泓缘菌拌料对虾的影响实验报告.docx

泓缘乳酸菌在南美白对虾饲养中应用效果试验报告摘 要：本实验使用泓缘菌拌料投喂斑节对虾、南美白对虾，观察拌料60天对虾的生长等各项指标的影响。实验分为A（配合饲料）、B（虾贝健）、C（泓缘菌拌料）、D（泓缘菌拌料24h）4个组合。结果显示：泓缘菌拌料C、D每天增重（特定生长率）最快，并且饵料系数低于虾贝健 B；泓缘菌拌料C、D 能在一定程度上提高虾的成活率；虾贝健 B 组菌落数低于其他组合。1 研究背景乳酸菌（lactic acid bacteria，LBA）是一类发酵葡萄糖后产大量乳酸的细菌的通称。自古以来就被人类作为食品微生物应用的细菌，在自然界分布广泛，是动物和人类肠道中重要的生理性菌群之一。 由于乳酸菌是可以抑制弧菌生长的益生菌之一，亦是一种天然活性微生物制剂, 主要特点是无毒 、无残留、无抗药性和副作用少3，因此在养殖水体中投加乳酸菌，减少弧菌病的发生，增强虾体的免疫。同时磷虾中的-胡萝卜素、虾青素在调节鱼的免疫系统具有重要作用，增强疾病抵抗力和提高存活率，因此也被称为重要的鱼类生长调节剂11。因此本实验通过检测虾体的酶活以及水体虾体的弧菌来观察三种饲料对其免疫以及肠道菌水体菌的影响。近年有研究显示，投喂乳酸菌对养殖鱼、虾的成活、增重、免疫等有一定的影响。乳酸菌添加于罗非鱼饲料中会显著提高免疫力及对荧光假单孢菌核、连锁状球菌的抵抗力7,说明乳酸菌可以提高鱼的免疫力。其作用机理为：乳酸菌产生酸性代谢产物使肠道环境偏酸性，且消化酶最适 pH 值为偏酸性，这样使酶活提高，利于部分营养素的消化吸收4。不少国内外学者尝试将乳酸菌等加入水体或者饲料中，例如，胡毅等5将复合益生菌添加到对虾基础饲料中，结果显示其能提高对虾肠道消化酶活 ；Son等6将乳酸菌结合到饲料中投喂石斑鱼4 周， 最后石斑鱼的增重率和饲料效率都得到了提高； Aly等7将乳酸菌加入到罗非鱼饲料当中，经一段时间的喂养，发现罗非鱼增重显著，成活率提高。显然乳酸菌对水生动物具有 增强免疫力、促进生长、增重等多种功能。由于水产养殖业中滥用抗生素而导致出现抗性，过度使用抗生素不仅使病原菌耐药性增加，并威胁到水产品的生长及存活8。耐药菌株引起水产动物发病往往更为严重,早在1994年就报道过哈氏弧菌耐药株引起斑节对虾虾苗大量死亡的现象。而且,许多虾类病原弧菌为人畜共患病原(如副溶血弧菌和创伤弧菌等),大量耐药菌株的产生对于人类健康也造成直接的威胁9。所以与抗生素比较，乳酸菌成为替代品之一 ，并且获得的认可越来越多，应用前景广泛。2 实验目的乳酸菌是可以抑制弧菌生长的益生菌之一，亦是一种天然活性微生物制剂, 主要特点是无毒 、无残留、无抗药性和副作用少，在对虾养殖水体或饲料中添加乳酸菌，可减少弧菌病的发生，增强虾体的免疫。本实验利用商业对虾配合饲料伴喂泓缘乳酸菌饲养南美白对虾，真实反映泓缘乳酸菌在南美白对虾饲养中的养殖效果，探究其对南美白对虾和斑节对虾生长、消化、免疫及肠道微生物、成活、水体水质的影响。3 材料与方法3.1 实验场地中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地3.2 实验设计实验组分为4组，每组4个重复。一共16个组合，在16个500L塑料钢化桶的300L水体进行。取适宜规格大小一致、长势相同、健康的虾480尾，将幼虾均分到16个桶，每组30尾，养殖30天观察虾的生长效果。 A配合饲料（双湖饲料）B 发酵饲料(河北)C 配合饲料+拌喂乳酸菌(直接活化小时伴喂)D 配合饲料+拌喂乳酸菌(直接活化小时伴喂后发酵24小时投喂)3.2.1 南美白对虾南美白对虾实验分为4个组合A（配合饲料）、B（虾贝健）、C（泓缘菌拌料）、D（泓缘菌拌料24h），每组3个重复，编号为A组（A1,A2,A3,A4），B组（B1,B2,B3,B4），C组（C1,C2,C3,C4），D组(D1,D2,D3,D4),在室内16个塑料桶内进行。选取适宜大小、长势相同、健康的虾480尾，将南美白对虾均分到16个桶，每个桶40尾，养殖55天观察虾的生长效果。 实验期间每隔7天取A4,B4,C4,D4每个组合3条虾解剖取样，取样包括血液、肌肉、胃、肝胰脏、肠道。3.2.2 斑节对虾斑节对虾实验分为4个组合A（配合饲料）、B（虾贝健）、C（泓缘菌拌料）、D（泓缘菌拌料24h），在室内4个2吨水泥池进行。选取适宜大小、长势相同、健康的虾240尾，将斑节对虾均分到4个池，每个池60尾，养殖58天观察虾的生长效果。 实验期间每隔7天取A,B,C,D每个组合3条虾解剖取样，取样包括血液、肌肉、胃、肝胰脏、肠道。3.3 饲养管理饲料投喂 投喂量：按照每天每个桶内的虾的总体重的（3-4%）投喂。 投喂次数：每天投喂三次，时间为7:30，11:30，17:30观察：每个桶设立饵料台，饵料台放单次总投饲量的1%2%，放下饲料1.5小时，观察粪便，吃食，及虾胃肠摄食生长情况，适当增减投喂量。3.4 测定指标1、生长：饵料系数、成活率、特定生长率 饵料系数=总投饵量/虾总增重量 成活率=成活的数量总数量100% 特定生长率=100 (lnW末-lnW初)/t(养殖天数) （特定生长率越大，代表每天体重增长越快）2、水质：PH、氨氮、亚硝酸盐；菌落。3、照片：虾、肠道、粪便3.5 数据处理试验数据经Excel程序整理后，用SPSS18.0数据处理系统软件进行单因素方差分析，试验结果均用平均数标准差（MSD）表示，以P0.05 为显著水平，差异显著者采用Duncan氏法进行多重比较。作图使用Sigmaplot12.5软件。4 结果与分析4.1 南美白对虾生长和成活率试验结果：通过8周的养殖实验，结果表明，实验结束后，配合饲料拌喂乳酸菌的C组和用泓缘菌拌料发酵24小时后投喂的D组的对虾体长和体重显著高于不拌喂的对照组（A）和虾贝健(B)组的对虾，并且对照组也显著高于虾贝健组(P C组A组B组，D、C、A 三组显著高于B组，但D、C、A 三组差异不显著。泓缘菌拌料C、D 能在一定程度上提高对虾的成活率。3、试验结束时，使用泓缘菌拌料(C)和发酵24小时（D）组对虾的个体大小，外观光泽度，肠道外观形态均要优于对照组和虾贝健组，可改善对虾的外观和品质。4、泓缘菌拌料(C)和发酵24小时（D）组确实可以提高对虾免疫和抗应激能力。5、虾贝健组的效果不理想，可能主要还是与其饲料蛋白含量只有28%，不能满足南美白对虾正常生长需求有关，虽然其有较好的诱食作用，但不能长期一直使用。泓缘乳酸菌在斑节对虾饲养中应用效果试验报告1.成活率斑节对虾： C（泓缘菌拌料）组成活率最高。2.特定生长率斑节对虾： C（泓缘菌拌料）、 D（泓缘菌拌料24h）组合高于 A（配合饲料）、 B（虾贝健）组合。3、水质-pH结果： A、B、C、D组水质的PH无显著差异。B组后期呈现出较快的下降。4、水质-氨氮结果： A、B、C、D组合氨氮呈现出相似的变化规律，各组无显著差异。5、水质-亚硝酸盐结果： A、B、C、D组合亚硝酸盐呈现出相似的变化规律，各组无显著差异。3、观察照片斑节对虾：虾、肠道、粪便结果： 斑节对虾的虾、肠道、粪便照片观察无明显的差异。结果汇总:1、试验结束时，使用泓缘菌拌料(C)和发酵24小时（D）组的斑节对虾的体长和体重、增重率及特定生长率显著高于对照组(A)和虾贝健(B)组，并且其它三组的饵料系数显著低于B组合。使用泓缘菌拌对虾配合饲料饲喂斑节