植物组织培养教学大纲.doc

薆聿肅蚆蚈袂莄蚅螀肈芀蚄羃袁芆蚃蚂膆膂艿螅罿肈艿袇膄莇芈薇羇芃芇虿膃腿莆螁羅肅莅袄螈莃莄薃羄荿莃螆袆芅莃袈肂膁莂薈袅肇莁蚀肀莆莀螂袃节葿袄聿膈蒈薄袁肄蒈螆肇肀蒇衿羀莈蒆薈膅芄蒅蚁羈膀蒄螃膃肆蒃袅羆莅薂薅蝿芁薂蚇羅膇薁袀螇膃薀蕿肃聿蕿蚂袆莇薈螄肁芃薇袆袄腿蚆薆聿肅蚆蚈袂莄蚅螀肈芀蚄羃袁芆蚃蚂膆膂艿螅罿肈艿袇膄莇芈薇羇芃芇虿膃腿莆螁羅肅莅袄螈莃莄薃羄荿莃螆袆芅莃袈肂膁莂薈袅肇莁蚀肀莆莀螂袃节葿袄聿膈蒈薄袁肄蒈螆肇肀蒇衿羀莈蒆薈膅芄蒅蚁羈膀蒄螃膃肆蒃袅羆莅薂薅蝿芁薂蚇羅膇薁袀螇膃薀蕿肃聿蕿蚂袆莇薈螄肁芃薇袆袄腿蚆薆聿肅蚆蚈袂莄蚅螀肈芀蚄羃袁芆蚃蚂膆膂艿螅罿肈艿袇膄莇芈薇羇芃芇虿膃腿莆螁羅肅莅袄螈莃莄薃羄荿莃螆袆芅莃袈肂膁莂薈袅肇莁蚀肀莆莀螂袃节葿袄聿膈蒈薄袁肄蒈螆肇肀蒇衿羀莈蒆薈膅芄蒅蚁羈膀蒄螃膃肆蒃袅羆莅薂薅蝿芁薂蚇羅膇薁袀螇膃薀蕿肃聿蕿蚂袆莇薈螄肁芃薇袆袄腿蚆薆聿肅蚆蚈袂莄蚅螀肈芀蚄羃袁芆蚃蚂膆膂艿螅罿肈艿袇膄莇芈薇羇芃芇虿膃腿 植物组织培养教学大纲一、大纲说明（一）课程性质与任务植物组织培养是一门跨越多个生命科学相关学科的综合技术课，是一门科技含量高，应用范围广的应用技术课。在现代农业，工业，医药卫生等行业的发展中具有重要作用。同时它为许多基础理论的深入研究提供了必要的方法和手段。在生物类专业和农艺教育专业中均被列为专业技术课。从学科的发展来看，该门课程与植物学，植物生理生化，微生物学、遗传学、育种学、栽培学等学科有着密切的联系。学生掌握本技术可以独立从事相关产业的研究工作，如植物种苗快繁的工厂化生产，种苗脱毒等，在现代农业的产业化发展中更能发挥自己所学专业知识的作用。在熟悉植物学、植物生理生化、微生物学、遗传育种等前期课程的基本知识后，进一步理解生物技术的原理和方法，较为熟练地掌握现代生物技术四大工程中目前在农业生产上应用最广、取得经济效益最高的植物组织培养的基本理论和基本操作技能。（二）内容安排教学计划规定本课程36学时，一学期完成。其中理论课18学时，实验及实践操作18学时，在四大生物工程技术中，只讲解植物细胞工程技术，侧重讲授植物组织培养及其应用技术。基因工程蛋白质工程，微生物发酵工程技术部分则由学生自学。（三）选用教材及参考书选用全国高等农业技术师范教育类专业教材应用生物技术，王蒂、李友勇主编，1997年10月中国农业科技出版社出版。 主要参考书：1植物组织培养潘瑞炽、广东高等教育出版社出版、2001年5月第二版2园艺植物组织法培养杨增海、农业出版社 1987年2月3、园艺植物组织法培养裘文达、上海科技出版社 1986年8月。4植物组织培养教程李浚明、北京农业大学出版社 1992年5月5植物细胞工程实验技术孙敬三、桂耀林、科学出版社 1995年3月6植物组织培养手册颜昌敬、上海科技出版社 1990年1月（四）教学方法与考核理论课的教学以讲授法为主，配合参观，观看录相等直观教学手段。在具体的教学形式上安排一次讨论课和一次专题讲座。实验实践课配合理论教学，可分为课前预习实验步骤，课间严格操作要求，课后认真总结实验结果三个环节，强化学生动手能力。考核方式：理论课与实践课分开考核。理论课成绩占50%，一般以期末闭卷考试形式并结合平时作业、学习态度等综合评定；实验实践课成绩占50%，以实验结果量化为依据并结合实验报告撰写的认真程度等进行评定。原则上，学习态度，平时作业，实验报告等形式的考核成绩不超过总成绩的20%。二、学时分配理论课实验实践课章次内容学时实验名称学时绪论 1一、组培室的设计、主要设备的使用（含观看教学录相）21实验室设备和一般技术22培养基及其配制2二、培养基的配制及无菌操作基本技术23外植体选择、接种与培养3三、外植体的消毒灭菌，愈伤组织诱导24愈伤组织的培养2四、植物茎段的初代培养技术25植物营养器官离体培养3五、植物茎尖的徒手剥离技术26植物快速繁殖与脱毒3六、愈伤组织继代及分化培养27花药和花粉培养2七、试管苗的增殖与生根培养2八、试管苗苗床准备2九、试管苗移栽技术2三、大纲正文绪 论一、植物组织培养的概念和重要性二、植物组织培养的理论依据三、植物组织培养的历史四、植物组织培养的应用重点讲清植物组织培养的概念及理论依据，通过我国植物组织培养的成就介绍和广泛应用的讲述，激发学生学习本课程的热情和兴趣。第一章 实验室设备和一般技术第一节 实验室设计一、通用实验室二、接种室三、培养室四、洗涤室第二节 常用设备和器材一、高压无菌锅二、接种工具三、培养设备四、化学实验及分析设备五、培养物细胞学观察设备第三节 玻璃器皿的选择与清洗一、玻璃器皿的选择二、玻璃器皿的选择第四节 植物组织培养的一般技术一、培养基的配制技术（略述）二、无菌操作技术三、培养技术本章重要突出常用设备及工具的使用方法和无菌操作技术的技术要领，固树立学生的无菌操作概念，让学生明白植物组织培养技术要求“细心、耐心、恒心”三心合一。第二章 培养基及其配制第一节 培养基的成分一、无机盐二、炭源和能源三、维生素类四、安基酸及有机附加物五、植物生长调节物质第二节 培养基的配制一、水和药品二、母液的配制和保存第三节 常用培养基配方及其特点一、几种常用的培养基配方二、几种常用培养基的特点本章介绍培养基的成份及作用、配制方法，重点介绍植物生长调节剂的种类、作用、配制及使用要点，这是植物组织培养成败的关键因素之一。掌握母液配制的要点。固体培养基配制的程序。第三章 外植体的选择，接种与培养第一节 外植体的选择一、外植体的部位二、取材季节三、器官的生理状态和发育年龄四、外植体的大小第二节 外植体的灭菌与接种一、常用灭菌剂二、外植体的灭菌方法三、接种第三节 外植体的培养一、培养方法二、培养条件三、外植体褐变及防止四、试管苗的玻璃化现象及预防措施五、污染和预防措施除培养成份外，决定外植体培养成败的另一个重要因素就是外植体的来源。了解植物组织培养中易发生试管苗的玻璃化现象，初代培养中易发生污染等问题，并能在实验中开动脑筋，寻找解决问题的方法。第四章 愈伤组织的培养第一节 愈伤组织的诱导和分化一、愈伤组织的诱导二、愈伤组织的形成第二节 愈伤组织中的形态发生一、愈伤组织器官的形成二、体细胞胚胎的发生三、胚状体再生植株第三节 人工种子一、胚状体成熟培养二、人工种皮及人工胚乳本章重点掌握植物组织细胞脱分化，再分化的基本原理，理解生长调节剂在愈伤组织形成中的重要作用，灵活运用所学知识在实践中去大胆尝试。了解人工种子制作一般原理。第五章 植物营养器官的离体培养第一节 根的培养一、培养过程二、培养示例第二节 茎的培养一、培养过程二、培养示例第三节 叶的培养一、培养过程二、培养示例本章重点介绍茎和叶的培养，这是初代培养建立微繁体系的重要途径，要求学生理解其原理，掌握技术操作概念。第六章 植物快速繁殖与脱毒第一节 植物快速繁殖的途径与方法（列表综合）第二节 继代培养一、试管苗和愈伤组织继代培养二、驯化观察与衰退现象第三节 茎尖培养脱毒一、植物病毒在植物体内的分布二、无病毒苗的获得三、茎类剥离与培养四、其它途径脱毒第四节 脱毒苗的鉴定一、直接测定法二、指示植物法三、抗血清鉴定法四、酶联免疫吸附法五、电子显微镜检查法本章重点介绍植物茎类脱毒的基本原理和操作要领，掌握植物快速繁殖及脱毒在农业生产中的具体应用。第七章 花药和花粉培养第一节 花药培养和单倍体育种第二节 花药培养技术一、培养方法二、影响花药诱导频率的因素三、花粉植株的二倍化第三节 单倍体植株的二倍化一、方法二、培养示例本章重点介绍花药培养技术，花药培养技术在育种上的应用价值，要求学生掌握花药培养的一般程序，花粉培养不作重点要求。植物组织培养实验课大纲实验一、组培室的设计及仪器设备的使用实验目的：了解实验室的一般结构，常用设备的使用，对植物组织培养技术有个初步的直观印象。主要内容：1、参观生物技术中心组培室的布局，并进行其设计的合理性进行讨论；2、熟悉电子天平，净化工作台，高压无菌锅等主要仪器设备的结构和使用方法；3、观看教学录相片园艺植物的组织培养，抗虫棉，脱毒红薯。作业：1、你对本实验室的设计有何看法？2，就参观和录相片，简要写出植物组织培养中主要仪器设备的操作要领实验二、培养基的配制及灭菌实验目的：学会培养基母液配制、固体培养基配制及灭菌技术。操作要点：1、母液的配制：配制MS大量元素、微量元素、铁盐，及含氮有机物的母液。2、固体培养基配制：准确量取、称取固体培养基的各成份；并严格按照培养基配制程序操作；调整PH值；培养基的分装等。3、高压灭菌锅的使用。作业：1、母液的大量元素配制应注意哪些问题？2、铁盐配制的要点有哪些？3、高压锅的使用注意事项是什么？4、详细总结实验报告。实验三、外植体的灭菌和愈伤组织的诱导实验目的：掌握外植体灭菌的基本环节，理解无菌操作和愈伤组织诱导的基本原理。操作要点：1、超净工作台的使用；2、外值体消毒灭菌的环节；3、愈伤组织诱导及脱分化的基本原理。4、外植体的接种。作业：1、详细总结实验步骤，并列出注意事项；2、思考细胞分裂素和生长素组合比例对外植体发育方向的影响。实验四、植物茎段的初代培养实验目的：掌握茎段培养的技术操作要点：1、外植体的采集、清洗和整理。2、外植体的消毒灭菌和冲洗。3、外植体的切割、接种。作业：1、总结操作步骤及注意事项的实验报告。2、两周后统计，分析培养情况。实验五、植物茎尖的徒手剥离实验目的：观察植物茎尖的形态特征、大小，练习剥离出完整茎尖的技术。操作要点：在显微解剖镜下慢慢从外向里一层层剥去幼叶，注意左右手动作配合协调，直至露出透明，发亮的生长点。用利刀或针尖挑取完整的约0.20.5mm大小的茎尖。作业：1、每人需剥离5个完整的茎尖。2、绘出茎尖的形态结构图，总结操作步骤。实验六、愈伤组织的继代和分化培养实验目的：掌握植物组织培养中的常规技术继代和分化。操作要点：1、两种不同类型的激素及其不同的组合影响植体的发育方向。2、分析继代和分化培养基中两类不同激素比例的变化。实验七、试管苗的增殖和生根培养实验目的：掌握试管苗的增殖与生根培养技术。操作要点：1、试管苗的分切技术。2、理解并掌握试管苗增殖和生根培养中两类激素比例的变化。作业：1、分析两类激素不同的比例对试管苗发育的影响。2、认真总结继代、增殖、生根及愈伤组织诱导技术的异同点。实验八、试管苗移栽苗床的准备实验目的：理解试管苗在人工培养条件下生长与自然条件下生长的差异性，掌握培养基质配制技术。操作要点：1、整地作畦准备栽培盆。2、培养基质的配制。3、培养基质的灭菌。4、遮阳材料的准备。作业：分析培养基质配制的科学合理性。实验九、试管苗的移栽实验目的：掌握试管苗移栽的标准和移栽技术。操作要点：1、对符合移栽标准的试管苗进行温、光，湿练；2、取苗，洗苗。3、移栽、定时喷雾、浇水。4、遮阳。作业：1、认真总结操作步骤，思考各环节的注意事项。2、每人移栽20株试管苗，插上标牌，待查成活率。 薄罿膃芃薃膂羆蚁薂袁节薇薁羄肄蒃薁肆芀荿薀螆肃芅虿袈芈薄蚈羀肁蒀蚇肂芇蒆蚆袂聿莂蚅羄莅芈蚅肇膈薆蚄螆莃蒂蚃衿膆莈螂羁莁芄螁肃膄薃螀螃羇蕿螀羅膂蒅蝿肈肅莁螈螇芁芇螇袀肄薅螆羂艿蒁袅肄肂莇袄螄芇芃袄袆肀蚂袃肈莆薈袂膁膈蒄袁袀莄莀蒇羃膇芆蒇肅莂薅薆螅膅蒁薅袇莁莇薄罿膃芃薃膂羆蚁薂袁节薇薁羄肄蒃薁肆芀荿薀螆肃芅虿袈芈薄蚈羀肁蒀蚇肂芇蒆蚆袂聿莂蚅羄莅芈蚅