《影响灭活的因素》PPT课件.ppt

影响灭活的因素,主讲人：第四组,二一三年六月九日,灭活的概念,是指破坏病原微生物的生物学活性、繁殖能力及致病作用，或者破坏外毒素的毒性作用但尽可能不影响其免疫原性，用以只别的灭活疫苗活类毒素。 灭活是兽用生物制品制备过程中的一项必不少的环节。,灭活的方法,灭活方法可分为： 1、物理灭活法 热灭活、超声波灭活法、紫外线灭活法、射线灭活法等。 2、化学灭活法 利用化学药品或酶使微生物、活性物质的一些结构发生改变而产生的使其丧失生命力、感染性或活性的方法。,常用的灭活剂,甲醛 甲醛及其37%40%溶液即福尔马林，是病毒学中普遍应用的一种病毒灭活剂，在动物灭活疫苗制作中尤为常用。 用甲醛灭活的时间长，一半需要在3739oC处理24h以上或者更长的时间。 灭活的浓度为0.1%-0.8%,结晶紫 它主要是它的阳离子与微生物蛋白质的羧基形成带弱点的化合物，妨碍微生物的正常代谢，扰乱微生物的氧化还原作用，使电势升高而不适于卫生物的生长繁殖。对革兰氏阳性菌主要是干扰细胞壁肽聚糖的合成。,苯酚 为无色结晶或白色榕块，有特殊气味，有毒 及腐败性，易潮解，溶于水及有机溶剂。 苯酚的灭活机制是使微生物的蛋白质发生变性和抑制特异的酶系统（脱氨酶、氧化酶等）的活性，从而导致微生物死亡，常用浓度为0.3%-0.5%。,常用灭活疫苗及灭活方法,猪丹毒灭活疫苗 0.2%0.25%甲醛 370C 1824h 禽巴氏杆菌蜂胶灭活疫苗 0.1%甲醛 370C 712h 猪多杀性巴氏杆菌病疫苗 0.1%甲醛 370C 712h 犬瘟热肝脾组织灭活苗 0.1%甲醛 370C 24h 鸡传染性法氏囊病组织灭活苗 0.4% 370C 2024h 猪瘟结晶紫疫苗 血毒4：甘油结晶紫1（1000ml甘油+2.5g结晶紫）370C-380C 68d 狂犬病羊脑组织苗 组织苗1：苯酚甘油溶液4（含60%甘油及1%苯酚的蒸馏水。360C 7d 破伤风类毒素 0.4%甲醛 370C-380C 2131d,影响灭活的因素,所谓的灭活效果，是指灭活的完全性，即被灭活物的活性是否能完全丧失或破坏，并且灭活后是否保留良好的抗原性。灭活效果，常受灭活剂量、温度、时间、PH、灭活物种类、浓度等因素的影响。 1、灭活的特异性 指某些灭活剂只对一部分微生物有明显的灭活作用，而对另一些微生物则效力很差。酚类能抑制和杀灭大部分细菌的繁殖体，对真菌和病毒不太敏感;阳离子表面活性剂抗菌谱广，效力快，对组织无刺激性，能杀死多钟革兰氏阳性菌和阴性菌，但对绿脓杆菌和细菌芽孢作用弱。,2、微生物的种类及其特性 不同种类的微生物如细菌、病毒、真菌等对灭活剂的敏感性不同，同一种微生物在不同的生长阶段对其灭火剂的敏感性不同，如细菌的芽孢对其灭活剂的抵抗力大于繁殖体，生长期细菌对灭活剂的敏感度应大于静止期。另外微生物的含氧浓度也会影响灭活的效果，一般含氧量越高，甲醛等灭活剂的消耗越大，灭活脱毒越慢。,3、灭活温度 通常同一浓度灭活剂的灭活速度与温度成正比。温度每上升100C，细菌死亡率可成倍增加。金属盐类的杀菌效果增加2.5倍;苯酚的杀菌作用增加5-8倍。但是，如果温度超过400C或更高，将会影响微生物的抗原性。 4、灭活剂的浓度 灭活剂的浓度越高，微生物灭活脱毒的速度越快，抗原损失的也越大。分批加入灭活剂棵保护抗原的免疫原性。,5、灭活时间 一般灭火时间与灭活浓度及灭活温度反比。但是为了保证品质质量，短时间能达到灭活效果最好。 6、pH pH对细菌的灭活作用影响很大。在微酸性是灭活速度慢，细菌抗原性保持较好；在碱性时灭活速度快，蛋抗原性易受破坏；pH也影响灭活剂的电离度，一般来说，未电离的分子较易通过细菌细胞膜，灭活效果较好。,7、有机物的存在 生物制品中含有较多的蛋白质等有机物质，这些有机物质吸附于灭活剂的表面或者与灭活剂的化学基团结