小细胞性贫血的鉴别诊断

小细胞性贫血的鉴别诊断,血红蛋白概述,在血液中运输气体，被称为“双向呼吸载体”。 由珠蛋白和亚铁血红素两部分组成。 各种血红蛋白的血红素部分相同，而珠蛋白部分不同。,珠蛋白概述,珠蛋白肽链分为和两大类。分别是和类珠蛋白基因的表达产物。 两大类珠蛋白基因表达量相对平衡。 不同种类血红蛋白的珠蛋白肽链不同。,人血红蛋白的组成,人体各时期珠蛋白肽链合成变化情况,小细胞性贫血简介,根据红细胞平均体积（MCV）的大小可将贫血分为大细胞性、正细胞性和小细胞性三类。 当MCV80fl时称为小细胞性贫血。,小细胞性贫血病因学,常见病因 缺铁性贫血（IDA） 地中海贫血及异常血红蛋白病 慢性病性贫血 少见病因 铅中毒 铁粒幼细胞贫血 原发性肺含铁血黄素沉着症等,缺铁性贫血,缺铁性贫血是世界范围内最常见的贫血类型。 根据机体铁缺乏的严重程度可将缺铁症分为贮存铁缺乏、缺铁性红细胞生成和缺铁性贫血三个时期。 目前缺铁诊断的金标准仍是骨髓的普鲁氏兰染色。 其他实验室检查包括：血清铁蛋白、血清铁、总铁结合力、红细胞游离原卟啉、锌原卟啉等。,缺铁性贫血,一些较新的检测铁缺乏的实验室检查包括：血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）检测、低色素性红细胞百分率（Hypo）、网织红细胞血红蛋白（RET-Y/CHr）等。 这些新兴的实验室指标多有助于缺铁性贫血与其他小细胞性贫血的鉴别诊断。,慢性病性贫血,由各种急慢性炎症引起的贫血被称为慢性病性贫血。 在炎症状态（包括肿瘤、急慢性感染和自身免疫性疾病）中会产生多种细胞因子，如IL-1、IL-6、TNF、干扰素a、b、g等。 这些因子改变了铁的平衡，促进了贮存铁在骨髓巨噬细胞和网状内皮系统的蓄积，且可抑制骨髓红细胞的增殖和分化，从而导致小细胞或正细胞性贫血。,血红蛋白病,血红蛋白病是一组遗传性疾病，可简单地分为地中海贫血和异常血红蛋白病。 血红蛋白病的病因学基础是血红蛋白的基因变异。,血红蛋白基因,异常血红蛋白病,异常血红蛋白病是珠蛋白链结构异常而导致的一类疾病。 目前已经发现的异常血红蛋白病大约有700种。 最具有临床意义的异常血红蛋白病是 Hb S、Hb E和Hb C。,地中海贫血简介,地中海贫血是珠蛋白链合成速率下降而导致的一类疾病。 地贫是最常见的单基因突变性疾病。 地贫也是人类最早获得分子遗传学特征的疾病。,地中海贫血的分类,-地中海贫血 -地中海贫血 -地中海贫血 -地中海贫血 ()-地中海贫血 遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合症(HPFH),地中海贫血的分布图, 地中海贫血, 地贫是由于-珠蛋白链合成障碍所致。 其基因变异可发生在1个-基因，或者2个基因同时发生变异。 根据发生突变的-基因数目不同，可将 地贫分为+-地贫，0-地贫，Hb H 病和Hb Barts 胎儿水肿综合征。, 地中海贫血的基因类型, 地贫的基因突变类型多为缺失型。 最常见的基因类型包括：-3.7, -4.2, - SEA, - MED, -THAI, -FIL, -20.5. 非缺失型的 地贫有30余种，其中仅有少数几种比较常见。, 地中海贫血,-地贫是由于 珠蛋白链合成下降或不能合成所致的疾病。, 地中海贫血的基因类型,已发现的 地贫的基因类型超过180种，其中最大部分是单碱基替换。 目前为止仅发现了几种因大段基因缺失所致的0-地贫。 大约一半以上的-地贫是0 型。 研究显示绝大多数的-地贫都包括在25种常见的突变类型中。,小细胞性贫血常见病因的鉴别诊断与实验室检查,小细胞性贫血的诊断流程,CBC及外周血细胞形态观察,铁代谢的相关指标,其他RBC相关参数衍生指标,锌原卟啉（ZnPP）浓度测定,ZnPP是慢性铅中毒和/或缺铁性贫血的有效指标。 ZnPP升高说明血红素合成途径障碍，是铅中毒和缺铁性贫血的敏感性较高的筛选试验。 ZnPP显著升高提示铅中毒， ZnPP中度升高提示轻度铅中毒或缺铁性贫血，需进一步检查以明确诊断。 -地贫ZnPP多正常，-地贫ZnPP可正常或略升高。,Hb H包涵体检查,a地贫时，过剩的b链聚合形成四聚体，即为HbH。 HbH氧亲和力高，又是一种不稳定血红蛋白，容易沉积于红细胞内，形成包涵体。 HbH包涵体对于地贫的诊断既不特异亦不敏感。但当出现较多的HbH包涵体时，提示0地贫可能。,血红蛋白电泳原理,Hb电泳是利用各种Hb等电点不同的原理，在一定的pH缓冲液中各带不同电荷，将Hb液点于浸在特定缓冲液中的支持介质上，经一定时间电泳后，各种Hb泳动的方向和速度不同，从而分出各自的区带。 电泳区带可直接观察,也可用光密度计扫描定量。,血红蛋白电泳,血红蛋白电泳技术包括碱性电泳、酸性电泳、毛细管电流及等电聚焦电泳（IEF）等。 血红蛋白电泳可以定性地检出一些异常血红蛋白（如Hb S，Hb E，Hb C，Hb CS等），也可发现某些血红蛋白组分含量增高。 IEF是灵敏性非常高的一种电泳技术。,碱性琼脂糖电泳结果,碱性琼脂糖电泳结果,碱性琼脂糖电泳结果,碱性琼脂糖电泳结果,IEF结果,HPLC血红蛋白组分分析,利用离子交换高效液相色谱自动分离正常及异常血红蛋白，定量检测全血的HbA2、HbF含量，利用洗脱时间的不同发现某些异常血红蛋白并对其进行定量分析。,BioRad Variant II HbA2/HbA1c Dual Program,HPLC血红蛋白组分分析结果,Hb A2定量检测（微柱法）,是一种阴离子交换色谱法。 其利用带正电荷的树脂柱吸附带负电荷的分子，根据缓冲液的pH水平可将不同的血红蛋白分离。 HbA2首先被洗脱。用分光光度计可测定其与总血红蛋白的比值。,Hb F 的定量检测 （碱裂解法）,Hb F的抗碱裂解能力比其他血红蛋白强，以硫酸铵终止裂解后测定剩余的血红蛋白百分比即为Hb F含量。,血红蛋白组分分析的意义,当Hb A23.5%时，可直接诊断为-地贫； 当Hb A23.2%且不伴有其他血红蛋白质和量的异常时，可排除-地贫； 当3.2%Hb A23.5%，且有其他指标提示血红蛋白病可能时，不能排除-地贫，需进行分子生物学检查。,血红蛋白组分分析的意义,血红蛋白电泳或HPLC发现Hb H后，需与Hb H包涵体试验相互映证，并进行分子生物学试验以明确诊断。 发现Hb S后，需用镰变试验进一步证实；若Hb S的百分率小于35%，需排除合并-地贫可能。,血红蛋白组分分析的意义,发现Hb E，且其百分率50%时，必须明确其为Hb E纯合子或Hb E/-地贫杂合子。 前者临床症状轻，类似于轻型-地贫；而后者的临床症状重，类似于重型-地贫。,血红蛋白病的分子生物学诊断,多数血红蛋白病具有遗传学特性，分子生物学诊断为其确诊依据。 目前国际上采用的分子生物学诊断试验种类很多，如PCR，GAP-PCR，RDB，SSCP，ARMS，RFLP，dHPLC，RT-P