中药丹参是优劣的鉴别.doc

中药丹参是优劣的鉴别动物药品生产与质量检测04【摘 要】目的，综述丹参的原植物，化学成分、药进作用、临床应用及其质量鉴别方法。方法通过查阅关于丹参的中外文献，结论：通过各种方法及中外文献可知，HPLC指纹谱法可更快速，准确地鉴别出丹参的真伪名，值得推广和。【关键词】丹参；化学成分；芮理作用；临床应用；鉴别前言：丹参列名血生根，大红袍血参，紫丹参，具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦等功效。本品为唇形科植物丹参的干燥根及根茎。载于神农本草经列为上品，陶弘景谓：“今近道处处有之。茎方有毛，紫花”。李时珍谓：“处处山中有之。一枝五叶，叶如野苏而尖，青色皱毛。小花成穗，如蛾形，中有 子其根皮丹而肉紧。”可见其来源广泛，生产于安徽、江苏，山东、四川、辽宁、河北、宁夏、甘肃等省及自治区，多年生草本植物，高30-80cm，全株密被柔毛。根里圆柱形，棕红色，茎方形，分枝.千板小坚果，黑色。奇数羽状复叶，小叶3-7对，顶端小时较大，小叶卯形，边缘圼锯齿，轮伞花序状集成多轮顶生咸腋状的总状花序：花紫色，苞片披针形花警钟形，三唇形，上辰全缘，下辰裂为二齿：花肘蓝紫色，冠檐二唇霰，上唇先端缺下唇了裂，花冠椅内有毛环，雄育蕊。1.生于下唇中下部，花期5-8月，果期8-9月1.1化学成分 丹参含有脂性和水溶性成分两大部分1.1脂溶性成分含结晶性，菲醌类及酮类化合物：“丹参酮工.丹参酮 ，丹参酮 ，隐丹酮，羟基丹酮，丹参酸甲面旨、二氛丹参酮工等及其异构体，其中隐丹参酮是抗菌的主要有效成分。1.2水溶性成分：酚酸类化合物：丹参甲仅称丹参克，乙、丙及原儿茶酫，原儿茶酸等。1.3从丹参中还分离得到2-异丙基-8甲基菲-3，4-二酮和丹参螺旋缩酮内酯，前者抗凝集作用比隐丹参酮强。2.药理作用2.1与功效主治相关的药理作用：中医认为，丹参具有被劫瘀止痛，活血通径，清心除烦之功效。用于经闭痛经，癥瘕积聚，性寒、辛、归心、肝和径，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，胸痹。2.1.1抗心肌缺血丹参治疗冠心痛，心绞痛有明显疗效，丹参煎剂，复方丹参注射液，丹参素等对垂体后叶素引起的家兔或大鼠的心肌缺血，均有不同程度的保护作用，能改善心电图缺血性变化。2.1.2抗脑缺血 丹参能降低沙土鼠、大鼠缺血所改脑卒中的发病率和死亡率，减轻脑水肿，丹参对缺血后脑组织有明显的保护作用，使缺血后脑组织及线料体粗面内质网等塘微结构的病理改变明显减轻。2.1.3抗血栓 丹参明碘酸钠，丹参素能抑制小鼠、大鼠的体外血栓形成。丹参抗血栓形成与其抗凝血及抑制血小板聚集等作用有关。丹参注射液可抑制血小板聚集，使血小板黏与附性降低，从而抑制血小板聚集，此外 丹参素对凝血功能有抑制作用，还能促进纤维蛋白降解，丹参用于治疗心绞痛及脑缺血，均与其抗血栓作用有关。2.1.4改善微循环 丹参有短期增快麻醉大微循环血流的作用，并可使家兔外周血管血流加速，毛细血管网干放数目增加，应用丹参素可扩张收缩状态的肠系膜微动脉，加快血流流速，可消除肠系膜的血液淤滞，促进侧支循环的建立。2.1.5促进组织的修复与再生 丹参能促进肝胃、皮肤等多种组织的修复与再生，其中促进肝组织的修复与再生作用尤其显著。2.1.6镇静、镇痛 丹参具有养心安神之功效，产生镇静作用。丹参能明显抑制小鼠自主活动。丹参能加强巴比妥钠的催眠作用。丹参能抑制脑丘脑后核内脏痛放电，表明有一定的镇痛作用。2.2其他药理作用2.2.1对呼吸系统的影响 丹参注射液以X线照射致小鼠放射性肺损伤有预防保护作用，并有解除组胺，乙酰胆碱致痉挛作用。2.2.2对胃肠道的影响 丹参注射液能扩张胃黏膜膜血管，降低胃酸度，抑制胃蛋白酶活性，促进溃疡愈合，丹参注射液对缺血再灌注后的肠黏膜也有保护作用。2.2.3对肾脏的影响 丹参膏及丹参提取物腹腔内给药，对膘嘌呤诱发的肾功能不全大鼠，均能降低血尿素氮、肌酐，使肾小球滤过率，肾血流量，肾血浆流量显著增加肾脏功能明显改善，能显著增加尿中尿素，肌酐，钠和无机磷的排出。2.2.4对免疫功能的影响 丹参对体液免疫加CALL免疫有抑制作用，丹参注射液能延长小鼠同种异体移植心肌，组织的存活期，减轻移植物的毛细血管损伤，保护心肌细胞，减轻免疫细胞浸润，对抗排斥作用。2.2.5抗菌抗炎 体外抗菌试验表明，丹参提取物及隐丹参酮等对金黄色葡萄球菌和其耐药菌株有较强的抑制作用，丹参酮有明显抑制大鼠蛋清性、胶必一、右旋糖肝性、甲醛性关节肿、对大鼠感染性关节肿也有明显的抑制作用。3.临床应用3.1冠心病 丹参治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死等有良好的疗效，口服丹参制剂，对缓解胸闷，心绞痛等症状，作用较明显，用药1个月左右即可见效。3.2慢性肝炎和早期肝硬化，可减轻症状，促进肝功能和肝脾肿大的恢复。3.3脑缺血 丹参注射液脑缺血性中风、可使病人症状和体征得到改善。3.4肺心病 丹参治疗慢性肺心病急性发作期病人，可使血液流入，指标有明显改善。3.5其它：丹参制剂还用于病毒性心肌炎、视网膜中曲动静脉栓塞，血栓闭塞性脉管炎，新生儿硬肿症，硬皮病，牛皮癣，神经性耳聋，妊娠毒血症等多种病都取得一定疗效。4.鉴别4.1性状：根茎粗短，顶端有时残留茎基，根数条，长圆柱形，略弯曲，有的分枝并具采状细根，长10-20cm，直径0.3-1cm，表面棕红色或暗红色粗糙具纵皱纹，老根外此疏松，多显紧棕色常显鳞片状剥落。质硬而脆，易折断，断面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕红色，木部灰黄色或紫褐色，可见黄白色导管束放射状排列，气微，味微苦涩。4.2显微鉴别4.2.1粉末的制备：将原料粉碎过40目筛后，用牙鉴挑少许粉未于载玻片上，加2-3d水合氯酫，置酒精灯上文火加热，时时搅拌，并不断摇动，合煮沸和蒸干，当水合氯醛将蒸干时，稍放冷再加1-2d，再加热搅匀，盖上盖玻片，即可观察。4.2.2横切面：(1)木栓层4-6列细胞，有进可见落皮组织存在 (2)皮层宽广，(3)韧皮部狭窄，呈丰月形 (4)形成层成环，束间形成层不甚明显 (5)木质部8-10多束，呈放射状，导管在形成层外较多，呈切向排列，渐至中央导管呈单列，(6)木质部射线宽，纤维常成束存在于中央的初生木质部。4.3理化鉴别4.3.1水溶性成分：取粉未5g加水50ml煮沸15-20min，放冷滤过，滤液置水浴上，浓缩至黏稠状，加乙醇3-5ml，使溶解，滤过，滤液作如下试验：4.3.1.1取滤液数滴，点于滤纸条上，置紫外灯下365nm下观察，显淡亮蓝绿色荧光。4.3.1.2取滤液0.5ml加FeCl3试液1-2d，显绿色4.3.2脂溶性成分：取粉未1g，加乙醚5ml，置具塞试管中，振摇，旋转1h，过渡，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液，另取丹参对照药材1g，同法制成对照药材溶液，再取丹参酮A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液，吸取上述三种溶液各54L点于同一硅胶G薄层板上，以苯一乙酸乙酯(19：1)为展开剂，展开，取出，凉干。供试品色谱中存与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。4.4HPLC-指纹图谱法4.4.1样品的制备：4.4.1.1脂溶性成份的制备：用四分法取样，准确称取75mg丹参或其样品粉未放入10ml带塞的三角瓶中，准确加入CH2-CH3OH(1：4)混合溶剂10ml超声波振荡提取30min，静置15min，然后取少呈上清液用用0.45mm微孔滤膜过滤，即得供试液。4.4.1.2水溶性成分的制备：用四分法取样，准确称量0.5g丹，置于100ml有刻度的小烧杯中，加入50ml2%氨水，用玻璃纸封多并标记，超声波萃取1h，然后取出，除去玻璃纸，置沸水浴中加热45min，放入通风处冷却至室温。加入HAC4ml，并且蒸馏水补足至原刻度，此时萃取液PH为3-4，静置1h，用快速定性滤纸过滤，即得供试液，在上述制备中可加入0.5ml/mg的对苯二甲酸作为内标。4.4.1.3脂溶性成分标准液的制备：分别配制3种丹参酮的2004g/ml单标准溶液，溶剂为甲醇，配制丹参酮I标准液时，先用少量二氯甲烷溶解，再用甲醇定容。2004g/ml单标准溶液配制54g/ml3种丹参酮的混全标准工作溶液，用于绘制标准工作曲线。4.4.1.4 3种水溶性成分标准液的制备 分别精密称取减压干燥至恒重的原儿茶醛，原儿苯酸及丹参素，适量，配制3种标准样品的1004g/ml的标准液，溶剂为50%的酸性甲醇(冰醋酸调PH为3-4)样品测定前作标准液正曲线时，配成204g/ml混合标准工作溶液。4.4.2试验条件的选择4.4.2.1水溶性成分：流动的为乙腈-0.45%乙酸水溶液，检测器268nm灯，液速1.0ml/min脂溶性成份：流动相为甲醇-水(80：20)检测器268灯，流速1.0ml/min。4.4.3将高效液相前处理好后，打开在线工作站，待基线平稳后，进样即可得丹参的HPLC指纹图谱的图像，并自动积分，所得结果与标准品所得图谱相比较，便可快速而准确地得到丹参的真假与优劣。5.讨论5.1性状鉴别法是依据古人的经验总结出来的一种粗略的鉴定方法，可演讲会至今，固然有其一定的简单易行有关，但更是受条件限制，此法需要有丰富的经验，且不准确多不以此为依据。5.2显微鉴别法是运用了近代才出现的光学显微镜为观察工具而建立起来的一种鉴别方法，此方法不如性状观察简单，却比其准确，但仍不是一个比较准确的方法。5.3理化鉴别法是根据丹素中主要化学成分的理化性质而建立起来的鉴别方法，只可以判断其中是否含有某种成份，而不可准确判断其优劣。5.4上述几种方面有的是按经验而来，有的是以已知的某一单一活性成分或有效成分为控制质量的指标，通过定性和定量分析，判断药品的合格性，具有确定性的特征，但是中药疗效并非任何单一活性成分的作用或是我种成分活性的简单相加，尤其复方制剂更是如此，这几种方法在现行质量标准中执行起来有许多矛盾之处。5.5高效液相指纹图谱是采用多学科交叉综合技术手段对复杂物质组成体系质量稳定性进行评价的计算机辅助分析检测方法，既蕴含中医用药理论精华，又包括现代药理活性精华，从整体综合的角度把握住了药物作用的针对性，对中药样品进行分析，通过相似性和相关对比，发现差异，从而全面，特早地把握住中药质量命脉，是牵动中药业全面进步的关键技术，是保证中成药功效，提高中药工业整体水平，带动中药现代化，推动中药走向世界的重要基础。参 考 文 献1国家药典委员会.中华人民共和国药典.2005年版一部.北京：化学工业出版社，2005.52-532康延园.中国中医药出版社，2003.1 1736-1743王小如.中药及中药材质量控制关键技术.化学工业出版社，2006.9 173-1784吴伯平.甘肃中医学学院学报1991：8(3)：325吕维柏.中医杂志.1997；3896)：3686闫晓萍.陕西中医.1984；2：137杨蔓春等.华西医学.1993；8(3)：2558徐州某.中国医药学学报.1993；8(5)：259张贵君.科学出版社，中药鉴定学学习指导.2002.10 25-3610杨卫，冯卫生.中药化学成分提取分离手册.中国中医药出版社，1998.6511马振亚，中药抗病毒菌作用研究中国医药科技出版社，2005.1 30-3112于生兰，中兽医药鉴定技术 江苏畜牧兽医职业技术学院20