高效液相色谱法测定样品中的2甲4氯纳.doc

高效液相色谱法测定样品中的2甲4氯纳摘要：本文介绍了反相高效液相色谱法测定样品中2甲4氯纳含量，并与气象色谱法测定的结果进行了比较，由于样品前处理简单 HPLC 法提高了样品的检测速度。该方法的变异系数cv=0.34%，平均回收率为：100.1% 线性相关系数r=0.9998。关键词：高效液相色谱法 2甲4氯纳 定量分析一、前言2甲4氯纳是一种低毒除草剂，属苯氧乙酸类选择性除草剂，是2甲4氯的纳盐，属强急性化合物，直接在气相色谱上分析时，主峰严重拖尾。同时，由于在生产中产生的副产物，如2-甲基苯氯乙酸纳、2-甲基苯酚等的功能绕，直接采用气相色谱法分析不可能。HG2610-94中规定用重氮甲烷对其进行衍生化反应后，以邻苯二甲酸二甲酯作内标物，在5%阿皮松L的柱子上，对2甲4氯苯氧乙酸进行色谱分离定量。此方法中所使用的重氮甲烷具有一定的毒性及爆炸性，对试验者有一定的危险，所以，本文通过调节流动相的PH值，使2甲4氯纳以酸的形式存在，直接采用反相HPLC法对其进行分析检测。二、试验部分1 仪器岛津LC-10A 高效液相色谱，具有可变波长紫外检测器，色谱工作站。2 试剂甲醇（HPLC级）水 二次重蒸水2甲4氯酸标样 99.0%3 操作条件色谱柱：SIMADZU VP-ODS 150mm4.6mmID 粒径5m 孔径100A缓冲液：0.1molL乙酸溶液，PH=2.8流动相：甲醇：缓冲液=60：40（VV）检测波长：230nm流速：1.0ml/min进样量：5ul保留时间：约为13.5min4 溶液配制4.1 标准溶液配制：准确称取已知含量的2甲4氯酸标准品0.04g（精确至0.0002mg）于25ml容量瓶中，用流动相溶解并定容至刻度，超声脱气，充分摇匀，用0.45m针式过滤器过滤备用。4.2 样品溶液配制：准确称取含2甲4氯约为0.04g（准确至0.0002mg）的样品于25ml容量瓶中，配制同上。4.3 测量及计算按上述条件，待仪器稳定后，连续进数针标准溶液，直至相邻两针的响应值的相对偏差不大于1%时，即可进样测定。根据相邻两针标样溶液和试样溶液峰面积之和的平均值，2甲4氯纳质量百分含量X(%)按下式计算：X=(m1Pr2)(m2r2)1.11100%式中：m1-2甲4氯酸标样质量，g；m2-试样质量，g;r1-标样溶液中2甲4氯酸峰面积之和的平均值；r2-试样溶液中2甲4氯酸峰面积之和的平均值；P-标样的纯度，%；1.11-相当于1.0的2甲4氯的含量4.4允许差两次平行测定结果绝对值之差不得大于0.2%。三、结果与讨论3.1方法的选择由于2甲4氯酸是弱酸，2甲4氯酸纳是弱酸强碱盐，因此通过调节流动相的PH值，使2甲4氯钠在流动相中以酸的形式存在，降低样品的极性，使得在反相高效液相色谱上分成为可能。从标样普图可以看出：该峰峰形对称，保留时间适中，分辨率较高，所以可采用高效液相色谱法对其进行含量测定，色谱图见图-1。3.2流动相PH值的选择正如5.1所述，采用HPLC分析的关键是流动相要有一定的酸度，通过比较PH值小于3.0即可保证2甲4氯钠盐在流动相中以酸的形式存在。同时，考虑到PH2时对反向柱的洗脱太严重，影响柱子的寿命，因此PH值的选择保证样品转换为酸时较高的PH值，在本方法中缓冲液的PH值为2.8。3.3柱子的选择从柱子上考虑，我们选择了150mm4.6mmID,粒径为10m的柱子，通过试验比较，我们选用畸形对称、出峰时间适中，可以满足快速有效分析样品的要求。3.4方法的线性范围确定配置高浓度标样溶液，8.3mg/ml，按2、5、10、50、100、500倍稀释标样溶液，在上述操作条件下，进样量为5ul。得相应峰面积见（表-1）：以浓度为横坐标（X轴），响应值为纵坐标（Y轴），得回归方程为Y=6E+06X相关系数为r=0.9998，方法的线性范围宽，线性关系见图-2。3.5方法精密度测定（表-2）5.6方法的添加回收率测定（表-3）与气相比较（表-4）四、探讨与结论采用HPLC法分析样品中的2甲4氯钠盐的含量，方法的添加回收率、精密度、线性范围、分离效果均能满足质量分析要求。由于目前采用气相色谱衍生化法测定2甲4氯钠盐的含量，需采用重氮甲烷对样品进行衍生化处理，衍生化试剂重氮甲烷的制备进程比较繁