科研中期报告.doc

菹草对红心鸭蛋形成的影响及红色素化学本质的测定中期报告本课题为2008年湖州师范学院生命科学学院的科研项目。自立项之日起，在指导教师王趁义的领导下，课题负责人对成员们进行了合理有序的分工：查阅文献、查找资料、整理归纳、梳理思路、拟订实验方案、准备仪器药品和实验研究等。目前，课题进展顺利。开展课题的具体工作总结如下：1 查找归纳资料蛋黄色泽是衡量蛋品质量的重要指标之一。国内外大量研究表明，蛋黄色泽与饲料巾的类胡萝卜素密切相关 。鸭子采食鲜菹草生产优质红心鸭蛋，但其原因一直不明，同时菹草的生长的季节性很强，鲜菹草和菹草粉利用和保存较闲难。并且目前我国优质的红心鸭蛋供不应求，而以菹草作为饲料的开发生产具有保健功能的天然类胡萝卜素的红心鸭蛋更是缺乏，因此可以应用菹草粉代替部分精饲料，不仅可以降低成本，提高经济效益。红心蛋因营养价值高而备受国内外消费者青睐，市场存在一些靠人T合成红色素获得的红心蛋，但合成色素产物和中体可能具有致癌和致畸的危险，若滥用合成色素会给消费者的健康带来危害。最近在全世界爆发的“苏丹红”危机，再次向人了敲响了安全隐患的警钟。冈此，天然色素义重新人们重视，天然动植物来源的饲料添加剂和着色剂由于安全卫生而备受青睐，这种天然红心蛋中类胡萝卜素对肿瘤有显著的抑制作用。类胡萝卜素不仅是重要的天然色素，而且在清除自由基、预防肿瘤、免疫调节、预防眼病和心血管疾病等方面具有非常重要的作用，因此作为红心蛋鸭饲料的菹草具有很高的经济价值和开发前景，对菹草类胡萝卜素开展系统研究也具有重要的理论和应用价值。2 本课题拟定的研究路线2、1由于菹草生长的季节性问题，需将鲜菹草干燥制成菹草将鲜菹草干燥制成菹草粉并配成各种浓度不同的饲料。工艺流程：鲜菹草 清洗 浸泡 护色 甩干 热风干燥 粉碎 配料混合50的菹草粉50的普通饲料饲料配制0的菹草粉100的普通饲料15的菹草粉85的普通饲料30的菹草粉70的普通饲料2、2借用饲养场的鸭子，通过对3个实验组和1个对照组鸭子的研究，明确菹草的用量与蛋黄平均色度的关系对照组（0的菹草粉00的普通饲实验组一（15的菹草粉75的普通饲实验组三（50的菹草粉50的普通饲鸭 子实验二组（30的菹草粉70的普通饲）2、3利用色谱、光谱和质谱等仪器分析手段对从菹草与红心鸭蛋中分离纯化的红色素的化学结构及本质作初步鉴定菹草与红心鸭蛋中分离纯化的红色素的化学结构及本质作色谱初步鉴定光谱质谱2、4用薄层层析法完成对菹草与红心鸭蛋类胡萝卜素特性的初步比较红心鸭蛋中的类胡萝卜素源于菹草证明比 较菹草类胡萝卜素特性红心鸭蛋类胡萝卜素特性3 准备仪器药品3.1 实验药品与试剂新鲜菹草 普通饲料（麦麸、玉米、米饭、青菜等） 丙酮石油醚 硅胶 5%CMC水溶液 蒸馏水 四甲基硅烷 氘代试剂CDCL3 碳酸钙 ；氧化镁、无水硫酸钠、碳酸钠、正己烷、石油醚、丙酮、甲醇3.2 实验仪器及器材烧杯 载玻片 烘箱 傅里叶变换红外光谱仪 核磁共振仪 微量注射器 粉碎机 渔网 铅笔 排风机 饲养工具 紫外-可见分光光度计 质谱仪4 、实验步骤4、1鲜菹草干燥制成菹草粉并配成实验饲料用小鱼网从水库、河流等地方打捞菹草，把菹草清洗干净后在蒸馏水中浸泡加入碳酸钙以护色，用排风机热风烘干后用粉碎机把菹草碾成粉末。然后把菹草粉末为0(对照组)、l5 、30 和50 ，分别与100 、85 、70和50 的普通饲料混合组成试验饲料。4、2饲养场的鸭子，明确菹草的用量与蛋黄平均色度的关系通过借用饲养场，开始饲养鸭子，实验分四组，其中一个是对照组，分别喂已配制好不同浓度的菹草饲料。结果表明：在一定范围内，菹草粉末饲料的添加量与红心鸭蛋的平均色度(罗氏色度)呈现一定的数量关系；其中将30 的菹草颗粒饲料与70 的普通蛋鸭配合饲料混合组成的饲料综合效果最好，正式喂养第4 天即使蛋黄平均色度由对照组的7度上升到l5度，其差异达到极显著水平(P001)， 随喂养天数增加其蛋黄色度平均值保持 l5度以上，喂养l3、14 天时l5度以上的红心蛋占所产蛋总数的80，并全部达剑l4度以上；该试验组饲料的平均产蛋率为962 ，与对照组比较有显著差别；该试验组饲料显著增加平均蛋重(Prlr2r3角黄素B 胡萝卜素，作者用多种质谱研究表明r1、r2和r3具有相同的分子量562(另文发表)，说明它们应为同分异构体。大量研究表明 ，B胡萝卜素(烃类胡萝卜素、不含氧)及叶黄素类(含氧、如羰基或羟基等)的不同顺反异构体(如al1trans、7-cis、9cis、13cis、15cis、913 cis、9-15cis、1315cis等)的拉曼光谱主要在“指纹区”存在差别，而且共轭双键的长度和数量也与c=c伸缩振动的频率有关。本文研究结果表明菹草红色素r1、r2和r3具有非常相似的拉曼光谱图，而且与虾青素及B胡萝卜素的拉曼光谱图很相似，强度较大的谱线及归属分别是：1517-1528cmI1区主要是c=c伸缩振动，l1571162cm 区主要是cc伸缩振