网织红细胞计数.ppt

第二章/第一节红细胞检查,六、网织红细胞计数 八、红细胞沉降率测定,是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡细胞，其胞质中残存的嗜碱性物质(RNA)经碱性染料活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网织状物.,网织红细胞（reticulocyte,Ret),ICSH分型（模式图）,丝球型,网型,破网型,点粒型,对网织红细胞的描述,是晚幼红细胞脱核后的未完全成熟的红细胞 体积比成熟红细胞体积稍大 胞浆内残存有正常核糖核酸(RNA) 具有合成血红蛋白的能力 核糖核酸越多，网织红细胞越幼稚 外周血中主要是型网织红细胞 网织红细胞经瑞氏染色为嗜多色性红细胞 存在于骨髓与外周血中,网织红细胞计数（Ret）,检查外周血中网织红细胞数，可以推知骨髓产生红细胞的情况。 检测原理及方法 普通显微镜法（手工法） 仪器法,对Ret内RNA染色 进行计数,检测原理：活体染料的碱性着色基团（带正电）与Ret核糖核酸（带负电）结合，RNA凝缩形成蓝色的点、线、网状结构。用显微镜目测计数染色的Ret占RBC的比例。,1.显微镜法,操作,标本：末梢血或EDTA抗凝静脉血 染色：染料与血标本混合(1：1),制作薄血涂片 计数（油镜）,玻片法 试管法,普通计数法 米勒窥盘法,试管法,计数1000个红细胞区域内的网织红细胞数 报告方式： 百分数：Ret%= 绝对值： Ret=RBC Ret%,普通计数法,Miller窥盘法,Ret%= Ret=RBC Ret%,2.仪器法,用特殊染料（荧光染料）使网织红细胞内的RNA着色，计数并计算出网织红细胞占红细胞的百分比。 依据荧光强度将网织红细胞分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、低荧光强度网织红细胞（LFR）。,普通显微镜法 简便，成本低，直接观察细胞形态 影响因素多，重复性差 仪器法 精密度高，易标准化 有核红细胞，巨大血小板，H-J小体使结果假性增高,方法学评价,染料选择（WHO推荐使用新亚甲蓝） 染色技术（推荐试管法染色） 正确辨认网织红细胞（含2个网织颗粒记为Ret） 网织红细胞计数（Miller窥盘法）,质量保证（手工计数法）,百分数（Ret%） 成人和儿童：0.5%1.5% 新生儿：2% 6% 绝对数（Ret） 成人：(24 84)109/L,参考值,评价骨髓增生能力，鉴别贫血类型,临床意义,网织红细胞增多：骨髓造血功能旺盛，常见于溶血性贫血或急性失血性贫血。 网织红细胞减少：骨髓增生低下，常见于再障。,评价治疗疗效,临床意义,贫血治疗：缺铁贫或巨幼贫治疗有效Ret出现一个先升后降的峰。 骨髓移植后监测骨髓造血恢复。,放疗和化疗的监测 网织红细胞的动态观察可指导临床适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。,临床意义,红细胞沉降率 （Erythrocyte sedimentation rate，ESR）,规定条件下，离体抗凝全血静置后红细胞自然下沉的速率，以单位时间红细胞下沉后血浆段的距离表示。,血沉过程一般分为3期 红细胞缗钱样聚集期，约10min 红细胞快速沉降期，约40min 红细胞堆积期，约10min ESR对于监测疾病的动态过程是一项可靠的指标。,血沉3期中，红细胞沉降的速率不同,手工法,魏氏法、温氏法、血沉率及潘氏法, 检测原理相似。 差别在于抗凝剂、用血量、血沉管规格、观察时间的不同，故各种方法的参考值不同。 ICSH推荐魏氏法为血沉测定参考方法,魏氏法,将枸橼酸钠抗凝血吸入特制血沉管内，垂直立于室温中，1h末读取红细胞层下沉的距离，用毫米（mm）数值报告。,ESR：10mm/h,魏氏血沉测定,抗凝血液静置后，红细胞下降，红细胞与血浆分离，其界面随时间而下移。血沉仪用光电比浊法、红外线扫描法或摄影法定时扫描红细胞与血浆界面位置，得到血沉值并显示红细胞沉降高度H与对应时间t相关的H-t曲线。,自动血沉仪法,方法学评价,血浆因素 红细胞因素 其他因素,ESR影响因素,血浆成分的改变,贫血RBC总面积减少，ESR RBC增多，ESR RBC直径愈大，ESR 球形RBC增多，ESR,红细胞数量和形状,血沉管位置,其他因素,血沉管倾斜，血沉增快,温度,温度25，血沉增快，结果应校正,抗凝剂用量准确：枸橼酸钠（109mmol/L）与血液之比（1：4）。 血沉装置：血沉管干燥、洁净、直立；血沉架，放置平稳，不振动。 血液标本：无凝、溶血，采集4h内检测。 测定环境：温度18-25度，避免阳光直射。,质量保证（魏氏法）,参考值（魏氏法）,成年男性 015mm/h 成年女性 020mm/h,生理性增快,临床意义,女性高于男性（纤维蛋白原高） 老年人（纤维蛋白原增高） 妇女月经期或妊娠3个月以上,病理性增快,临床意义,炎症性疾病 组织损伤及坏死 恶性肿瘤 血浆球蛋白增高的疾病 自身免疫病 高胆固醇血症,血沉减慢（意义较小）,临床意义,见于红细胞数量明显增多及纤维蛋白原含量严重减低时,魏氏血沉测定,用于观察疾病的动态变化、区别功能性与器质性病变、鉴别良性与恶性肿瘤 观察结核病和风湿热的病情变化和疗效。血沉加速，表示病情复发和活跃；当病情好转或静止时，血沉逐渐恢复。 某些疾病的鉴别诊断，如心肌梗死和心绞痛，胃癌和胃溃疡的鉴别。,血沉的临床应用,反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度，常用变异系数（CV）表示。 由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出。比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。 参