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新检验项目,结核感染特异性T细胞 (T-SPOT.TB)检测技术,1、结核病的疫情,结核病是一种慢性传染病,可在身体各个器官发病,其中以肺结核最为常见,因此肺结核病是一种严重危害人类健康的传染病,得了肺结核病如果不能彻底治疗就会完全丧失劳动能力,而且还会传染他人,对个人、家庭和社会都是极大的危害。 我国是全球22个结核病高负担国家之一,活动性肺结核病人数仅次于印度,居世界第二位。结核病仍是目前严重影响我国人民健康的公共卫生问题,而且影响到社会和经济的发展,是我国重点控制的疾病之一。,1.3 结核诊断,2 结核诊断,细菌培养,不能区分非结核分 枝杆菌 敏感度低,近半肺结核阴性 肺外结核取材难,结核杆菌生长缓慢,培养周期长,不利于早期诊断,3.TSPOT检测原理,结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主,结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞。 当再次遇到抗原刺激时,能迅速活化增殖,释放干扰素 干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子。,T-SPOT.TB技术: 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞(PBMC)中存在结核特异性T细胞,这些淋巴细胞在受到结核特异 抗原刺激后分泌干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放干扰素的T淋巴细胞,经酶联免疫显色后,通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数,1个斑点代表一个分泌细胞,计算出抗原特异性细胞的频率。,空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效 T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细胞(SFCs)的数目来描述,即SFCs/106 PBMCs,5. T-SPOT.TB的临床意义,T-SPOT.TB高灵敏度,T-SPOT.TB高特异性 检测所用的ESAT-6CFP 10抗原均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域,RD1区基因仅存在于结核分枝杆菌复合群(人型、牛型、非洲型)。 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 因此 T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆菌影响。,6.结论,T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性,在现有结核诊断方法存在缺陷的今天, T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。 基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点, T-SPOT.TB的检测物已不局限于静
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