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文档简介

实训四 微生物细胞数的计数,微生物与发酵工艺,使用血球计数板计数单细胞微生物的数量。,一、实验目的,血球计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片制成。玻片中央刻有四条槽，中央两条槽之间的平面比其它平面略低，中央有一小槽，槽的两边的平面上各刻有9个大方格。中间的一个大方格为计数室，它的长、宽各为1mm，深度为0.1mm,容积为0.1mm3。计数室有两种规格，一种是把大方格分成16个中格，每一中格分成25小格，共计400小格；另一种规格是把大方格分成25中格，每一中格分成16小格，总共也是400小格。,二、实验原理,血细胞计数板正面、侧面与正面方格放大示意图,因此，在计算上可按下列两种公式进行： 1. 1625计数板的计算： 细胞数/mL= （100小格内的细胞数/100）400 10000 稀释倍数 2. 25X16计数板的计算： 细胞数/mL= （80小格内的细胞数/80）400 10000 稀释倍数 式中，400为计数板的小格总数； 10000为由计数室0.1mm3换算成lmL体积的系数,二、实验原理,1.材料 酵母菌悬液 2.用具 显微镜、血球计数板,三、实验材料和用具,四、实验方法,1.取清洁干燥的血球计数板，在计数室上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。 2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗入计数室。计数室不得有气泡，然后置高倍镜下计数。,3.样品浓度要求每小格内有510个菌体为宜。 4.计数时，用1625的计数板要按对角线方位，取左上、左下、右上，右下四个中方格(即100小格)计数酵母菌液，用2516的计数板，除计数上述对角线的四个方格外，还需数中央一个方格的酵母菌数(即80小格)。,四、实验方法,5.每个样品重复计数23次，取其平均值，按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细胞数。 6.计数完毕，将计数板在水龙头上
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