《天然产物分离技术》PPT课件.ppt

专题二 天然产物分离技术（一）,有效成分分离技术,色谱分离技术 分子蒸馏技术 膜分离技术,色谱分离技术,共性 常用类型及原理 吸附层析法 大孔吸附树脂柱色谱 分配层析法 超临界流体色谱 离子交换层析法 凝胶层析法 亲和层析法 逆流色谱,柱色谱,A+B,色谱法的共同特点,色谱技术在研究天然有机化合物的应用,1.分离混合物： 2.精致化合物： 3.鉴定化合物：,Rf=,溶质移动的距离,溶剂移动的距离,吸附层析法,基本原理 吸附柱色谱的操作技术 影响吸附柱色谱分离效果的因素,基本原理,溶剂,样品,吸附剂,玻璃棉,A+B,B,B,A,A,玻璃柱/金属柱,吸附过程三要素：_、_、_ 发生溶质分子与溶剂分子以及溶质分子之间对吸附剂表面的抢夺， “相似者易于吸附” 吸附与解吸附过程贯穿整个柱色谱过程。 化合物在色谱柱上移动的距离,要点,吸附柱色谱的操作技术,色谱柱的选择 吸附剂的选择 洗脱剂的选择 操作步骤,色谱柱的选择,玻璃柱/金属柱。 柱的直径与高度比为： 一般能装样品的倍量的吸附剂。吸附剂用量也可适当提高至样品量的倍。,吸附剂的选择,吸附剂的吸附原理 介绍几种常用吸附剂 氧化铝 硅胶 聚酰胺 活性碳,吸附原理,多孔性固体物质表面积大 表面分子受力不均匀，合力向内。,界面分子,吸附的类型,几种常用吸附剂,氧化铝： 亲水性，吸附能力较强，适用于分离_ 中性氧化铝适于分离： 酸性氧化铝适于： 碱性：,硅胶,亲水性，吸附能力氧化铝，亲脂及亲水性成分都可用。 适用范围： 为避免化学吸附，酸性物质宜用_，碱性物质宜用_。 柱色谱中，二者均以_目左右为宜。,聚酰胺,分子中的酰胺基可与酚类、酸类等成分形成氢键， 主要用于分离黄酮类、蒽醌类、酚类、有机酸类、鞣质（单宁）等成分,活性碳,疏水性（非极性）吸附剂。 主要分离水溶性成分，如氨基酸、糖、苷等,洗脱剂的选择,洗脱剂，又叫、 组成：一般由二元/三元甚至三元以上按一定比例所组成 选择方法：先用薄层色谱/纸色谱试验；再单一溶剂/混合溶剂/梯度洗脱。,选择规律： 吸附剂为极性，被分离物质为弱极性物质，一般选用溶剂； 若被分离物质为强极性物质，则须用溶剂为洗脱剂； 溶剂极性，洗脱能力。,具体选择实例： 当用氧化铝、硅胶进行柱色谱时，常用洗脱剂洗脱能力由小到大为： 石油醚己烷苯甲苯乙醚氯仿乙酸乙酯乙酸甲酯丙酮乙醇甲醇水,聚酰胺时：常用洗脱剂为：,二甲基甲酰胺稀NaOH水液/稀氨水液丙酮95%乙醇70%乙醇50%乙醇30%乙醇水 活性碳：水10%乙醇20%30%，50%，75%，95%乙醇,操作步骤,1.装柱 色谱柱底部：,装柱法,干装法,湿装法,or,2.加样,（1）溶液加样法：样品与吸附剂之比为：1：101：300,溶剂极性较小,（2）拌样加样法适于不易溶解在溶剂中的样品,适量样品,少量极性稍大的挥发性溶剂,空气中,干燥,5倍吸附剂,研粉,3.洗脱,演示,洗脱时的注意点,洗脱液极性应由小到大按某一梯度逐步递增，称“梯度洗脱”，极性跳跃不可过大。常用的混合溶剂组合如下： 己烷-苯、苯-乙醚、苯-乙酸乙酯、氯仿-乙醚、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-甲醇、丙酮-水、甲醇-水,大孔吸附树脂柱色谱,性质 类型 吸附机理 吸附特点 操作技术 应用范围,物理性质： 化学性质： 稳定性： 溶解性：,性质,类型,按其表面性质可分为四种类型： 各类型的吸附范围： 非极性吸附树脂 极性适于 中性 常用的为苯乙烯型、丙烯腈型及丙烯酸酯型等,吸附和筛选原理相结合 1. 分离机制如下： （1）物理吸附作用 （2）化学吸附作用 （3）氢键吸附作用 2.筛选原理,吸附机理,特点,选择性_、吸附容量_、解析_、机械强度_、可_使用、流体阻力较_、交换速度_、耐污染性_ 其_、_和_可按照需要选择不同的原料和合成条件而改变。,操作技术,1.树脂的预处理： 含有杂质 方法：乙醇浸泡24h充分溶胀湿法装柱乙醇清洗蒸馏水洗至澄清，备用。 洗脱溶剂用量：一般为树脂的倍，交替洗次，最终以水洗脱即可。,2.样品液的预处理 除去部分杂质以防污染堵塞树脂。 好处：,3.上柱、吸附和洗脱,基本同其他色谱 湿法装柱乙醇在柱上流动清洗洗净乙醇,应用范围,1.在中药化学成分提取分离纯化的应用; 如： 2.在中药制剂质量控制与分析中的应用； 3.在提取分离天然色素中的应用； 如：,分配柱色谱,原理 类型 分配柱色谱分离条件的选择 操作技术 应用,原理,K 液-液萃取平衡 固定相：,反之,反之,类型,分配色谱分离条件的选择,1.支持剂(要求),硅藻土,纤维素粉,微孔聚乙烯粉,2.固定相的选择,3.洗脱剂（流动相）的选择,操作技术,装柱,流动相,