《人体组织的检验》PPT课件.ppt

第十八章 人体组织检验 物证教研室 徐冬冬,人体组织是重要的法医物证 重建案件现场 个人识别 亲权鉴定 软组织、硬组织和角化组织,毛发检验,皮肤的特殊附属器，由皮肤毛囊细胞产生的角质体。 可见于案发现场、凶器、作案工具、肇事车辆、受害人衣服、体表或手中。,毛发检材的发现与提取 毛发的发现：重点部位-受害人身边。 毛发的提取：镊子夹取，放入物证带，做好标记。 注意：隐蔽部位的毛发；勘察者脱落的毛发；设置对照,1.毛发的结构,一、毛发的特点,注意事项：,毛小皮： 不同种属花纹特征不同人毛呈细小波浪状。 毛皮质： 不同种属色素颗粒分布不同，是鉴别人毛与动物毛的重要依据人毛色素多集中于皮质周围。 毛髓质： 细胞排列具有特征性，可以此区别动物毛。,毛发的形态：直发、波状发、卷发,与种族、遗传、生长部位有关,毛发的颜色： 白色角质体 黑色角质体 白、黑、黄、褐色 红色角质体 发色是区别种族的重要物证之一,随年龄增加，黑色角质体减少，头发渐变灰、白,北极狼的皮毛颜色随季节不同,毛发的分布及分类： 分布： 除唇、手掌、手指、足趾末节等外均长有毛发 分类： 硬毛：较粗硬，如头发、眉毛、睫毛、腋毛、阴毛、胡须等 毳毛：细软、色淡、毛髓质缺如,法医学实践中，以头发和阴毛最为常见,毛发的生长周期：,受部位、性别、年龄、季节和健康状况等因素影响,每日脱落约30120根,毛发的理化性质： 可溶于强碱性溶液。 人体上皮组织的一部分，含有蛋白质、脂肪、水、微量元素（含量有个体差异）等各种成分。 毛发的功能： 保护皮肤和保持体温的作用。,目的与要求： 1是否为毛发 2是人毛或动物的毛发 3人毛发的部位，损伤检验 4毛发的个人识别,二、毛发的实验室检查,肉眼观察：毛尖、毛干和毛根的结构特征 显微镜观察：毛小皮、皮质、髓质三层结构 燃烧法：毛法燃烧后发出特殊的臭味,1、是否毛发,2、人毛与动物毛的鉴别,人头发的毛干、毛小皮花纹,狗毛的毛干、毛小皮花纹,兔毛的毛干、毛小皮花纹,主要采取对比的方法，根据毛发的长短、粗细、色泽、横断面的形状、髓质的位置以及表面附着物等特点，综合分析。,3、人毛部位的确定,头发 长度：人体各部位中最长的，长于10cm大都是头发 直径：属中等（ 75100m ） 毛尖：短发多呈剪断状，长发多呈破裂状或有小分支 横断面：多为圆形或椭圆形 表面常有人工处理痕迹,阴毛 长度：一般长约3-6cm，最长不超过8cm 形状：多呈S形弯曲，毛干上常有凹痕 毛小皮：极不规则波纹状，常见树枝状交叉。 髓质：常连续，比头发略宽 横断面：椭圆形与肾形 可附着分泌物，有时有精子、月经血、内衣纤维,人阴毛毛干、毛小皮花纹,腋毛 长度、卷曲度与阴毛类似，常呈淡褐色 毛干上也有凹痕，但较少 直径较头发细 横断面多为椭圆形 表面常附着腋窝大汗腺的分泌物，呈粘胶状,胡须 长短不定，多为直发，波状发少见 较头发略粗，人体最粗的毛 断面多为三角形或多角形，少数为椭圆形 其它部位毛 眉毛、睫毛、鼻毛一般粗短，长度1cm左右,（1）自然脱落 毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着 5%10%的亚硝基铁氰化钠溶液染色，无颜色反应 （2）暴力拔出的毛发 毛囊组织附着，毛球湿润且下端呈开放状或钩状弯曲 10亚硝基铁氰化钠浸泡染色呈鲜红色。,4、毛发的脱落和损伤,左为自然脱落之毛囊，右为暴力拔下之毛囊,（3）拉断的毛发 离断的毛发断端不规则，呈纵形分裂状，有时甚至呈阶梯状，毛小皮损伤严重。,（4）热作用损伤 毛发对温热作用有一定抵抗力，通常超过150，出现形态结构的改变。烫发对毛小皮有明显的损伤。,（5）钝器损伤 完全断裂：断端膨大，不整齐，有时呈扇形或阶梯状。 未断裂：作用部位呈仿锤形膨大，皮质中出现长形或横形裂纹，皮质纤维分离，毛小皮剥脱。,左为完全断裂之毛发断端，右为钝器打击致毛干局部变形,（6）锐器损伤 锋利锐器：断端平滑整齐，毛干不碎裂，皮质纤维不分裂。 较钝的锐器：断端呈锯齿状或阶梯状。,剪刀剪断之毛发断端,（1）形态学观察 毛发的形态和附着物检查 形态：色泽、长度、是否完整的毛发。 附着物：附着物的成分可获得有关职业、毛发来源等信息。,5、毛发的个人识别,毛发结构观察 外形：毛发外形，有无毛囊，断面形状，毛尖是否分叉等。 色素：色素颗粒的大小，数量，分布，有无染发的色素。 髓质：粗细，是否连续，是否偏离中轴。 毛小皮：纹理特征。,（2）毛发的ABO血型测定 一般用解离试验，方法同血痕检验 注意事项： 毛发必须压扁，充分暴露皮质和髓质 所用血清要特异性好，效价高（128），吸收时间要长 掌握好洗涤次数 设置对照,（3）毛发的酶型检测（新鲜带毛囊） （4）毛发的DNA分析 带毛囊的毛发 Chelex-100法是提取毛囊中DNA的首选方法，可分析 STR基因座及性别鉴定（牙釉基因） 毛干的mtDNA分析 可检测毛干mtDNA-D环区序列多态性进行个人识别,碱性裂解法 提取毛干线 粒体DNA,（5）毛发中微量元素分析 包括定性和定量检验 不同人种、职业、年龄、性别和不同地区的居民、个体之间有一定差异。 常用方法：原子发射光谱，原子吸收分光光谱，中子活化及电子探针技术。 注意：同一个体不同部位和不同生长期的头发微量元素含量也有一定差异。,（6）毛发年龄估计与推断,一般说来，不同年龄阶段的人，其毛发的生长、形态、色泽和结构都有各自的特征。 胎儿和婴儿毛发细软，多无髓质，色素较少。 青壮年色素颗粒多，毛发粗且黑，有弹性。 老年人的毛发，由于色素颗粒少，空气含量增加，因此多出现白发。,在交通肇事、碎尸、空难、爆炸等案件中，组织块是最常见的法医生物检材。 可通过形态学、免疫学、免疫组织化学以及分子生物学方法确定组织块的种类、种属、性别以及身份来源。,三、软组织检验,1.种类鉴别（各种组织有其固有的形态结构） 肉眼观察：适合于组织块比较大的检材的识别 组织切片：显微镜下观察，干燥组织可用5%醋酸浸软组织 皮 肤-复层鳞状上皮细胞结构+真皮层的毛囊和皮脂腺 脑组织-神经细胞和神经胶质细胞 肝 脏-肝细胞及胆管构成肝小叶结构 肾 脏-肾小球、肾小管 消化道-粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜,2.种属鉴定 免疫学方法：抗人血清、胶体金等 分子生物学方法： Alu序列 28srRNA 细胞色素b基因 SON基因,3.组织块的个人识别,血型：ABO系统等 血清型：维生素结合蛋白（DPB）、Km、Gm等 酶型：PGM1, 岩藻糖苷酶等 DNA分析：VNTR, STR, mtDNA等 性别鉴定：肉眼观察、 Amelogenin基因,测定组织块中的遗传标记：,(1)ABO血型测定 ABO血型是法医学物证检验个人识别的传统检测项目，迄今广泛应用于基层法医实践，意义主要在于否定。 方法：吸收试验、解离试验、红细胞粘连试验、免疫组化法和ABO基因分型等 (2) 酶型和血清型测定,(3)DNA分析 检材：新鲜的组织块，腐败组织、蜡块组织切片 1）组织的DNA提取 新鲜或冷冻组织：酚氯仿抽提 腐败组织：酚氯仿抽提，再用Chelex-100提取 组织切片或蜡块：脱蜡后酚氯仿抽提 甲醛固定的组织：消化时增加蛋白酶K的用量及消化时间，酚氯仿抽提后Chelex-100提取 2）DNA分析：STR、mtDNA等,(4) 性别鉴定,直接判定性别 组织碎块： Amelogenin基因检测,注意事项： 主要目的是个人识别 尽快送检 不能及时送检时应低温保存，或充分干燥后保存，不宜用甲醛固定 合理选材 考虑癌变的组织；腐败组织可能影响结果;各种因素（变性或分解）的对结果影响。,骨骼和牙齿是人体坚硬的组织，高度钙化，可抗腐败和长期保存，是个人识别的重要检材。 骨骼和牙齿形态学分析属法医人类学 DNA分析关键提取到DNA DNA来源 骨骼DNA：骨细胞、成骨细胞和破骨细胞； 牙齿 DNA：牙髓腔中的细胞和牙骨质成骨细胞。,骨及牙齿检验,注意事项,1.低拷贝DNA的影响 2.环境因素对DNA的影响 3.设置对照 4.结合STR和mtDNA分析,指(趾)甲检验,ABO血型 特点：ABH血型物质较多，不受分泌型的影响。 方法：吸收试验 DNA检测 有机法结合Chelex-100法；mtDNA、STR分析 指甲油与指甲垢的鉴定,谢 谢!,人体组织检验,1. 毛发与其他纤维的鉴别，人毛与动物毛的鉴别，人毛部位的确定，毛发的脱落与损伤，毛发个人识别（形态学观察、ABO血型测定、DNA 分析、微量元素分析）的基本方法。 2. 软组织的确证、种属鉴定、性别鉴定、个人识别的方法。,混合斑检验,1. 阴道液斑确证（细胞学检查、阴道肽酶测定），精液成分个人识别（ABO血型测定、DNA分析）、阴道液成分个人识别的原理、方法、结果评价和轮奸案混合斑检材的鉴定。 2.多个体血液混合斑的ABO血型测定和DNA多态性检验的程序、方法。,唾液及唾液斑检验,1.唾液（斑）的提取方法。 2.确证唾液（斑）（淀粉-碘反应、口腔粘膜脱落上皮细胞检查）的原理及方法。 3.唾液（斑）个人识别（ABO血型测定）的原理及方法。,精液斑检验,1.精斑的检验程序。 2.精斑预试验（酸性磷酸酶试