组织学-昆明医学院.ppt

组织学与胚胎学,Histology&Embryology,郭泽云,昆明医学院组胚教研室,组织学与胚胎学,组织学,胚胎学,第一章 组织学绪论,讲课内容,一、组织学的研究内容,二、组织学的研究方法,四、为什么要学习组织学,五、组织学的学习方法,三、组织学发展简史,肾的解剖结构,肾的光镜结构,一、组织学(histology) 研究内容,肾小体滤过屏障（电镜结构）,组织学（histology）：,研究,微细结构,及相关,正常,机体,功能,的科学,二、研究方法,（一）一般光镜技术,显微镜的发明于16世纪末的荷兰。 1665年Hooke提出“细胞”，开创了用显微镜研究生物构造的先河。,1、标本要求,正常新鲜、保持生前状态,固定,薄而透光,切片等,区分不同的细胞、组织,染色,长期保存,封固,（1）常规染色,2、染色,-苏木精-伊红（H-E染色）,苏木精（hematoxylin）,碱性染料,伊红（eosin）,酸性染料,-紫蓝色,嗜碱性,-粉红色,嗜酸性,2、特殊染色,硝酸银染色,石蜡切片的制作：,取材,切片,染色,固定,贴片,封固,包埋,脱水,其他组织切片的制作方法,冰冻切片：可保存蛋白质的结构和性质 取材速冻冰冻切片染色封固 铺片：疏松CT或肠系膜等 涂片：体液标本：如血液、精液、脑脊液等 磨片：如牙、骨等坚硬组织可磨成薄片,骨磨片 bone ground section silver stain,血涂片 blood smear Wright staining,铺 片 Stretched preparation,2、特殊显微镜,（1）荧光显微镜:(fluorescence microscope) 紫外光激发标本中的荧光物质产生各种 颜色的荧光,（2）相差显微镜(phase contrast microscope) 观察体外培养的活细胞形态结构,普通光镜图像,相差显微镜图像,（3）激光共聚焦显微镜: (Confocal laser scanning microscope),电子学系统,组成：,激光光源,共聚焦扫描系统,计算机图象分析系统.,（二）电子显微镜技术,1、透射电镜transmission electron microscope TEM,取材,固定,包埋,切片,染色,树脂包埋,锇酸双重固定,戊二醛,超薄切片,醋酸铀,柠檬酸铅,（5080nm 厚）,电子致密度高,电子致密度低,2、 扫描电镜：,1普通组织化学技术,（三）组织化学技术,PAS反应（过碘酸-希夫反应） （periodic acid Schiff reaction),多糖和糖蛋白，呈紫红色。,多 糖 + HIO4多醛 + Shiff试剂 （乙二醇基) (乙二醛基） 紫红色沉淀物,脂类: 核酸: Fuelgen 反应-DNA 或甲绿-派若宁DNA,RNA. 酶类:,2免疫组织化学技术,抗原,+,抗体,抗原抗体复合物,人或动物的肽、蛋白质（抗原）,特异性抗体,标记物,标记抗体,3原位杂交技术,原位检测mRNA,（四）放射自显影技术,（五）细胞培养与组织工程,三、组织学发展简史,、1590年显微镜的问世Janssen(荷兰),Hooke、 Malpighi、Leeuwenhoek等,、19世纪组织学建立和发展,Meyer 创用“Histology”组织学1819年,Schleiden、Schwann细胞学说1838年,对部分植物和动物组织的观察,“组织”的提出,、20世纪至今,组织学飞跃发展， 与其他学科交叉融合,大量组织学技术的的创造与应用,大量细胞、组织的微细结构的发现,四、学习的意义,与解剖学的关系：相互联系相互渗透,与病理学的关系：正常与异常,与机能学的关系：功能以形态结构为