高三高考（生物）优化探究一轮复习选修三现代生物科技专题专题二细胞工程(克隆技术).ppt

,【名师点睛】 (1)全能性的高低(大小) 受精卵配子体细胞。 分化程度低的细胞分化程度高的细胞。 植物细胞动物细胞。 (2)体细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。 (3)体现全能性的条件：处于离体状态，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下。,2植物细胞工程的应用 (1)植物繁殖的新途径 微型繁殖：通过植物组织培养技术快速繁殖优良品种。 特点：a.保持优良品种的遗传特性； b高效快速地实现种苗的大量繁殖。 作物脱毒：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。,人工种子：人工种子的优点是培育的后代无性状分离，能够稳定遗传；产生的后代能够保持亲本的优良性状；培育的种子不受气候、季节和地域的限制。采用的技术是微型繁殖技术，首先利用植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和侧芽等，然后包上人工种皮就形成了人工种子。,(2)培育作物新品种：用植物的花药进行离体培养形成单倍体，再经人工诱导加倍后筛选出需要的新品种；利用组织培养过程中出现的突变体，培育新的品种。 (3)细胞产物的工厂化生产：用人工培养的愈伤组织提取细胞中的某种成分。这些细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。,【名师点睛】 在植物体内，细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织和器官，这是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果。但是，它们的遗传潜力并没有丧失，全部遗传信息仍然被保存在DNA的序列中，一旦脱离了原来组织器官的束缚成为游离状态，并在一定的营养条件和植物激素的诱导下，细胞就能表现出全能性，发育成完整的植株。 不能说人工种子是人工制成的，因为人工种子的主要部分胚状体并不是人工制成的。,1(2009山东潍坊期末)野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。据图分析回答问题：,(1)过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括_。 (2)过程需要用到聚乙二醇(PEG)，其目的是_。 (3)请用文字和箭头表示出技术过程的实验流程：_。由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是_的表现。 (4)一般在培养基上培养2448小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁。可以取样，通过_实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 (5)请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：_,解析：植物细胞的细胞壁由纤维素和果胶组成，因此可以用纤维素酶和果胶酶将其水解得到原生质体，然后用聚乙二醇或物理方法诱导原生质体融合，再生细胞壁形成杂种细胞。由是杂种细胞经过脱分化、再分化形成幼苗的过程，体现了植物细胞的全能性。有细胞壁的植物细胞可以发生质壁分离与复原。 答案：(1)纤维素酶、果胶酶 (2)诱导原生质体融合 (3)融合细胞愈伤组织幼苗 植物细胞具有全能性 (4)植物细胞的质壁分离与复原 (5)可使本来存在着生殖隔离的物种进行杂交，培育出兼有两物种品质的优良物种或克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍。,【名师点睛】 两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。 植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故不能体现细胞的全能性。 在动物细胞培养液中用动物血清，是因为动物血清成分较为复杂，它含有动物体细胞生长所需的营养物质，并给动物细胞创造了生活环境。,2动物体细胞核移植与克隆动物 (1)理论基础：动物体细胞核具有全能性。 (2)过程：,(3)核移植特点：主要是指不同种的细胞的拆合，新个体具备双亲的遗传特性，但其核遗传物质来自供体细胞。 (4)动物体细胞核移植技术的应用 畜牧生产方面：培育良种动物； 保护濒危物种； 医药卫生方面：生产医用蛋白、器官和组织移植等。,3单克隆抗体 (1)概念：由单个效应B细胞进行无性繁殖，形成细胞群(称为克隆)，由这样的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 (2)原理,(4)优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 (5)应用：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。 【名师点睛】 单克隆抗体制备过程中要经过两次筛选 第一次筛选：B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，有三种融合情况：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、 骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才是需要的杂种细胞。 第二次筛选：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,【名师点睛】 (1)动物细胞融合和植物体细胞杂交，均需对杂种细胞进行筛选，但筛选的方法不同，前者可用免疫法，后者可用机械方法、生理学或遗传学方法。 (2)杂交瘤细胞经过二次筛选，其目的不同，第一次是筛选出杂交瘤细胞，第二次是在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤 细胞。 (3)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助，如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。,(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。 (2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于_培养基。 (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。 (4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_。 (5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞_的特点，又具备淋巴细胞_的特点。 (6)淋巴细胞是由动物_中的_细胞分化而来的。 (7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。,解析：考查单克隆抗体制备流程中相关知识及识图获取信息能力。(1)单克隆抗体制备是动物细胞融合的重要应用之一，其技术基础是动物细胞的培养。(2)由图示中文字“骨髓瘤细胞(不能在HAT培养基上生长)”和“混合并进行细胞融合，转到HAT培养基上培养”可知：使用的HAT培养基是选择培养基。(3)单克隆抗体来源于单个效应B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，与血清中常规抗体比较，其具有灵敏度高、专一性强等特点。(4)动物细胞融合最常用诱导方法是利用灭活的病毒诱导。(5)骨髓瘤细胞与单个效应B细胞融合形成的杂交瘤细胞具备了骨髓瘤细胞体外能无限增殖和效应B细胞能产生特异性抗体的特点。 (6)淋巴细胞来源于动物骨髓中的造血干细胞的分裂、分化。(7)葡萄糖、氨基酸被动物细胞吸收的主要方式是主动运输。 答案：(1)动物细胞培养 (2)选择 (3)特异性强、灵敏度高 (4)灭活的病毒 (5)在体外大量增殖 分泌特异性抗体 (6)骨髓 造血干 (7)主动运输(主动吸收),3通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势、培育高产、耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：,(1)A是_酶，B是_，C是具有_性状的幼芽。 (2)若目的植株丢失1条染色体，不能产生正常配子而高度不育，则可用_(试剂)处理幼芽，以获得可育的植株。 解析：植物体细胞杂交的第一个步骤就是用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞去除细胞壁，得到原生质体，然后再诱导原生质体融合，诱导再生细胞壁，得到杂种细胞，然后进行植物组织培养经过脱分化得到愈伤组织，再经过再分化得到幼苗，最后发育成杂种植株。若植株丢失一条染色体，则减数分裂时联会紊乱无法形成正常的生殖细胞，即表现为不育，若用秋水仙素处理幼苗可以得到染色体加倍的植株，使其可育。 答案：(1)纤维素酶和果胶 融合的原生质体 耐盐 (2)秋水仙素,科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄马铃薯”杂种植株，如图，其中表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：,(1)实现过程的技术是_，在此之前使用_酶处理细胞以除去细胞壁。如果将已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？_。 过程如放在神舟七号飞船上则更易进行，这是因为_。与过程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_。 (2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是_，其中过程相当于_过程，涉及的分裂方式为_。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物紫杉醇，培养将进行到_(填字母编号)。,(3)若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄马铃薯”细胞内含_条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于_倍体植株。 (4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是_。 (5)若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，那么该方案的目的是_。若将该方案用在SARS的研究和治疗上，则从理论上讲c细胞的制备可采用_细胞和_的融合。如果分析出了所产生抗体的氨基酸序列，则可采用_方法，以_为原料合成出该SARS抗体的基因。,【解析】 (1)图示为原生质体融合，欲实现该融合过程应先用纤维素酶、果胶酶处理植物细胞，去除细胞壁；制备的原生质体在等渗溶液中应呈球形；图示过程表示再生出细胞壁，这与高尔基体有关。 (2)利用杂种细胞培育杂种植株，依据的原理是细胞的全能性。 (3)细胞融合后，杂种细胞核内染色体数应为两融合细胞染色体数之和。 (4)若a、b细胞为同种植物细胞，则可直接通过人工诱导多倍体方法处理a或b细胞所在的萌发种子或幼苗，即可获得与融合细胞相同遗传物质组成的多倍体。 (5)若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则进行该融合过程的目的是制备单克隆抗体。 【答案】 (1)原生质体融合 纤维素酶和果胶 呈圆球形 太空中无重力干扰，更易进行细胞融合 高尔基体 (2)细胞的全能性 脱分化 有丝分裂 e (3)mn 单 (4)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗 (5)制备单克隆抗体 小鼠的骨髓瘤 SARS患者或康复者的B淋巴细胞 化学合成 脱氧核苷酸,(2008年宁夏高考)回答下列有关动物细胞培养的问题： (1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。 (2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。,(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_ (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。 (5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。 (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。,【解析】 在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。由于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。由于在冷冻超低温液氮下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，通常在此条件下保存细胞。机体把移植的皮肤组织当作抗原攻击，会发生排斥现象。 【答案】 (1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少(3)由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢 (6)抗原,【规律探究】 动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等动物细胞工程技术中，无一不涉及动物细胞培养技术，故动物细胞培养是所有动物细胞工程技术的基础。 筛选杂交瘤细胞应使用选择培养基在该培养基中只有杂交瘤细胞能够存活，其他细胞(未融合细胞及融合后的BB细胞、瘤瘤细胞)均不能成活，而筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞时，应利用特定抗原通过抗原抗体杂交技术确认抗体性质。,1(2009年浙江理综)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是( ) A都需用CO2培养箱 B都需用液体培养基 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：用动、植物成体的体细胞进行离体培养都必须在无菌条件下进行。用植物成体的体细胞进行离体培养获得新个体体现的是细胞的全能性，而动物体细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物。 答案：C,2(2008年全国理综)下列关于细胞工程的叙述，错误的是( ) A电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：通过植物细胞工程中的植物体细胞杂交技术得到的甲、乙两品种的体细胞杂交后的杂种植株，其细胞内的染色体数目是甲、乙体细胞染色体之和；而通过有性杂交得到的甲、乙两品种杂交后代的染色体数目，是甲、乙两品种体细胞染色体数目和的一半，即两植物品种的配子所含的染色体之和。 答案：D,3(2008年上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括( ) 细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植 A B C D,解析：单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体，整个过程不涉及胚胎移植和细胞核移植这两项技术。 答案：A,4(天津理综)利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是( ) A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B体外培养单个效应B细胞(浆细胞)可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C将等量效应B细胞(浆细胞)和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者,解析：以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体时，先用SARS病毒核衣壳蛋白刺激机体产生能特异性产生抗体的浆细胞，然后在PEG诱导剂的作用下使该浆细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，经过筛选，选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，然后在体外或体内培养杂交瘤细胞，获得大量单克隆抗体。在临床上可用单克隆抗体与病毒特异性结合的原理可以诊断机体是否被病毒感染。 答案：D,5、(2008年海南生物)某二倍体植物是杂合体如图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：,(1)图中表示的是该花粉培养过程中的_过程，表示的是_过程，X代表的是_，表示的是_过程，表示的是诱导_过程。 (2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中_的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为_植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有_。 (3)对植株甲进行_，才能使其结实产生后代(乙)，否则植株甲只有通过_的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是_植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为_种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为_种。花药培养在育种上的特殊意义是_，从而开辟育种新途径。,解析：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程为植物细胞的脱分化，愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程为再分化。 而植物激素是植物细胞脱化、再分化不可缺少的调节物质，且不同激素的浓度比影响再分化过程。乙植株为纯合的二倍体，所以每一株乙植株产生可育花粉的基因组成种类为1种。该群体植株有多种基因型的纯合体，所以，该群体植物产生的可育花粉的基因组成种类为多种。 答案：(1)脱分化 再分化 胚状体 分化(或发育) 生根 (2)激素 单倍体 细胞的全能性 (3)染色体加倍 无性繁殖 乙(或经过染色体加倍) 一 多 缩短育种周期,6(海南高考)某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。 请回答下列有关动物细胞培养的问题： (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_。 (2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_。,(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长_。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更_。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_消化处理。 (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_。 (5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_或_合成水平的差异，确定Y的药效。,解析：(1)甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。肿瘤细胞为无限增殖的细胞，细胞周期短。在相同条件下，培养相同的时间，甲细胞的数量多于乙细胞。(2)动物细胞培养液中必须加入动物血清，血清中含有血清蛋白、生长因子，促进细胞贴壁的因子、激素等合成培养基中缺乏的物质。大多数细胞培养液所需pH为7.27.4，而多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲，所以CO2的作用是调节培养液pH。(3)甲为肿瘤细胞能无限增殖，传代的次数要比乙细胞多，乙细胞(正常肝细胞)在培养瓶中贴壁生长，当铺满瓶壁时，生长停止。为得到更多的肝细胞，需要定期地用胰蛋白酶使细胞脱离瓶壁，进行传代培养。(4)培养液中加入抗生素来抑制和杀灭微生物，抗生素对动物细胞没有影响。(5)设计一组加入抗癌药物的实验组，一组不加药物的对照组，通过检测药物影响X基因的表达过程，即转录形成mRNA、翻译形成蛋白质的量来检验药效。 答案：(1)多 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液pH (3)停止 多 胰蛋白酶 (4)抗生素 (5)药物Y mRNA 蛋白质,一、选择题 1(2009年湖南三十校联考)在现代生物科技的应用中，不需要进行检测与筛选的是( ) A对植物的离体组织进行培养，大规模培育优良品种 B将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体 C利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝” D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株 解析：植物组织培养技术不需要进行检测和筛选；利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝”时，需筛选出杂种细胞；制备单克隆抗体至少两次筛选；用基因工程技术培育抗虫植株需进行检测。 答案：A,2(2010年江苏四市调研)在下列选项中，需要采用植物组织培养技术的是( ) 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 获取大量的脱毒苗 利用基因工程培育抗棉铃虫的植株 单倍体育种 无子西瓜的快速大量繁殖 A B C D,解析：培育多倍体利用的原理是秋水仙素抑制纺锤体的形成，导致染色体数目加倍，不需要采用植物组织培养；获取大量脱毒苗，快速大量繁殖无子西瓜必须采用植物组织培养；基因工程育种以及单倍体育种过程中，受体细胞及花药培养均采用植物组织培养。 答案：D,3(2009年湖南十二校联考)下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是( ) A利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术 B在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生染色体变异或基因突变，而不可能发生基因重组 C动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种个体 D“试管婴儿”实质上就是“体外授精”和“胚胎移植”的“产物”，使不孕夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术,解析：动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，前者诱导融合的方法除物理法和化学法外，还可以用灭活的病毒；所用技术手段后者需用酶解法除去细胞壁，还需用植物组织培养技术把杂种细胞培育成杂种个体；所依据的原理：前者是细胞膜的流动性，后者是膜的流动性和植物细胞的全能性；结果是：前者只需形成杂种细胞，后者培育成杂种个体。 答案：C,4(2008江苏生物)某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是(多选)( ),A污染主要不是培养基灭菌时间短造成的 B污染主要来源于组织培养所用的离体组织 C调节培养基pH不能解决污染问题 D调节培养温度不能解决污染问题 解析：由图可知，培养基的灭菌时间、pH以及培养温度对污染率的影响不大；离体组织灭菌时间越长污染率越低，说明离体组织是污染的主要来源。 答案：ABCD,5(2008年江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是( ) A培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D同一株绿色开花植物不同部分的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 解析：同一株绿色开花植物的细胞分体细胞和生殖细胞两类，自然这两类细胞经培养获得的愈伤组织细胞的遗传物质(基因)亦不相同。 答案：D,6下列有关植物细胞与组织培养的叙述中，错误的是( ) A花药、胚不能作为组织培养的材料 B植物细胞具有全能性 C外植体是指用于培养的植物组织或器官 D外植体可诱导出愈伤组织 解析：考查植物组织培养的过程和原理。植物的器官、组织和细胞以及花药均可做为组织培养的外植体。故A不对。 答案：A,7用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是( ) A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 解析：用纤维素酶处理植物细胞是植物细胞工程中常用来除去细胞壁获得原生质体的方法，与动物细胞工程无关。 答案：B,是_。 (3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是_，其中步骤相当于_，步骤相当于_。 (4)植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使_能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是_ (5)从理论上讲，杂种植株的育性为_。若运用传统有性杂交的方法能否实现？_。说明理由：_。因此，这项研究对于培养作物新品种的重大意义在于_。 (6)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？_。为什么？,解析：根据植物体细胞杂交的知识，为酶解法去细胞壁。为原生质体的融合，方法有两种：一为物理法，如离心、振荡、电刺激；二为化学法，如用聚乙二醇(PEG)诱导。为重组原生质体在生出壁后变为植物细胞的过程。过程为对重组细胞进行植物组织培养，其中为脱分化，为再分化。植物体细胞杂交实现了传统杂交育种所不能实现的远缘杂交不亲和。因为在生物进行有性生殖的过程中才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖，故在此过程中不遵循孟德尔的遗传定律。 答案：(1)去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体 酶解法 (2)聚乙二醇(PEG) 诱导不同植物体细胞的原生质体融合 (3)植物组织培养 脱分化 再分化 (4)远缘杂交亲本的遗传特征 杂种植株获得双亲的遗传物质 (5)可育 不能 因为不同种生物之间存在生殖隔离 克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩大了可用于杂交的亲本组合范围 (6)不遵循 因为在生物进行有性生殖的过程中才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖。,9、(上海高考)如图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题。,(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异_；从免疫学角度看，这种凝集原是_。(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后获得的_细胞，这种细胞具有产生_的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能_，但不会产生抗体。 (3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为_。把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为_。 (4)过程的主要目的是_。通过过程或的培养方法能产生大量_抗体。,解析：杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞。效应B淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基中，只有效应B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。这种技术的主要用途是制备单克隆抗体，各种单克隆抗体的制备过程基本相同。 答案：(1)糖蛋白 抗原 (2)免疫B淋巴 单一的抗A抗体(或单一的特异性抗体) 快速大量增殖 (3)杂交瘤细胞 单克隆 (4)筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 抗A单克隆,10(2009年天津武清期末)如下图所示。,(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜_。此过程，常用_作为诱导剂，该细胞的特点是_。 (2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法(不考虑机械方法)，从培养液中分离出杂交瘤细胞。 方法：_。,(3)杂交瘤细胞繁殖进行的是_分裂，其遗传性状_。 (4)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同？_。 (5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了_。 (6)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_和_两大技术。,解析：细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性，在动物细胞融合时，常用聚乙二醇或灭活的病毒作为诱导剂。杂交瘤细胞具有两种细胞的特点：既能无限增殖，又能产生特异性抗体；杂交瘤细胞中的DNA合成存在两条途径，即D途径和S途径，这样，将氨基嘌呤加入培养基中，即可阻断仅存在D途径的骨髓瘤细胞的增殖，这样，能增殖的细胞就只有杂交瘤细胞了。杂交瘤细胞是两种体细胞融合而来的，只能进行有丝分裂，其遗传物质没有改变。动物细胞培养是液体培养基，而植物组织培养的培养基是固体培养基，在动物细胞培养时需加入动物血清。生物导弹利用了抗原(癌细胞或病原体)与抗体特异性结合的原理，来治疗疾病。在单克隆抗体制备过程中用到了细胞工程的细胞融合(杂交瘤细胞的形成)与细胞培养。 答案：(1)具有一定的流动性 聚乙二醇或灭活病毒 具有无限增殖能力，能产生特异性抗体(2)培养液中加入氨基嘌吟，收集增殖的细胞(3)有丝 保持不变(稳定)(4)动物细胞培养用的是液体培养基，且其中含有动物血清(5)抗原与抗体之间结合的高度特异性(6)动物细胞融合 动物细胞培养,11禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势，2007年12月在江苏又有1例因感染禽流感病毒而死亡的事件。现在，科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5Nl亚型禽流感病毒(一种RNA病毒)。若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体，请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题：,(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自_体内的细胞，促进d过程的常用诱导剂是_或_。 (2)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成_种类型的C细胞，因此需用_培养基筛选出_(填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是_。 (3)常规的抗体一般是从_中分离提取的，与其相比，单克隆抗体最主要的优点是_。 (4)目前注射禽流感疫苗是预防禽流感的一种措施。我们已经知道，决定禽流感病毒在人体细胞中增殖变化的物质是_，而决定其抗原特异性的物质位于_。据此分析制备禽流感疫苗的主要思路：_。 (5)理论上，以上