hplc法测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴酚的含量.doc

【摘要】 目的 建立测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴酚含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为hypersil ods c18 (4.6 mm100 mm,5 m)；流动相为甲醇-水(7030),检测波长为294 nm；柱温为30 ；流速为1.0 ml/min。结果 厚朴酚在0.053 41.068 g范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率99.03%,rsd为0.68%；和厚朴酚在0.091.80 g范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.95%,rsd为0.69%。结论 本方法简便、快速,测定结果准确,重现性好。可作为该制剂的质量控制指标。 【关键词】 胃康胶囊；厚朴酚；和厚朴酚；高效液相色谱法；含量测定 abstract：objective to establish a hplc method for determining the contents of magnolol and honokiol in weikang capsule. methods stationary phase was hypersil ods c18 (4.6 mm100 mm, 5 m), mobile phase was methanol-water (7030), with detection wavelength 294 nm, flow rate 1.0 ml/min and column temperature 30 . results there was good linearity in range of 0.05341.068 g (r=0.999 8, n=6) for magnolol. the average recoveries of magnolol was 99.08%, rsd was 0.57%. there was good linearity in range of 0.091.80 g (r=0.999 8,n=6) for honokiol. the average recoveries of honokiol was 98.95%, rsd was 0.69%. conclusion this method is simple, fast and accurate for the quality control of the preparation.key words：weikang capsule；magnolol；honokiol；hplc；content determination 胃康胶囊为我院内科传统制剂,功效健脾和胃、行气止痛。主治浅表性、糜烂性、萎缩性胃炎。用于恶心、呕吐、泛酸、烧心、食欲不振、胃脘部疼痛、胃部怕冷、喜暖、喜按等症。该制剂由党参、厚朴、白芍、砂仁等多味中药组成。其中厚朴为君药,具有燥湿消痰、下气除满的功能1,在方中起重要作用。厚朴的主要成分为厚朴酚、和厚朴酚等2,含量较高,易控制,可选为定量指标。本实验采用hplc法测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴酚的含量。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪：agilent1100系列四元梯度泵、agilent1100手动进样器、agilent1100系列二极管阵列检测器、agilent1100工作站(agilent公司)。超声波清洗器(昆山市淀山湖检测仪器厂),万分之一电子分析天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)。 厚朴酚(中国药品生物制品检定所,批号0729-200309),和厚朴酚(中国药品生物制品检定所,批号0730-200206)。胃康胶囊(本院自制,批号050613、051110、060306)。 甲醇(色谱纯,上海陆都化学试剂厂,20050623),其余所用试剂均为分析纯。2 厚朴酚与和厚朴酚的含量测定2.1 色谱条件 色谱柱：hypersil ods c18(4.6 mm100 mm,5 m)；流动相：甲醇-水(7030)；检测波长：294 nm；柱温：30 ；流速：1.0 ml/min；理论塔板数以厚朴酚峰计不低于3 800。2.2 对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量,加甲醇分别制成每1 ml含厚朴酚0.053 4 mg、和厚朴酚0.09 mg的溶液,即得。2.3 供试品溶液的制备 取本品20粒内容物,混合均匀,取0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 ml,摇匀,密塞,称定重量,超声提取30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得。2.4 线性范围的考察 精密吸取上述对照品溶液1、2、4、6、8、10、20 l,按上述色谱条件测定峰面积。以对照品峰面积为纵座标,以对照品的量为横坐标进行线性回归,结果表明,厚朴酚在0.053 41.068 g范围内呈线性关系,其回归方程为y=223 9.121 3x13.560 6,r=0.999 8；和厚朴酚在0.091.80 g范围内呈线性关系,其回归方程为y=729.705 5x6.507 8,r=0.999 8。色谱图见图1。2.5 阴性对照试验 取去厚朴的阴性制剂,按2.3项下方法制得阴性对照液,以上述色谱条件测定。结果阴性对照液与厚朴酚相同保留时间处,无色谱峰出现。hplc图谱见图1。2.6 精密度试验 取同一浓度的厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液,在上述色谱条件下测定,重复进样6次,结果厚朴酚rsd为1.78%(n=6),和厚朴酚rsd为1.04%(n=6)。结果表明,进样精密度良好。2.7 稳定性试验 取供试品溶液,分别于配制0、1、2、4、8、24 h依法测定,结果厚朴酚rsd为0.48%(n=6),和厚朴酚rsd为0.40% (n=6)。2.8 重复性试验 取同批号的样品6份,分别按2.3项下方法制得供试液,测定厚朴酚平均含量为0.081 mg/粒,rsd为0.79%(n=6)；和厚朴酚平均含量为0.37 mg/粒,rsd为1.25%。表明样品测定重现性良好。2.9 加样回收试验 取批号为060306供试品0.2 g,精密称定,各精密加入一定浓度的对照品溶液(精密称取厚朴酚4.86 mg、和厚朴酚18.32 mg,置10 ml量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,备用)1.0 ml,分别按2.3项下方法制得供试液,以上述色谱条件测定厚朴酚、和厚朴酚的含量。厚朴酚平均回收率为99.03%,rsd为0.68%；和厚朴酚的平均回收率为98.95%,rsd为0.69%。结果见表1、表2。表1 厚朴酚的回收率试验结果(略)表2 和厚朴酚的回收率试验结果(略) 2.10 样品的测定 取各供试品各6份,每份约0.2 g,分别精密称定,按2.3项下方法制得供试品溶液,以上述色谱条件测定各供试品的含量,测定结果取平均值。见表3。表3 供试品中厚朴酚、和厚朴酚的含量(略) 3 讨论 厚朴的主要成分为厚朴酚、和厚朴酚,其含量测定方法有一阶导数紫外分光光度法2、薄层层析-紫外分光光度法2、薄层扫描法2、hplc法1等。本实验hplc法