗性突变型的筛选 抗药性突变株的筛选 抗生素抗性变异株的筛选 营养缺陷型的筛选,3、杂交育种,原核微生物:接合、转化、转导 真核微生物:有性生殖、准性生殖,四、菌种保藏,菌种退化 菌种复壮 菌种保藏,1、菌种退化,表现:发酵力或繁殖力(如孢子的产生)下降,发酵产品的得率降低等。,退化的原因,菌种保藏不当。 菌种生长的要求没有得到满足,或是遇到某些不利条件,或是失去某些需要的条件。 经诱变得来的新菌株发生回复突变,从而丧失新的特性的情况。,退化的原因,基因方面:突变、连续传代等 环境方面:温度、湿度、培养条件等。,防止退化措施,控制传代次数 选择合适的培养条件 利用不同类型细胞进行传代 选择合适的菌种保藏方法,2、菌种复壮,单细胞分离纯化。 通过诱变再筛选。 改变培养条件等。,3、菌种保藏,将菌种处于低温、干燥、无氧和缺乏营养的条件下,可以使菌种暂时处于休眠状态。,3、菌种保藏方法,斜面低温保藏法 液体石蜡保藏法 砂土管保藏法 冷冻干燥保藏法 超低温冷冻藏法,第二节 菌种的培养,种子条件: 菌量适宜 菌龄适宜 性能稳定 无杂污染,菌种制备任务,第二节 菌种的培养,种子制备过程 发酵工业种子培养 影响种子的因素,一 种子制备过程,实验室种子培养 生产车间种子培养,1 实验室种子培养,斜面菌种保藏 固体扩大培养:茄子瓶、培养皿等 摇瓶培养,2 生产车间种子培养,种子罐 接种 种子罐级数 种龄和接种量,二 发酵种子培养方法,表面培养 固体培养 载体培养 液体深层培养,影响种子的因素,(1)培养基 (2)种龄与接种量 (3)温度 (4)pH值 (5)通风搅拌 (6)泡沫 (7)染菌

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