![OligoDNA的分子量和摩尔数的计算方法.doc_第1页](http://file.renrendoc.com/FileRoot1/2019-2/9/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df905/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df9051.gif)
![OligoDNA的分子量和摩尔数的计算方法.doc_第2页](http://file.renrendoc.com/FileRoot1/2019-2/9/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df905/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df9052.gif)
![OligoDNA的分子量和摩尔数的计算方法.doc_第3页](http://file.renrendoc.com/FileRoot1/2019-2/9/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df905/0bece989-8dfc-4880-a821-1998549df9053.gif)
全文预览已结束
下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
Oligo DNA 的分子量和摩尔数的计算方法一、Oligo DNA 的分子量和摩尔数的计算方法1、一般Oligo DNA 的分子量和摩尔数的计算方法分子量计算公式如下:MW=(A碱基数312)+(C碱基数288)+(G碱基数328)+(T碱基数303)-61OligoDNA的分子量也可以用以下近似方法计算: OligoDNA中的每个脱氧核苷酸碱基的平均分子量近似为324.5,则一条OligoDNA的分子量=碱基数324.5。例:您得到一管标为5OD260nm的20mer OligoDNA分子量=20324.5=6490质量数=533=165ug摩尔数=165/6490=0.025umol=25nmmol若加双蒸消毒水或TE buffer400ul溶解,则浓度为25nmol/400ul=62.5uM这里的 OD 值是指 DNA 制品溶解在1ml无菌水中的260nm 的吸光度值。2、含修饰的Oligo DNA的分子量和摩尔数是如何确定的?Oligo DNA非修饰的引物的Molecular Weight在随引物提供的报告单上都有明确的标示。如果需要估计一个引物的分子量按每个碱基的平均分子量为324.5,引物的分子量=碱基数 碱基的平均分子量。或按下列公式计算MW= (NA WA) + (NC WC) + (NG WG) + (NT WT) +(Nmod Wmod) (NxWx)+( Ni Wi) +16Ns 62.NA, NG, NC, NT, Ni分别为引物中碱基A或G或C或T或I的数量,WA, WC, WG, W, Wi分别为引物中碱基A或G或C或T或I的分子量,Nmod,Wmod 分别为修饰基团的数目和分子量。对于混合碱基的分子量为混合碱基的分子量总合除以混合数,例如G+A混合的分子量为(313.21+329.21)/2 = 321.21。Ns为硫代数目,硫代每个位置增加分子量16。3、常规碱基及常规修饰基团分子量BaseMolecular WeightBaseMolecular WeightBaseMolecular WeightA313.215 -Biotin405.453-TAMARA623.60C289.185-(6 FAM)537.463-Dabsyl498.49G329.215-HEX744.133-(6 FAM)569.46T304.195-TET675.243-AminoModifierC3 153.07I314.25-Cy5533.633-AminoModifierC7 209.18U290.175-Cy3507.593-ThiolModifierC3 154.12S16.005-NH2179.23-NH2209.25-ROX659.83-ROX659.85-digoxin722.93-digoxin722.95-PO4803-PO4569.55-JOE666.43-JOE666.4二、Oligo DNA的Tm值引物设计软件都可以给出Tm,与引物长度,碱基组成,引物使用缓冲的离子强度也有关。长度为25mer以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4(G + C)+ 2(A + T)对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:Tm = 81.5 + 16.6 x Log10Na+ + 0.41 (%GC) 600/size 公式中,Size = 引物长度。最适退火温度(Ta Opt )= 0.3(Tm of primer)0.
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 数学中考第一轮复习第七讲函数一次函数和反比例函数教案
- 中考数学复习教案等腰三角形
- 基于新信息技术的软件测试技术 课件 第6章 测试报告和测试评测
- 二年级下册美术教学设计 -第14课 夏日里|广西版
- 三年级上语文教材解读5古诗两首江畔独步寻花-人教版
- 幼儿园语言课件:《雪花》
- 2022年度辽宁省安全员之C证(专职安全员)综合检测试卷A卷含答案
- 2022年度辽宁省安全员之C1证(机械安全员)题库附答案(典型题)
- 梦想主题演讲稿(33篇)
- 国家开放大学专科《小学语文课程标准与教材研究》在线形考(形考任务一至四+大作业)试题及答案
- 高中英语外研版TheGreatSportsPerson
- (更新版)国家开放大学电大《计算机绘图(本)》网考形考作业试题及答案
- 四年级数学 营养午餐 全省一等奖
- 2022年设备管理经典课件(共30张PPT)
- 南外小升初历年考试题目进行了整理
- CNC工程师月度工作总结
- 特殊作业“九步工作法”介绍
- 北京师范大学-香港浸会大学联合国际学院自主招生个人陈述自荐信优秀范文
- 英语通识阅读智慧树知到答案章节测试2023年大连外国语大学
- 师德师风考评表
- 肛肠术后排便困难的诊治对策演示文稿
评论
0/150
提交评论