基于肋间神经探讨电针治疗大鼠乳腺增生的机制图文课件

2013级针灸推拿学硕士毕业论文答辩,基于肋间神经探讨电针治疗大鼠乳腺增生的机制,主要内容,引言,实验过程,实验结果,结论与分析,4,1,2,3,5,致谢,选题来源,国家自然科学基金,基于NEI网络的“通调针法”电针治疗大鼠乳腺增生病的机制研究,课题编号：81F73782,引 言,一,乳腺增生病 Mammary Gland Hyperplasia,癌变！,MGH有效的治疗机制研究,导管上皮增生,腺泡上皮增生,腺体增生,囊肿形成,上皮化生,间质增生,手术,中药,激素,针灸,逐年上升！,病理,引 言,关系密切,针刺治疗疾病,神经通路传递信号,有必要进行MGH的针刺治疗机制进行研究,针刺治疗该病的机制？,具体的神经传导途径？ 还未进行研究,引 言,主要支配乳腺的神经：肋间神经,HRP逆行神经示踪法大鼠第三对乳腺由第七肋间神经支配,针刺可通过调节内分泌、免疫功能对该病发挥治疗作用,1,2,目的,实验过程,(d ) 1-3 4 5-29 30-32 32-33,适应性喂养,称重标记、分组，测量乳头高度、直径,造模、预手术,抗炎,手术、抗炎,34-35 36-61 62-63 ,适应性喂养,治疗,取材,检测,实验进程,1.实验动物,日龄：6075天 体重：20020g 西安交通大学实验动物中心提供。,SD大鼠,自发性肿瘤的发生率较低，对性激素敏感性高。,实验过程,2.分组、造模方法及手术方法（随机分为4组）,A（空白组）12只,B（造模组）12只,C（治疗组）13只,D（肋间神经切断治疗组）13只,每日大腿内侧肌注0.9%的生理盐水0.2ml，共25天。,每日大腿内侧肌注苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，共20天，左右腿交替注射。后每日大腿内侧给予5mg/kg黄体酮注射液，共5天。同时每日加慢性不可预计刺激制造肝郁型乳腺增生模型，造模共25天。,造模成功后行左侧第七肋间神经切断术，手术后注射青霉素抗炎3天。,正常喂养,相同的手术切口，不切断肋间神经,实验过程,手术方法,1.麻醉：用2%的戊巴比妥钠按2ml/kg腹腔注射 2.定位：指腹摸到左侧第七、八肋间隙，记号笔标记 3.备皮：5cm3cm，先剪毛，后剃毛。 4.手术：纵向切开大鼠皮肤4cm，寻找第七肋间神经用玻璃分针将神经挑起，用手术刀切断。 5.缝合：肌肉、筋膜、皮肤三层 6.注射青霉素：大腿外侧肌注4万单位/kg青霉素，每天一次，共三天。 7.术后保温：术后用“小太阳取暖器”照射大鼠30min,实验过程,3.治疗方法 A组：常规饲养。 B组：行与C、D组每天相同穴位处消毒一次。 C组：电针治疗25天。 D组：电针治疗25天。,胸组穴：屋翳、合谷（双侧），膻中 背组穴：双侧天宗、肝俞、足三里 中国兽医针灸学,国医大师郭诚杰“通调针法”治疗MGH,胃经过乳腺，肝脉布胸胁，乳头色青属肝。 屋翳：胃经腧穴，舒通乳络气血。 膻中：气会，位于任脉，调理冲任气血，舒通全身气血之功。 合谷：手阳明经原穴，宣导上下阳明经气。 天宗：治疗该病的经验效穴 肝俞：肝经背俞穴，疏肝解郁 足三里：胃下合穴，调节本经脏腑气血，防肝火犯胃。,两组穴位交替使用,实验过程,带电，留针20min 每日一次，五天一疗程，共五疗程，疗程间休息2天，共治疗25天。,胸组穴,电针参数,背组穴,1.5V，0.5mA，2HZ连续波,实验过程,4.取材,禁食：治疗结束后，禁食12小时，每组随机选择8只。 麻醉：2%的戊巴比妥钠2ml/kg腹腔注射 备皮：第3对乳头周围修剪毛，再用8%的硫化钠脱毛。,取0.8cm直径的组织，10的甲醛溶液固定。0.5x0.5x0.3cm3，常规石蜡包埋。,乳头高度及直径,组织标本的采集,血清标本的采集,腹主动脉取血5ml份，4000转分，离心3分钟，留取血清，-80低温保存,观察乳头外观，精密游标卡尺测第3对乳头高度及直径。,实验过程,E2、P,组织形态学,TNF-、IL-6,5.检测的指标及方法,TNF-、IL-6,2针刺治疗乳腺增生可降低E2水平，升高P水平,E2、P,2腺增生患者体内TNF-与IL-6均高于正常人,6.统计学处理 数据均应用SPSS20.0统计软件进行统计分析。结果计量资料以 xs表示，行单因素方差分析。取P0.05表示有显著性差异，P0.01表示有极显著性差异。,实验结果,1.造模结果,空白组,造模组,小叶及腺泡排列整齐，腺泡数较少，无上皮细胞增生。,乳头增大，突出于毛外，淡漠，活动量减少，易激怒，毛发直立，垫料不洁等表现；乳腺上皮细胞增生，腺泡腔扩张，小叶及小叶腺泡数的多少。,实验结果,2.治疗后结果,乳头高度、直径,左侧乳腺：D左高度和直径均大于C左（P0.05），差异具有统计学意义；C左乳头高度、直径与A左比较稍大，但无明显统计学差异（P0.05）。 D组左侧乳头、直径均大于右侧，差异有统计学意义（P0.05）。,大鼠乳腺组织形态学观察,A组,B组,C组,D左,D右,实验结果,各组大鼠血清E2、P含量及E2/P,大鼠血清中TNF-、IL6含量,D组血清中E2的含量及E2/明显高于C组，差异有统计学意义（P0.05）,C组较D组TNF-含量低，差异有统计学意义（P0.05）；C组较D组IL-6有降低趋势。,结论与分析,肋间神经切断后针刺治疗效果较对照组治疗效果差。,电针治疗该病，有可能是基于肋间神经调节E2、P含量而发挥作用的。,电针治疗该病可能是基于肋间神经调节免疫细胞因子TNF-、IL-6含量而发挥作用的,电针治疗该病的疗效机制可能与肋间神经调节途径具有密切的关系。,结论与分析,意义,说明了针刺治疗该病的信号部分是肋间神经传导的，为今后针刺的机制研究提供一定的依据。,为了从神经传导途径研究电针治疗乳腺增生的机制，从支配乳腺的肋间神经入手，观察阻断肋间神经后，对电针治疗乳腺增生的影响，并检测内分泌、免疫细胞因子。,通过切断支配大鼠左侧第三乳腺的左侧第七肋间神经，研究电针治疗乳腺增生的神经方面的作用机制，结论显示切断肋间神经对电针治疗该病有部分阻断作用。,思路上的创新,技术上的创新,致 谢,我的导师雷正权主任医师是一位关心学生的导师这三年来在生活、学习方面给予了我细致入微的帮助，在毕业论文的选题、修改等方面给予了我很大的帮助，言辞难以表达我对雷老师的感谢！ 我毕业论文中涉及的实验选自于郭新荣博士课题，郭老师从最初开题报告、实验过程、阅读中外文献、论文指导及预答辩中都做了主要指导，特别感谢郭老师。 感谢各位导师在开题、论文修改、预答辩中给于的意见和帮助。 感谢我的师弟李伟伟，我的同班同学成海燕、梦菊