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实验十 人类X-染色质的观察（X-Chromatin）,齐向英,一、实验目的,1、初步掌握X-染色质标本的制作方法； 2、识别人类细胞X-染色质的形态特征及 所在位置，为进一步研究人体染色体 的畸变与疾病提供参考条件。,二、实验原理,1949年Barr等发现，在雌猫的神经细胞核内有一个浓缩的深染小体，在雌性的细胞中没有。后来了解，在雌体细胞中的两条X-染色体在间期是有一条，（或这条的大部分）处于凝集而不活动状态，从而形成了这种X-染色质（或称性染色质，Barrs body）后来进一步发现。,二、实验原理,X-染色质是异染色质化的失活的X-染色体，普遍存在于哺乳类雌体细胞中。人类在女性两个X染色体中，有一个是失活的呈异固缩状态（不包括胚胎发育早期及配子形成的时期）。在间期核表现为深染的X-染色质（或称性染色质又叫Barrs小体）。正常情况大小约为1-1.5mm，频率在13-39%左右，而在正常男性个体中缺乏这种现象（0-2%）。因而通过X-染色质的检查可鉴别胎儿性别，并为判断性染色体异常引起的遗传病提供参考资料。,三、实验器具及试剂,1. 器具：显微镜，洁净的载片和盖片，压舌板，刮片或牙签，吸水纸。 2. 试剂：95%乙醇，5%醋酸，2%乳酸醋酸地衣红。,四、实验材料,口腔黏膜细胞或发根细胞。,五、实验方法步骤,低倍镜下检出典型的可数细胞，其标准细胞是：核质呈网状或细颗粒状分布。核膜清晰，核无缺损。染色适度。周围无杂菌。选定后的细胞，在高倍镜或油镜下进一步观察。 X-染色质的形态表现为一结构致密的浓染小体，轮廓清楚，大小约1-1.5m左右，常附着于核膜边缘或靠近内侧，其形状有微凸形，三角形，卵形，短棒形及双球形等。,（三）观察-X-染色质的辨认,六、作业,1. 观察男女性可数细胞各50个，分别计算显示X-染色质细胞所占的百分比。 2. 观察中选绘4-5个典型细胞，示明X-染色质的形态部位。如下图：,取45 ml冰醋酸置于250 ml的三角瓶中，瓶口加一棉塞，在酒精灯上加热至微沸，缓慢加入2 g地衣红使其溶解，待冷却后加入55 ml蒸馏水，振荡5-10分钟，过滤到棕色试剂瓶中备用。或在烧瓶中放入100 ml 45 %的冰醋酸，在酒精灯加热至沸，慢慢溶入2 g地衣红，继续回流煮沸1小时后过滤备用。 临用前，
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