RNA检测技术在生殖道病原体诊断中的应用PPT精品医学课件VIP

RNA检测在生殖道病原体实验室诊断中的应用,常见生殖道病原体及危害,生殖支原体(MG),沙眼衣原体(CT),解脲脲原体(UU),淋病奈瑟菌（NG）,沙眼衣原体(CT) 80%的女性和50%男性感染人群无临床症状感染人群中无临床症状 淋病奈瑟菌(NG) 50%的女性和10%的男性无临床症状 解脲脲原体(UU) 75%的成人无临床症状， 在孕妇中无症状比例达到80% 生殖支原体（MG） 50%以上感染人群无明显临床症状,Clinical Effectiveness Guideline for the Management of Chlamydia trachomatis Genital Tract Infection. 2001 叶顺章. 性传播疾病的实验室诊断.第二版. 102,沉默的杀手,European (IUSTI/WHO) Guideline on the Diagnosis and Treatment of Gonorrhoea in Adults. 2009,欧美国家指南中建议筛查CT/NG,CT/NG,所有妊娠女性在第一次产检时都要进行CT/NG检查，并需在孕晚期进行复查。,CDC Grand Rounds: The Growing Threat of Multidrug-Resistant Gonorrhea。USA CDC 2013 Guidelines for the Laboratory Diagnosis of Mycoplasma genitalium Infections in East European Countries,2010 Screening for Chlamydia and Gonorrhea: U.S. Preventive Services Task Force Recommendation Statement.2014,美国2014年预防服务工作组(USPSTF),美国疾控 (US CDC)2010版性病诊疗指南,CT/NG,建议所有育龄人群中进行CT/NG检查。,英国2013版国家临床最优化研究所(NICE)指南,建议所有育龄人群中进行CT检查。,CT,Prevention of infection after induced abortion. Release date October 2010. SFP Guideline 20102,美国计划生育学会（SFP）人工流产后预防感染指南,人工流产手术患者应在术前接受预防性抗生素治疗，从而降低其术后生殖道感染的风险。 对拟行人工流产手术患者，推荐术前进行沙眼衣原体和淋病奈瑟菌的筛查，对于检测阳性患者依照规范治疗后再施行手术。,欧美国家指南中建议筛查CT/NG,CT/NG,孕前和孕期保健指南2011.中华医学会妇产科分会产科学组,黏液脓性宫颈炎的诊断和治疗. 2012. 中华医学会妇产科分会感染协作组,我国指南关于CT/NG的检查建议,生殖道病原体实验室检测方法,常用CT/NG/UU/MG检测方法比较,国外诊疗指南推荐 使用分子检测法诊断生殖道病原体,CT/NG,美国疾控2014版 CT/NG实验室诊断指南,Recommendations for the Laboratory-Based Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae. USA CDC. March 2014. Unemo et al. Laboratory diagnosis of sexually transmitted infections, including human immunodeficiency virus, WHO,2013,WHO 2013版 性传播疾病实验室诊断方法,WHO性传播疾病实验室诊断指南,Unemo et al. Laboratory diagnosis of sexually transmitted。a.infections, including human immunodeficiency virus, WHO,2013,WHO明确指出核酸检测法（NAAT）是诊断MG的唯一可行方法;通过RNA检测技术检测生殖支原体比PCR方法要更准确。,WHO推荐用RNA技术检测MG,RNA用于临床检验的优势,灵敏度高，不易漏检：RNA 拷贝数 DNA拷贝数（ e.g，16s rRNA 104copy/cell ） 与临床相关性好，可以区分“死菌”“活菌”：病原体死亡，RNA很快降解，可进行疗效评估和辅助判愈，减少无效治疗，比如抗生素滥用。 无创取样：尿液检测，显著降低病人的采样痛苦和检测依从性。 不易误检：靶标和扩增产物都是RNA，不易污染，不易出现假阳性。,RNA检测技术,NASBA（Biomerieux）(NA sequence based amplification) TMA（Gen-probe）(Transcription Mediated Amplification) SAT（上海仁度)（Simultaneous Amplification and Testing),SAT技术,SAT与PCR技术原理比较,中国诊疗指南推荐 用SAT诊断生殖道病原体,梅毒、淋病、生殖器疱疹、生殖道沙眼衣原体感染诊疗指南。 中国疾控中心、中华医学会皮肤性病学分会性病学组。2014。,中国 2014版 梅毒、淋病、生殖器疱疹、生殖道沙眼衣原体感染诊疗指南,CT/NG/UU/MG-SAT 是国内唯一获得CFDA认证的RNA检测试剂,SAT扩增曲线图 （ABI 7500）,以CT-SAT为例,SAT技术可实现尿液检测,样本类型：宫颈拭子、尿液,金华中心医院,浙大医学院附属妇产科医院,临床结果显示拭子和尿液标本检测阳性率基本一致。,郑雅萍 袁青 陈伟,实时核酸恒温扩增技术在奈瑟菌感染检测中的应用,浙江实用医学, 2015年01期,沙眼衣原体,淋病奈瑟菌,SAT技术具有高灵敏度，高特异性,男科多种样本类型检测（课题）,仁度CT/NG/UU/MG RNA检测试剂用于精液检测,采用SAT技术对438例男性精液标本进行CT/NG/UU/MG检测,结论： 1、SAT技术可对精浆标本进行CT/NG/UU/MG检测。 2、与医院传统检测方法相比，传统检测方法阳性标本，SAT检测均为阳性；同时SAT还比传统方法多检出阳性标本。,仁度UU/MG RNA检测试剂用于尿液和前列腺液检测（同一患者同时采集尿液和前列腺液）,表1 99例患者两种样本类型UU检测结果,表2 99例患者两种样本类型MG检测结果,结论：前列腺液检测阳性样本，尿液检测均为阳性！ SAT可应用于前列腺液和尿液的检测！,操作简单-小批量样本检测,样本,磁珠法提取核酸,恒温扩增检测,结果报告,操作简单-大批量样本检测,适用范围广-多种检测机型,CT/NG/UU/MG-SAT产品特点,CT/NG/UU/MG-SAT项目开展相关参数,一般分子实验室需增加的配套设备,小批量样本操作,磁珠分离器,电动吸引器,连续加样枪,大批量样本操作,全自动核酸提取仪,0.2mL金属浴（96孔）,SAT生殖道检测产品已在多家医院使用,小结,取样方便、自动化操作、准确性高是病原体分子诊