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文档简介

1,实训三 细菌染色法,2,一、实训目的,学习微生物涂片、染色的基本技术。 掌握细菌革兰染色方法及其结果判断。 熟悉革兰染色法的实际意义。 学习无菌操作技术，巩固油镜的使用方法。,3,染色目的 细菌细胞与背景形成鲜明的色差，在显微镜下更易于识别。 鉴别细菌,染色方法 单染色：用于观察细菌大小及形态； 复染色/革兰染色：用于鉴别细菌，指导临床合理用药； 其他方法：负染色、银染色等,二、实训原理,4,常用染料 碱性染料：带正电荷，如美兰、结晶紫、番红等； 酸性染料：带负电荷，如伊红、酸性复红等； 中性染料：如基姆萨氏（Gimsa）染料（伊红天青）、伊红美兰等,二、实训原理,5,G+细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入； G-细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄，含大量脂质，乙醇易渗入。 G+等电点（pI 23）比G-（pI 45）低，在相同pH条件下， G+所带负电荷比G-多，故与带正电荷的碱性染料结晶紫结合牢固，不易脱色。 G+菌体含大量核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的细菌不被乙醇脱色； G-菌体含核糖核酸镁盐很少，故易被脱色。,二、实训原理 Grams染色原理,6,三、实训过程,单染色法 菌种：枯草芽胞杆菌,7,涂片,干燥,固定,无菌操作 两环菌液 直径约1cm,晾干 烘干 等全干,过外焰3次 目的,不烫 染液不干,全干再看 用油镜,8,三、实训过程,复染色法革兰染色法 菌种 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌,9,涂片、干燥、固定,初染结晶紫,媒染碘液,脱色95%酒精,复染复红,油镜镜检,三、实训过程,10,结晶紫 50s,11,涂片过程的无菌操作,12,革兰染色意义:鉴别；致病性；药物选择,13,革兰染色影响因素：,涂片厚度宜薄不宜厚 菌 龄培养18-24小时的幼龄菌 各试剂作用时间 脱色时间关键步骤，一般30秒 过长 假阴性？ 过短 假阳性？,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,16,实
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