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关于胚胎工程1、精子的发生大体可以分为三个阶段：精原细胞 有丝分裂 分裂，发生在 睾丸曲细精管 。精原细胞（部分精原细胞仍然保持为精原细胞） 滋长，完成 DNA 复制和 相关蛋白质 合成，即进行 染色体复制 复制。初级精母细胞（开始 减数分裂 分裂） 由 中心体发育尾顶体 减I分裂高尔基体次级精母细胞减分裂头细胞核精（子）细胞原生质滴这是精子形成 线粒体鞘线粒体的第三个阶段：精子 精细胞 精子 由细胞质的其他部分发育2、卵子形成：胚胎在性别分化以后，雌性胎儿卵巢内的 卵原细胞 ，通过 分裂，不断增加数量，并经 DNA 复制和相关 蛋白质 合成，即 复制，滋长，成为 初级卵母细胞 细胞，这个细胞被 卵泡 细胞包围，成为 卵泡。即雌性胎儿在出生时，已经准备好了所有的 初级卵母细胞（卵泡） 。初级卵母细胞排卵：是指卵子 从 卵泡 中排出，排出时是初级卵母细胞 细胞（马、犬）或者是 次级卵母细胞 细胞（猪、羊）。卵子形成过程中的减数分裂：减数第一次分裂在 排卵前后完成，产生一个 次级卵母细胞 和第一极体，进入 输卵管 ，减数第二次分裂在 输卵管 过程中完成，标志是：在 的间隙可以观察到 一个极体 的时候。卵黄膜透明带放射冠3、受精作用准备阶段：精子准备：精子必需在 输卵管 中运行一段时间，称 精子获能 。 在体外受精操作时要人工进行。卵子准备：排卵时排出的是 初级卵母细胞 细胞或是 次级卵母细胞细胞，还需要在 输卵管 内进一步成熟，到达 减数第二次分裂 期，才具有受精能力。受精阶段：顶体反应精子的 顶体 释放 顶体酶 ，融解 放射冠 和 透明带 。入卵后的变化精子穿越_放射冠_和透明带精子进入卵黄膜_(精)尾部_脱落, 形成 雄原核 (卵)完成减,形成_雌原核_ 雄原核、雌原核发育,并融合形成原核配子融合精子核雄原核防止多精入卵的两道屏障：在精子触及 透明带的瞬间，发生 透明带反应 ，这是防止多精入卵的第一道屏障；精子入卵后，发生 卵黄膜封闭作用，这是防治多精入卵的第二道屏障。）4、胚胎发育受精作用发生后形成 合子，马上在输卵管内进行有丝分裂，开始胚胎发育过程。胚胎的发育：卵裂阶段透明带内发生，合子进行有丝分裂 ，细胞数量增加，胚胎总体积 不变甚至 略减少 。 桑椹 胚：当胚胎细胞数目达到 32 个时。这一阶段的每一个细胞都具有发育成 完整胚胎 的潜力，属于 全能 细胞。是 胚胎分割 的适宜阶段。 囊 胚。此时胚胎结构包括：透明带、滋养层 、 内细胞团 和 囊胚腔 。 如果用此时的胚胎做胚胎分割，注意将内细胞团均等分割 ，否则会 影响分割后的胚胎的恢复和进一步发育。分析胚胎性别取样于滋养层。 原肠 胚：内, 中 和 外 三个胚层, 还有滋养层，原肠腔等结构。 胎儿形成胚胎工程技术：体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞。5、体外受精：主要步骤包括： 卵子的采集 和培养、精子的 采集和获能 、受精采集卵母细胞的方法：小型哺乳动物用 超数排卵 法，即向母兽注射促性腺激素，促进排出更多 卵细胞。大家兽或大型哺乳动物可以从已宰杀雌性个体 卵巢中采集；也可以借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等，直接从 活体 的卵巢 获取。采集到的卵母细胞还需要 人工培养成熟 ，才具有受精能力。活体取卵能充分发挥优良母兽的 繁殖潜力。收集精子的方法： 手握法 、假阴道法 和电刺激法。获得的精子要经过获能处理 ，方法有：培养法，即把精子放入人工配制的获能液中培养一段时间；牛羊猪等家兽常用化学法，即将精子放在一定浓度的 肝素或钙离子载体A23187中，用化学药物诱导精子获能 。6、体外受精：培养成熟的 卵子和 获能 后的精子在 获能溶液 液或专门的 受精溶液 中结合。同种动物的两性生殖细胞能够结合的原因是 因为细胞表面有特异性相互识别物质。7、早期胚胎培养： 精子卵细胞 受精作用 受精卵 移入 发育培养液（成分包括：无机盐、有机盐，要添加 激素 、 维生素 、氨基 酸核苷酸等营养成分，还要加入 血清 等天然成分。成分比 发育 动物细胞培养的培养液要复杂） 适宜阶段（适宜移植的阶段：牛羊是桑椹胚期或 囊胚期；小鼠家兔等是桑椹胚 期或 更早 阶段；人是 816个细胞 阶段。） 移植至受体子宫或冷冻保存8、胚胎工程：胚胎工程中应用较多的工程技术有胚胎移植、胚胎分割、体外生产胚胎技术。胚胎移植实际上是 产生胚胎 的供体和 孕育胚胎 的受体共同繁殖后代的过程，优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 ，大大缩短了供体本身的繁育周期，使良种畜群迅速扩大。胚胎移植的生理学基础：供体与受体相同的生殖器官的生理变化；胚胎在早期母体中处于游离状态；子宫不对外来胚胎发生 免疫排斥 反应；胚胎 遗传特性不受受体任何影响。胚胎移植的基本程序：对供体和受体的选择和处理（同期发情处理 ，超数排卵）、配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行 胚胎移植 。 胚胎移植是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”胚胎分割：是指采用机械方法将 早期胚胎切割 成2、4或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。9、胚胎干细胞：简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。形态上：体积小，细胞核大、核仁明显；功能上：具有发育的 全能性 ：体外培养时可以增殖而不发生分化。应用价值：ES细胞可以用于治疗人类的某些顽症（ 老人痴呆 、帕金森）、体外定向诱导分化培育出 组织或器官 ，解决临床供体器官不足和器官移植后 免疫排斥 的问题。10、乳腺生物反应器：利用 基因工程 技术，可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。利用乳牛生产人的“抗凝血酶”： 获取 目的基因 构建表达载体需要把目的基因和乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。 用显微注射 法。导入奶牛的受精卵中 胚胎 发育培养液中 培养 早期 胚胎 胚胎移植 雌牛的 子宫 发育 转基因幼体如果要提高转基因胚胎的利用率，可