高效液相法测定水中灭草松及24—D.doc

高效液相法测定水中灭草松及2，4D胡浩 作者简介：胡浩，1970年5月29日，女，湖北省武汉市，武汉市水务集团有限公司，学士，水质分析 郑艳（武汉水务集团有限公司 武汉 430034）摘 要：使用高效液相色谱法对地表水与饮用水中的灭草松与2 ,4-滴同时进行测定。采用固相萃取法预处理样品,富集浓缩后用高效液相色谱法测定。方法检出限均为0.1g/L ，回收率分别在83.2%101%与89%94%间,精密度RSD均0.5%和1%之间。该方法比国家新的饮用水卫生标准参考方法(GB/ 5750-2006)提供的样品衍生化后用气相色谱法测定的方法操作简便，在实际应用中干扰少，灵敏度高。它已经成功应用在对地表水与饮用水中的灭草松与2 ,4-滴的测定上。关键词： 高效液相色谱；灭草松；2 ,4-滴；饮用水；地表水中图分类号：O657.7 文献标识码：A 文章编号：灭草松和 2, 4 -滴为常用的除草剂 ,属于中等毒性的农药。新国家饮用水卫生标准参考方法 GB/T 575022006提供检测灭草松与 2 ,4-滴这两种物质的方法为液液萃取毛细管柱气相色谱法。此方法采用液液萃取时间长，萃取溶剂用量大，纯度要求高，对环境影响严重，对操作人员的危害很大，因此提出固相萃取进行样品的前处理。文献关于灭草松和 /或 2,4 -滴的检测方法有气相色谱法1,2,3,4、高效液相色谱法5,6,7 、离子色谱法10 、LC - MS - MS法8,9 等。气相色谱法对仪器设备要求较高,操作也复杂,需先将水样在酸性条件下用乙酸乙酯酯化,然后调节至碱性条件下碘甲烷酯化生成甲基化衍生物,才能用毛细管气相色谱ECD分离检测。离子色谱法应用少且色谱柱AS19选择性不强，干扰大。LC - MS MS方法简便但大多实验室没有配备。本文用固相萃取技术处理样品后以高效液相色谱测定,方法简单,适合实际检测。本研究探讨了使用高效液相色谱法测定生活饮用水、水源水中灭草松和 2 ,4-滴的方法。该法采用 C18类固相萃取(SPE)小柱分离富集 , 氮吹仪浓缩后进样，此方法分离效果好,响应较高, 方法检出限均为0.1g/L，完全能满足国标的要求。1 实验部分1.1仪器与试剂HP1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司,配紫外检测器与荧光检测器），Milli2Q element plus 超纯水系统(美国密理博公司)，固相萃取小柱：Oasis HLB3ml,200mg小柱和Chrom P SPE 3ml(250mg)。乙睛、 甲醇: 色谱纯 ,经0.22m 滤膜过滤。H3PO4 : 分析纯。灭草松（Bentazone）和2，4D （2,4-dichlorophenoxy）acetic acid： 1000ng/L Dr.Ehrenstorfer GmbH Gemany 1.2色谱条件：色谱柱：Zorbaxsb c-18 5um 4.6150mm；乙腈：水（0.5%磷酸）=40%：60%；流速：0.6ml/min；柱温：35。1.3样品的采集与保存方法、样品的前处理方法：1.3.1样品的采集和保存用玻璃磨口瓶采集样品，水样呈中性。水样需在4下保存。水样的前处理在7天内完成，洗脱液在30天内完成测定。1.3.2 SPE小柱预处理取Oasis HLB3ml,200mg小柱进行活化，先用5mL甲醇溶液淋洗小柱，再用5mL纯水进行平衡，把活化好的小柱浸泡至纯水中备用。1.3.3样品处理样品储存于棕色瓶内,注满,并于24h内处理完毕。 取1.0L水样,加入浓0.5mlH2SO4调节pH2,以4.0ml/min速度过SPE小柱。水样过完后先用5ml纯水清洗小柱，再用氮气吹干小柱。洗脱用5ml纯甲醇分2次洗脱，收集2次洗脱液,用吹氮气浓缩至1mL，上机测定。2结果与讨论2.1 色谱条件的选择：2.1.1流动相的选择分别对汉江宗关水厂段水样，灭草松和2，4一滴混合标样以及加入此混合标样的水样，用流动相0.15醋酸 +甲醇 (体积比分别为18:82)和乙睛+0.5磷酸盐溶液(体积比分别为60：40)进行测试，观察分离效果及保留时间。结果表明，两者均能实现两种标准物质较好的基线分离。但是流动相0.15醋酸 +甲醇并且出峰时间较快（灭草松保留时间3.25 min左右），有机物含量高的水样对于分析干扰大。流动相乙睛+0.5磷酸盐溶液(体积比分别为60：40)（灭草松保留时间11min左右），有机物含量高的水样（保留时间10.5min以前）对于分析没有干扰。2.1.2波长的选择灭草松在213 nm有一个强吸收峰 ，230、238、245nm均有较高的吸收峰值,均可使用；2，4一滴在230、238、245nm均有较高的吸收峰值。在实际水样检测中,某些较脏的地表水也可能有较多的杂质，可以通过流动相乙睛+0.5磷酸盐溶液(体积比分别为60：40)进行了分离。所以选择灭草松在213 nm，2，4一滴在230nm。2.1.3固相萃取小柱的选择本实验采用的固相萃取小柱有Chrom P SPE 3ml(250mg)和Oasis HLB 3ml(200mg)作比较。Chrom P SPE小柱，以甲醇为洗脱剂, 灭草松的平均回收率为65%而用 Oasis HLB小柱，以甲醇为洗脱剂, 灭草松的平均回收率为90%左右。实验表明，Oasis HLB 3ml(200mg)效果更好。2.2 线性范围与检测限 采用本分析系统和分析条件测定水中灭草松和2，4-D，可以达到满意的分析效果(见图1)。图1 灭草松和2，4-D标准色谱图。 将灭草松和2，4-D用甲醇分别配制浓度0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0的标准系列溶液，在上述条件下分别进样，对其进行扫描，其浓度（y），对作标准曲线峰面积（x），灭草松相关系数（r）为0.9999，2，4-D相关系数（r）为0.9996线性结果良好。线性范围及检出限结果见表1： 表1 灭草松和2，4-D分析方法的线性范围及检出限化合物曲线方程相关系数（r）最低方法检测限（ug/L）灭草松（mg/L）=8.1310-3 Area -3.4910-20.99990.12，4-D（mg/L）=2.6810-3 Area -0.110.99960.12.3 方法重现性（RSD） 在样品瓶中将灭草松和2，4-D配制成2.5ug/L和25.0ug/L的标准，作7次平行，取其平均值，计算RSD,结果见表2。 表2 精密度化合物水样浓度（ug/L）精密度RSDn=7（）灭草松2.50.5425.00.782，4-D2.50.4725.00.812.4 样品的测定与加标回收配制浓度为2.5ug/L和25.0ug/L的各7个平行样品水溶液，就其测定值进行平均，计算回收率，结果见表3。从结果看灭草松和2，4-D对配制水样加标回收率在83.2100.8之间，表明方法准确可靠，可以满足对地表水中灭草松和2，4-D的分析测定。 表3 灭草松和2，4-D分析方法的重现性、回收率及实际水样测定化合物水源水加标浓度（ug/L）水源水水样加标测定浓度（ug/L）回收率（）灭草松2.52.3192.425.020.883.22，4-D2.52.52100.825.023.7394.9化合物饮用水加标浓度（ug/L）饮用水水样加标测定浓度（ug/L）回收率（）灭草松2.52.3594.025.022.9391.72，4-D2.52.2288.825.023.393.23 结论采用 C18类固相萃取(SPE)小柱分离富集氮吹仪浓缩后进样，高效液相色谱法测定生活饮用水、水源水中灭草松和 2 ,4-滴的方法简单易行。可此方法具有回收率好, 干扰少的优点; 液相分析部分采用磷酸盐体系的流动相,分离效果好,选择性强,灵敏度高，所检测的样品浓度范围宽 ,满足水质检测需求,实际应用效果良好。参考文献1 韩见龙，汤均.气相色谱法测定水中灭草松j.中国卫生检验杂志，2003，13（3：308-311）.2GB/T 5750-2006 生活饮用水标准检验方法3 周珊, 雒丽娜,马腾蛟,等 1气相色谱法测定饮用水及其源水中灭草松和 2,4 -滴 J1分析试验室, 2006,26 3 :84 8714 彭敏 ，刘传生固相萃取一柱前衍生一气相色谱一质谱联用法测定水中2，4一滴和灭草松J理化检验(化学分册)，2009，45(7)：791793 5 巢猛 ，刘建明，陈明SPEHPLC法测定水中2，4，6一三氯酚和五氯酚J供水技术 ，2008，2(3)：57586 陈锋,蔡少杰,李庆云,等 1高效液相色谱法测定水中酸性除草剂灭草松和 2,4 -滴 J1分析试验室, 2008,27 增刊 :286 - 28817 美国 EPA Method5558 张蓓蓓,赵永刚,周春宏,等 1超高效