第一部分《验证性实验》.docx

第一部分 验证性实验实验一 药物剂量对药物作用的影响【目标】1观察药物不同剂量对其作用的影响。2练习小白鼠的捉拿和腹腔注射法。【材料】 器材：钟罩、托盘天平、1ml注射器、弯盘。 药品：2%水合氯醛溶液【实验对象】小白鼠【操作】1取小白鼠三只，称重，编号后分别放入钟罩内，观察其正常活动。2分别腹腔注射2%水合氯醛溶液：甲鼠0.05ml/10g；乙鼠0.15ml/10g；丙鼠0.5ml/10g,并记录给药时间。3观察三鼠活动变化有何不同，并将实验结果填入表中。【结果】鼠 号体 重药 物 及 剂 量用 药 后 反 应潜 伏 期甲乙丙【注意事项】实验中应保持安静，不能对小白鼠附加任何刺激。【结果分析与体会】【讨论题】根据实验结果说明药物剂量对药物作用的影响，并简述临床用药应注意的问题。【指导教师评阅】实验二 不同给药途径对药物作用的影响【目标】1观察药物的给药途径不同对其作用的影响。2练习家兔的捉拿法及耳静脉注射法、肌肉注射法。【材料】器材：磅称、注射器、干棉球、弯盘等。药品：25%乌拉坦溶液 【实验对象】家兔 【操作】 1取健康家兔2只，称重，编号。观察其正常活动、肌张力、翻正反射、呼吸（次/分）等情况。 2甲兔耳静脉缓慢注射25%乌拉坦溶液4ml/kg，乙兔由大腿外侧肌肉分次注入25%乌拉坦溶液4ml/kg，分别记录给药时间。 3密切观察给药后两兔的翻正反射消失时间及呼吸抑制程度有何不同。并将实验结果填入表中。【结果】兔号体重药物及剂量给药途径翻正反射消失时间呼吸抑制程度甲耳静脉乙肌注【注意事项】 在家兔安静状态下记录呼吸次数。【结果分析与体会】【讨论题】1给药途径对药物作用产生何影响？2临床用药时，同一药物在不同的给药途径时，为什么应用的剂量也不同？ 【指导教师评阅】实验三 药物半数致死量的测定【目标】 了解药物半数致死量测定的意义、原理、方法和计算过程；学习动物的随机分组方法。【材料】 器材： 鼠笼、1ml注射器、5号针头、天平、计算器 药品： 2%盐酸普鲁卡因注射液【实验对象】 小白鼠，体重18g22g,雌雄各半，实验前禁食12小时，不禁水【操作】 寇氏法要求剂量按等比级数排列，每组鼠数一般10只，剂量范围在0-100%死亡率之间。1探索剂量范围 找出100%及0%死亡的剂量（即上、下限剂量Dm、Dn）。方法是取鼠9-10只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药。若3只鼠全死则降低剂量，若全不死则增加剂量，由此找出上、下限剂量。2计算各组剂量 要求各组剂量按等比数列排列，先求出公比r： r=lg-1 （lgDmlg Dn）/G1 G为分组数，本实验分为5组。求出公比r后再计算出各组剂量D1、D2、D3、D4、D5。其中D1= Dn（最小剂量），D2=D1r，D3=D2r，D4=D3r，D5=D4r。3分组并给药 称鼠体重，将体重相同者放一笼，并标记。再分为5组，每组10只，使各组平均体重及体重分布尽可能一致。然后给各组小白鼠腹腔注射计算量的2%盐酸普鲁卡因注射液。给药顺序采用间隔跳组法，即先按2、4组顺序给药，在逆行按5、3、1组顺序给药。4 观察记录 给药后观察小鼠中毒表现，记录死亡数，计算每组死亡率。将结果记入下表。【结果】组别剂量D(mg/kg)对数剂量X (lgD)动物数n (只)死亡数F(只)死亡率P(F/ n)P212345注：P用小数值表示。1计算LD50 LD50 lg-1 Xm i（P 0.5） 式中 Xm：最大剂量的对数值 i: 相邻两组比值的对数 （lgr） (r=D2/D1) P：各组死亡率的总和2计算LD50的95%平均可信限： L95 LD504.5LD50i （P P2）/（n 1）1/2 式中 n：各组动物数 P2：各组死亡率平方的总和【注意事项】1. 本实验为定量药物的毒性测定，要求较高的准确性，故要求动物分组要随机，给药剂量要准确无误。2. 动物种类、体重范围、给药途径、实验观察时间等因素对LD50的测定结果都有影响，在报告结果时都应加以说明。【结果分析与体会】【讨论题】测定LD50的意义是什么？【指导教师评阅】实验四 传出神经药对离体肠肌的作用【目标】观察硫酸阿托品、甲基新斯的明等药物对离体平滑肌的作用；分析它们的作用机制，联系临床应用。【材料】器材：BL-420生物机能实验系统、张力传感器、万能支台、AS-HJ-II型恒温平滑肌槽、手术剪、木锤、敷料碗 小烧杯、1ml注射器。药品：1%硫酸阿托品注射液、1%甲基新斯的明注射液、1%氯化钡、1%毛果芸香碱、台氏液。【实验对象】 家兔【操作】1取家兔一只，用木锤击后脑致死。剖开腹部，分离近十二指肠的一段空肠，剪取23cm小肠数段，置于盛有任氏液的烧杯中备用。将水温控制在3738oC（0.5oC）后，取小肠一段，一端固定在恒温平滑肌槽浴管（盛有台氏液）中的L形钩上，一端固定在张力传感器的连线上，通可数的气泡供养。2启动BL-420生物机能实验系统。待肠肌收缩后，输出描记曲线。3描记一段药前肠肌活动曲线后，向浴管中滴加1%新斯的明3滴。待肠肌收缩明显加强时，再滴加1%阿托品0.2ml， 观察曲线变化。【结果】药 前 曲 线新 斯 的 明 曲 线阿 托 品 曲 线【注意事项】1此实验用饥饿的兔为好，但不能缺水。2制备肠肌标本时不要过分牵拉，以防肠肌功能受损。3水温、肠肌的拉力程度均会影响肠肌的活动，影响实验结果，应注意调节。【结果分析与体会】【讨论题】用受体理论分析讨论阿托品、新斯的明对肠肌的作用，并联系其临床应用。【指导教师评阅】实验五 去甲肾上腺素的缩血管作用 【目标】 1观察去甲肾上腺素的缩血管作用，分析其作用机制，联系其临床用途。2练习蛙的捉拿及破坏其脑、脊髓的方法。 【材料】 器材：脊髓破坏针、图钉、蛙板、手术剪、手术镊子、滴管、放大镜。 药品：0.01%重酒石酸去甲肾上腺素溶液 【实验对象】蛙 【操作】1取蛙一只，破坏大脑和脊髓后背位固定于蛙板上，剖开腹腔一侧，找出肠细膜，平铺于有孔的蛙板上，用放大镜观察肠系膜血管的粗细和色泽。2向肠系膜血管处滴0.01%重酒石酸去甲肾上腺素溶液12滴。3分钟后再观察肠系膜血管粗细、色泽，比较给药前后有何不同。 【结果】标 本给 药 前给 药 后血管粗细色泽血管粗细色泽蛙肠系膜mmmm【结果分析与体会】【讨论题】 1. 去甲肾上腺素为何能收缩血管？其临床用途有哪些？2. 应用去甲肾上腺素时应注意什么问题?【指导教师评阅】实验六 普鲁卡因的传导麻醉作用【目标】观察普鲁卡因的传导麻醉作用，联系其临床应用。【材料】 器材：铁支台、双凹夹、蛙板、手术剪、手术镊、玻璃分针、脊髓探针、大止血钳、秒表、小烧杯、敷料碗、脱脂棉、弯盘、滴管 药品：0.5%盐酸溶液、2%普鲁卡因溶液。【实验对象】 蟾蜍或蛙【操作】1取蛙一只，用脊髓探针破坏大脑后，俯卧位将两前肢固定在蛙板上。2剪开股部皮肤，在股三头肌与半月肌之间用玻璃分针小心分离坐骨神经干（注意不要伤及血管）。在神经干下垫一棉签，将神经干与周围血管，肌肉隔开，然后用止血钳夹住下颌，将其悬吊在铁支台上。3当两下肢静止不动时，分别将两趾蹼浸入0.5%盐酸溶液中，同时打开秒表，测试记录缩腿反射的时间，然后立即用清水洗去趾蹼部的盐酸液，并揩干。两肢交替如上测试三次，记录平均值。4在暴露的神经干上滴加三滴普鲁卡因溶液，并平放五分钟，在用与前相同的方法测试、记录两后肢缩腿反射时间各三次，取均值。以30秒没有缩腿反射为传导阻滞的指标。【结果】下 肢药前缩腿反射时间（秒）药 物药后缩腿反射时间（秒）一 二 三 平均值一 二 三 平均值左盐酸普鲁卡因右空 白 对 照【注意事项】1缩腿反射时间是指从趾蹼浸入盐酸溶液到开始缩腿所用时间。2滴药后必须平放五分钟，以防止药液流失而影响实验结果。【结果分析与体会】【讨论题】 普鲁卡因局麻机制、临床用途？应用时要注意哪些问题？【指导教师评阅】实验七 普鲁卡因与丁卡因毒性比较【目标】1.比较普鲁卡因与丁卡因的毒性大小，并联系临床应用。2.练习小白鼠捉拿及腹腔注射方法。【材料】器材：托盘天平、大号方盘、钟罩、大镊子、1ml注射器、弯盘药品：1%盐酸普鲁卡因溶液、1%盐酸丁卡因溶液动物：小白鼠【操作】取大小相近的小白鼠2只称重，观察正常活动情况后，甲鼠腹腔注射1%盐酸普鲁卡因溶液0.1ml/10g。大约十五分钟左右，乙鼠腹腔注射1%盐酸丁卡因溶液0.1ml/10g。观察两鼠用药后反应有何差异。【结果】鼠号体重药液及其用量用药后反应及时间甲1%盐酸普鲁卡因溶液_ml乙1%盐酸丁卡因溶液_ml【结果分析与体会】【讨论】1.为什么丁卡因在临床上不能作浸润麻醉？2.比较丁卡因和普鲁卡因的特点及用途。【指导教师评阅】实验八 药物的抗惊厥作用【目标】1观察苯巴比妥钠、地西泮的抗惊厥作用。2联系小白鼠的捉拿和腹腔注射法。【材料】 器材：调剂天平、大方盘、钟罩、1ml注射器 药品:0.5%苯巴比妥钠溶液、2.5%尼可刹米溶液、生理盐水【实验对象】 小白鼠【操作】1取小白鼠2只，称重，编号，观察正常活动情况。2甲鼠腹腔注射0.5%苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g，乙鼠同法同量注射生理盐水作对照；320分钟后两鼠均腹腔注射2.5%尼可刹米溶液0.2ml/只；观察两鼠有无惊厥发生，惊厥出现的速度、程度和结果有何不同（后肢强直为惊厥指标）。【结果】()鼠号体重药物剂量尼可刹米惊厥出现时间惊厥程度结果甲乙苯巴比妥钠 ml生理盐水 ml ml ml4给以出现惊厥的小白鼠腹腔注射1%地西泮液0.1ml/10g，观察小鼠的变化。【结果】（二）鼠体重救治前状态药 物 剂 量救 治 后 情 况 1%地西泮 ml【注意事项】地西泮救治应及时，以防小鼠死亡，最好采用小鼠尾静脉注射，作用快。【结果分析与体会】【讨论题】1地西泮的抗惊厥机制、作用及临床用途？2制作惊厥模型除药物致惊法外，还有什么方法？ 【指导教师评阅】实验九 氯丙嗪的镇静和降温作用【目标】 观察氯丙嗪的镇静和降温作用，掌握其降温特点。【材料】 器材：磅秤、肛温表、大方盘、冰袋、弯盘、注射器、脱脂棉等 药品：2.5%氯丙嗪注射液、生理盐水、液体石蜡【实验对象】 家兔【操作】1取健康家兔3只，一人固定家兔头部及兔身，使下肢及尾部暴露。2另一人左手提起兔尾，右手将涂有液体石蜡的肛温表插入肛门内深约45cm，3分钟后取出读数。3以后每隔2分钟测一次共测三次，取平均值，作为正常体温。选择体温在38.539.5oC的家兔，否则弃掉另换。4称重，编号，观察全身正常活动情况后，甲兔耳静脉注射2.5%盐酸氯丙嗪溶液0.3ml/kg,腹部下放冰袋；乙兔耳静脉注射同量氯丙嗪溶液，不放冰袋；丙兔耳静脉注射等量的生理盐水，腹部放冰袋。5每20分钟测量体温一次取均值。观察各兔体温变化及活动情况有何不同【结果】 室温 0C。兔号体重药物及用量（ml）条件药前体温给药后体温温差0C20min 40min 60min甲25%氯丙嗪冰袋乙25%氯丙嗪室温丙生理盐水冰袋【注意事项】 1前药后体温计插入的深度必须一致。 2实验中要保持实验室温度。【结果分析与体会】【讨论题】1根据实验结果分析氯丙嗪的降温特点，有何临床意义？ 2氯丙嗪用于人工冬眠的理论依据是什么？【指导教师评阅】实验十 镇痛药的镇痛作用方法一 热板法【目标】 1观察镇痛药的镇痛作用，并联系其临床应用；2学习镇痛药的筛选方法。【材料】 器材：恒温水浴槽、镇痛盒、秒表、钟罩、注射器等 药品：0.2%吗啡溶液、生理盐水【实验对象】 雌性小白鼠【操作】1将恒温水浴槽内加水至镇痛盒1/3高度，调试温度并控制在55oC0.5oC。2取雌性小鼠2只，放入镇痛盒中，同时启动秒表，密切观察并记录小鼠舔后足的时间，如舔足时间大于30秒者应弃去更换。两鼠各测2次取均值，并把该值作为小鼠的药前痛阈值。3编号后，甲鼠腹腔注射0.2%盐酸吗啡溶液0.6ml/只，乙鼠腹腔注射等量的生理盐水作对照。注射后15分、30分、60分钟各测小白鼠的痛阈值2次，取均值。如60秒无舔足反应，立即取出，痛阈值以60秒计算。4实验完毕，汇总全班各组的实验结果按下列公式计算： 用药后平均反应时间用药前平均反应时间痛阈提高百分率 = - 100% 用药前平均反应时间 【结果】鼠号药物及用量药前痛阈值（秒）药后痛阈值及提高百分率15（%） 30（%） 60（%）甲乙【注意事项】1因雄性小鼠过热时睾丸下垂，阴囊触及热板导致反应敏感，故选雌性小鼠为宜。2此实验室温在150C左右为宜，过低小鼠反应迟钝，多高则过于敏感，产生跳跃，影响实验结果。【结果分析与体会】【讨论题】讨论吗啡的镇痛机制及临床应用。【指导教师评阅】方法二 扭体法（化学刺激法）【目标】1观察比较杜冷丁、颅痛定等正统要的镇痛效应。2学习镇痛药的筛选方法。【材料】器材：托盘天平、大方盘、钟罩、秒表、注射器、弯盘等 药品：0.2%哌替啶溶液、0.2%罗痛定溶液、生理盐水 【实验对象】小白鼠 【操作】1取小白鼠9只，称重，分为三组，每组三只。2甲组腹腔注射0.2%哌替啶溶液0.1ml/10g；乙组腹腔注射0.2%罗痛定溶液0.1ml/10g；丙组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g作对照。 3给药30分钟后，各鼠腹腔注射0.8%醋酸溶液0.2ml/只，随即观察10分钟内出现扭体反应的动物数。扭体反映表现为腹部内凹、后肢伸张、躯体扭体、臀部抬高。4实验完毕，综合全班各组实验结果计算药物镇痛百分率。实验组无扭体鼠数-对照组无扭体鼠数 药物镇痛百分率= -100% 对照组无扭体鼠数 【结果】组别鼠数药物及剂量扭体反应鼠数无扭体反应鼠数镇痛%甲哌替啶 ml乙罗痛定 ml丙生理盐水 ml【注意事项】醋酸液要新鲜配置。也可用0.05%酒石酸锑钾0.4ml/只致痛，但室内温度要求10150C，因酒石酸锑钾的药量随室温的变化而相应的改变。【结果分析与体会】【讨论题】1讨论热板法和扭体法的区别。2试述哌替啶的药理作用及临床用途。【指导教师评阅】实验十一 尼可刹米对呼吸抑制的解救【目标】1观察尼可刹米对吗啡所致呼吸抑制的解救作用，并联系其临床意义。2练习家兔的捉拿、固定方法及耳静脉注射法。【材料】器材：BL-420生物机能实验系统、张力传感器、磅秤、兔台、铁支台、双凹夹、注射器等。药品：1%盐酸吗啡溶液、5%尼可刹米溶液。【实验对象】 家兔【操作】1取家兔一只，称重后背位固定在兔台上，将张力传感器联与家兔胸腹之间。2启动BL-420生物机能实验系统，选择药理实验项目中的有关实验项目（可选择“离体平滑肌”）。设置给药项目及实验参数。3描记一段正常呼吸曲线后，由耳静脉注射1%盐酸吗啡0.7ml/kg，观察呼吸频率及幅度的变化。4当家兔呼吸频率极度减慢、幅度明显降低时，立即由耳静脉缓慢注射5%尼可刹米溶液0.5ml/kg，观察呼吸变化。如欲观察尼可刹米的毒性可快速注射。【结果】动物体重正常呼吸曲线吗啡曲线尼可刹米曲线兔【注意事项】1注射吗啡的速度一般宜先快后慢，做出的呼吸抑制模型较好。 2尼可刹米的注射速度不宜过快，否则容易引起惊厥。【结果分析与体会】【讨论题】1为什么尼可刹米适用于吗啡急性中毒的解救？应用时应注意什么？2吗啡急性中毒的主要症状有哪些？【指导教师评阅】实验十二 强心苷的强心作用【目标】观察强心苷对蟾蜍心脏的直接作用及其与Ca+的关系，分析其作用机制，联系其临床应用。【材料】器材：BL-420生物机能实验系统、张力传感器、蛙心夹、铁支台、蛙板、眼科剪、眼科镊、手术剪、动脉插管、止血钳、辅料镊、脊髓探针、手术线等。 药品：任氏液、缺Ca+任氏液、强心苷注射液、1%氯化钙溶液、0.25%肝素溶液。【实验对象】蟾蜍或青蛙【操作】1取蛙一只，破坏大脑及脊髓，背位固定在蛙板上。2在腹部正中偏左0.5cm行纵行切口，分离腹壁浅静脉备注射之用。3自胸骨下端剪开胸廓，剪成一小窗，用眼用剪、眼用镊将心包膜打开，暴露心脏，结扎右主动脉及左主动脉远心端，并在左主动脉下置一手术线打一活结，剪一小口插入注有肝素液的动脉套管后结扎。4用蛙心夹夹住心尖部，启动BL-420生物机能实验系统，选择药理实验的“蛙心实验”项目，并设置给药项目及实验参数。5描记一段正常心跳曲线后，从腹壁浅静脉缓慢注缺钙任氏液直至心收缩明显减弱时，再注入强心苷注射液0.2ml，待心肌收缩加强时，再注入1%氯化钙溶液1ml（或注至心跳出现明显变化为止）。 【结果】 描绘或剪贴各段心跳曲线。正常曲线缺Ca+任氏液曲线强心苷曲线1%氯化钙曲线【注意事项】1如果腹壁浅静脉注射失败，可直接由动脉给药，但要注意减速减量给药。2灌注缺Ca+任氏液必须保持恒速。【结果分析与体会】【讨论题】根据实验结果讨论强心苷的作用机制、主要药理作用及临床意义。【指导教师评阅】实验十三 普萘洛尔和奎尼丁对氯化钡诱发心律失常的预防作用【目标】观察普萘洛尔和奎尼丁对氯化钡诱发心律失常的预防作用，了解氯化钡诱发心律失常的机制。【材料】 器材：心电记录器材一套,鼠台,手术器械一套,纱布,棉球。药品：100g/L(10%)水合氯醛,3g/L(0.3%)氯化钡,1g/L(0.1%)普萘洛尔,5g/L(0.5%)奎尼丁,生理盐水等.【实验对象】 大鼠【操作】1. 大白鼠3只,称重,编号。2. 腹腔注射10%水合氯醛(34ml/kg)进行麻醉,背位固定于大白鼠手术台上,作股静脉插管备给药用。 3.记录II导联心电图。 4.两只大白鼠分别静脉注射0.1%普萘洛尔(2ml/kg)和0.5%奎尼丁(2ml/kg),另一只静脉注射等容积的生理盐水作对照。然后分别记录给药后1min,3min和5min的心电图。 5.5min后静脉注射0.3%氯化钡(1ml/kg),立即记录心点图,随后记录给药后15秒,30秒及1min 、3min、5min、10min、15min、20min和30min的心电图。【注意事项】1.氯化钡需要新鲜配置,并且快速静注。普萘洛尔和奎尼丁要缓慢静脉注射。2.快速注射氯化钡后,大多数动物在给药过程中或给药后30秒出现心律失常。3.水合氯醛有时可诱发心律失常。【结果分析与体会】【讨论题】 1.氯化钡诱发心律失常的机制是什么? 2.普萘洛尔和奎尼丁抗心律失常的机制是什么?【指导教师评阅】实验十四 普萘洛尔提高心肌缺氧耐受力作用【目标】观察普萘洛尔提高心肌缺氧耐受力作用；学习抗心绞痛药物的筛选方法。【材料】器材：广口瓶（250ml）、秒表、注射器、天平、钟罩药品：钠石灰、凡士林、0.1%盐酸普萘洛尔溶液、生理盐水【实验对象】小白鼠（1822g）【操作】1取小白鼠2只，称重，编号。2甲鼠腹腔注射0.1%盐酸普萘洛尔溶液0.2ml/10g，乙鼠腹腔注射同量生理盐水作对照。3给药15min后，将小鼠分别放入事先装有15g钠石灰的广口瓶中，瓶口涂抹适量凡士林加盖密闭，立即记录时间。观察记录各鼠活动变化及呼吸停止时间。4综合各实验小组结果，计算每种药物的小鼠平均存活时间，并与对照组相比较，求得存活时间延长百分率。存活时间延长百分率（%）= 给药组平均存活时间（min）-对照组平均存活时间（min） 100% 对照组平均存活时间（min）【结果】药 物 及 剂 量小鼠平均存活时间（min）存活时间延长百分率（%）普萘洛尔 ml生理盐水 ml【注意事项】1各组广口瓶需容量一致，绝对密封不漏气。2钠石灰吸水和二氧化碳后变色，应即更换。3为提高对心肌的特异性，可给小白鼠异丙肾上腺素0.2mg/10g皮下注射后15min在进行耐缺氧实验。【结果分析与体会】【讨论题】1普萘洛尔抗缺氧的作用机制是什么？2普萘洛尔与硝酸甘油合用的临床意义？【指导教师评阅】实验十五 可待因的镇咳作用【目标】1观察可待因的镇咳作用，并联系临床应用；2练习小白鼠的腹腔注射方法。【材料】器材：托盘天平、大方盘、钟罩、秒表、注射器胶塞等 药品：0.5%磷酸可待因溶液、生理盐水、浓氨水【实验对象】小白鼠【操作】 取小白鼠2只，称重，置于钟罩内，观察正常活动情况。编号后甲鼠腹腔注射0.5%磷酸可待因溶液0.1ml/10g,乙鼠腹腔注射等量的生理盐水作对照。20分钟后，分别向密闭的钟罩内投入浸有1ml浓氨水的棉球刺激引咳，观察并记录两鼠的咳嗽潜伏期及每分咳嗽次数。咳嗽表现为缩胸、张口、有时可听到咳声。【结果】鼠 号体 重药 物 及 剂 量咳嗽潜伏期（秒）咳嗽（次数/分）甲可待因 ml乙生理盐水 ml【注意事项】 1投置氨水棉球后，必须使钟罩密闭，否则影响实验结果。2咳嗽潜伏期指从投入氨水棉球开始至出现咳嗽的时间。【结果分析与体会】【讨论题】分析可待因的镇咳作用机制、临床应用及主要不良反应。【指导教师评阅】实验十六 硫酸镁的导泻机制分析【目标】观察硫酸镁的导泻作用，分析其作用机理；练习小白鼠灌胃方法，颈椎脱臼处死方法。【材料】 器材：小白鼠灌胃器、手术剪、眼科镊、格尺、小白鼠解剖台等。 药品：甲紫盐水溶液（2%甲紫溶液溶于1.2%氯化钠溶液中）、甲紫硫酸镁溶液（2%甲紫溶液溶于4%硫酸镁溶液中）。【实验动物】小白鼠【操作】取饥饿68小时，体重近似25g左右的小白鼠2只，按下列方法给药：甲鼠以甲紫硫酸镁溶液0.2ml/10g灌胃；乙鼠以甲紫盐水溶液0.2ml/10g灌胃。40分钟后，拉断颈椎处死后立即剖开腹腔，比较两鼠肠蠕动及肠膨胀情况有何不同？将幽门至直肠的肠系膜进行分离，并将肠轻轻拉直，测量自幽门至甲紫到达远端处之间的距离，比较两鼠有无不同。最后将肠腔剪开，观察二鼠粪便性状有无不同。【结果】鼠号灌胃药液用药后40分钟肠蠕动 肠容积 甲紫到达距离甲甲紫硫酸镁 ml乙甲紫盐水 ml【注意事项】1各鼠灌胃剂量、处死时间必须准确一致。2分离肠系膜时不要过分牵拉，以防拉断。【结果分析与体会】【讨论题】根据实验结果分析硫酸镁导泻机制及临床意义。【指导教师评阅】实验十七 硫酸镁急性中毒及钙剂的解救作用【目标】观察硫酸镁急性中毒的症状及钙剂的解救效应；练习家兔耳静脉注射方法和肌内注射方法。【材料】 器材：磅秤、干棉球、注射器、弯盘等。 药品：25%硫酸镁溶液、5%氯化钙溶液。【实验对象】家兔【操作】 取家兔1只，称重，观察正常活动及肌张力状况；由大腿外侧肌肉注射25%硫酸镁溶液4ml/kg(如果量大可由两腿分注)。记录给药时间，注意观察家兔情况变化；当家兔行动困难低头卧倒时，立即由耳静脉缓慢注射3%氯化钙溶液714ml，直至四肢自动站立为止。抢救后可能再次出现麻痹，应立即再次注射钙剂。【结果】动物体重用药前肌注25%硫酸镁液用药后耳静脉注射5%氯化钙用药后活动、肌张力活动、肌张力活动、肌张力兔 ml ml【注意事项】制作硫酸镁急性中毒模型也可用10%硫酸镁溶液，2ml/Kg耳静脉缓慢注射，但要事先准备好拮抗的药物，以备救治及时。【结果分析与体会】【讨论题】根据实验结果分析讨论药物拮抗作用的临床意义。【指导教师评阅】实验十八 链霉素毒性反应及解救【目标】 观察链霉素阻断神经肌肉接头的毒性反应及钙剂、新斯的明的解救作用。【材料】 器材：注射器（5ml、10ml）、干棉球 药品：5%氯化钙溶液、24%硫酸链霉素溶液、0.5%甲基硫酸新斯的明【实验对象】 家兔【操作】取家兔2只，称重，编号。观察正常活动情况呼吸及肌张力情况后，甲兔大腿肌肉注射24%硫酸链霉素溶液4ml/Kg，乙兔以同样途径注射等量硫酸链霉素溶液。观察两兔中毒症状，待中毒症出现时（大约20min）立即给于甲兔耳静脉注射5%CaCl2溶液1.6ml/kg。呼吸麻痹时应给于人工呼吸。乙兔不救治。观察两兔有何变化。【结果】兔号处 理 阶 段观 察 项 目呼 吸翻正反射四肢肌张力甲兔( Kg)给药前用链霉素后用氯化钙及甲基硫酸新斯的明乙兔（ Kg）给药前用链霉素后【注意事项】链霉素肌肉注射后毒性反应发生较慢，一般在10分钟后出现，并逐渐加深，应密切观察呼吸和肌张力，事先准备好救治药物，症状一出现即给予抢救。【结果分析与体会】【讨论题】链霉素急性中毒的主要表现？应如何解救？ 【指导教师评阅】第二部分 综合性实验实验一 有机磷中毒及解救【目标】1观察敌百虫中毒的症状；分析阿托品、碘解磷定的救治机制及其特点。2练习家兔的捉拿方法、耳静脉注射法、肌内注射法。【材料】器材：大方盘、量瞳尺、磅秤、注射器、干棉球等药品：5%敌百虫溶液、2.5%解磷定溶液、0.1%硫酸阿托品溶液【实验对象】 家兔【操作】1取家兔二只，标记，观察并测量表中所列各项指标,并采取中毒前血样（耳缘静脉抽血0.5ml置于经1% 肝素处理过的试管内）。2两兔均肌内注射5%敌百虫溶液1.8ml/Kg，观察表中各项指标的变化情况。3当中毒症状明显出现时（约20分左右），立即测量表中各项指标, 并采取中毒时血样0.5ml，然后甲兔耳静脉注射0.05%硫酸阿托品溶液2.0ml/Kg，乙兔耳静脉注射2.5%碘解磷定溶液2.0ml/Kg，观察并记录上述各项指标的变化情况，分别采取用药后血样0.5ml，并比较两药的作用特点。4. 交叉给药：即甲兔给碘解磷定2.0ml/Kg，乙兔给阿托品2.0ml/Kg。【结果】兔号体重药 物瞳孔（mm）呼吸次/分唾液分泌大小便有无肌紧张度活动情况酶活性（u/ml）甲用药前5%敌百虫 0.1%阿托品 乙用药前5%敌百虫 2.5%碘解磷定 【胆碱酯酶活性测定】用胆碱酯酶试剂盒配制好工作液（详见试剂盒说明书），工作液预先保温至测试温度。样品：新鲜无溶血血清波长：405nm温度：25，30或37比色杯光径:1cm空 白 管样 品 液工 作 液3.00ml3.00ml蒸 馏 水0.02ml样 品0.02ml若37测定，需将样品用生理盐水稀释一倍，混合均匀，读取初始吸光度，开始计时，在精确30秒，60秒，90秒时，分别读取吸光度，确定每分钟平均吸光度A/分。计算：CHE(U/L)=A样品/分-A空白/分）11355 （30）CHE(U/L)=A样品/分-A空白/分）22710 （37）【注意事项】1.敌百虫刺激性较大，应缓慢注射。2.给家兔注射敌百虫后20分钟仍未出现中毒症状者，可再静注1/3量敌百虫。3.实验结束后两兔应分别补注阿托品和解磷定以防家兔死亡。【结果分析与体会】【讨论题】1.说出有机磷酸酯类的中毒机制。2.比较阿托品和解磷定的解救特点及机制。【指导教师评阅】实验二、生理、病生因素及药物对动脉血压的影响【目的】1观察影响动脉血压的几种因素及其作用机制。2学习哺乳动物血压的直接测量方法。3观察传出神经系统药对血压的影响，分析其作用机制，并联系临床用途。【材料】器材：BL-420生物机能实验系统、压力传感器、张力换能器、动物手术器械一套、动脉夹、家兔手术台、注射器等药品：20%氨基甲酸乙酯溶液、0.5%肝素生理盐水溶液（或6%拘橼酸钠溶液）、0.1%肾上腺素、0.2%去甲肾上腺素、1%酚妥拉明、0.1%乙酰胆碱、0.1%毒扁豆碱、1%阿托品、 生理盐水【实验对象】家兔【操作】一、神经调节对血压的影响1仪器的安装与手术根据实验内容调试BL-420生物机能实验系统，选择各项参数，连接压力换能器并充满抗凝剂，调零定标，将压力调至90mmHg左右，以备插管。 取健康家兔一只，称重，从耳静脉缓慢注入25%氨基甲酸乙酯溶液4ml/Kg行麻醉术。将兔固定在手术台上，剪掉颈部毛，分离颈前肌肉，暴露气管旁颈动脉鞘，用玻璃分针拨开颈动脉鞘，先分离出减压神经（最细），然后分离交感神经（在减压神经和迷走神经之间），迷走神经和两侧颈总动脉。并在各神经下穿一条不同颜色的浸过生理盐水的手术线。在左颈总动脉向心插入充满抗凝剂的并结有三通的动脉插管，结扎固定。去除动脉夹，调节三通管使血压换能器与动脉插管相通。（压力换能器应与兔心脏位置持平），描记一段正常曲线。2观察项目夹闭颈总动脉。用动脉夹夹住右侧颈总动脉，观察心率与血压的变化，待出现明显变化后，解除夹闭。刺激减压神经。待血压基本恢复正常后，结扎减压神经，并在结扎向心端处剪断减压神经，将向中枢端减压神经置于刺激电极上。开启刺激输出，观察心率与血压的变化。待血压变化明显后，停止刺激。刺激迷走神经外周端。待血压基本稳定后，结扎迷走神经并在结扎向中枢端处剪断，置迷走神经向心端于刺激电极上。待血压基本稳定后，开启刺激输出，观测心率与血压的变化。二、药物对血压的影响1几种拟、抗肾上腺素药物作用的比较。按下列顺序耳静脉给药，并记录血压、心率等变化，从各药对、受体作用选择性的不同分析各药对血压、心率的影响。0.1%肾上腺素0.10.2ml0.2%去甲肾上腺素0.10.2ml3%麻黄碱0.60.8ml1%酚妥拉明0.2ml2拟胆碱药与抗胆碱药相互作用。按下列顺序耳静脉给药，并记录血压、心率等变化，了解乙酰胆碱激动M胆碱受体及N胆碱受体对血压、心率的影响。 0.1%乙酰胆碱0.5ml/Kg0.1%毒扁豆碱0.1ml/Kg1%阿托品0.3ml/Kg三、失血对血压的影响1待血压基本稳定后，调节三通管使动脉插管与60ml注射器相通，放血50ml。观察失血对心率、血压的影响。2观察后立即用肝素盐水将插管内血液推回兔体内，观察补充血容量后的心率、血压的变化。四、空气栓塞实验完毕后以5ml/Kg空气栓塞处死，观察心率、血压的变化。学习实验动物的急性处死方法。【结果】整理、统计、剪辑各阶段实验记录曲线。【注意事项】1静脉麻醉时，注射速度不宜过快，且应随时注视呼吸，角膜反射等指标。2如实验时间较长可用20%氨基甲酸乙酯2g/Kg，静脉腹腔各半量麻醉。3根据实验动物情况可选择给药组数。4本实验最好选择猫，兔对药物的耐受性较差，对药物的反应不如猫典型。【结果分析与体会】【讨论题】1试比较肾上腺素、去甲肾上腺素、麻黄碱、酚妥拉明对血压作用特点。2分析酚妥拉明使肾上腺素升压作用翻转的机制。【指导教师评阅】实验三 影响尿生成的因素及利尿药的作用【目的】 学习膀胱导尿方法，观察影响尿生成的因素及利尿药的作用，并分析其作用机制。【原理】 本实验用生理盐水和药物影响肾小球有效滤过压和肾小管重吸收功能，通过观察血压与尿量的变化，加深对肾脏生理和利尿药作用机制的理解。【材料】器材：BL-420生物机能实验系统、哺乳动物手术器械、保护电极、兔手术台、10号导尿管、静脉输液装置、动脉夹、5ml和10ml注射器各3支、试管架、酒精灯、烧杯、纱布、手术线、量筒等。药品：生理盐水、25%氨基甲酸乙酯、50%葡萄糖溶液、0.01%去甲肾上腺素、1%呋塞米溶液、斑氏试剂、抗凝剂（3.8%枸椽酸钠溶液或肝素溶液）。【实验对象】 雄性家兔（实验前1小时给予自来水4050ml灌胃）【方法】一、动物手术与导尿用25%氨基甲酸乙酯（4ml/kg）耳缘静脉注射将兔麻醉，然后将其背位固定于兔手术台上，剪去颈部兔毛，做颈部正中垂直切口，分离左侧颈总动脉，插入动脉插管，描记动脉血压（见血压实验），用头皮输液针做耳缘静脉穿刺并固定，缓慢输入生理盐水（510滴/分）以保持静脉通畅。分离一侧迷走神经。用无菌充满生理盐水的10号导尿管涂占少许液体石腊，由外尿道口插入79cm，见尿液滴出后，将导尿管用胶布固定于兔体上。然后将插管连接到记滴装置上。按程序打开BL-420生物机能实验系统，使之进入实验记录频道，单击菜单实验项目栏，从泌尿实验找出“影响尿生成的因素”栏，测试血压描记、尿液记滴。二、观察项目1输入37生理盐水2040ml，观察并记录血压和尿量变化（滴/分），或收集30分钟尿液（下同），并取1ml中段尿液置于试管中备用。2取尿液2滴进行尿糖定性试验（见附注），然后自耳缘静脉注入50%葡萄糖溶液5ml/kg，于尿量明显增多时再取尿液2滴作尿液定性实验，同时另取1ml尿液置于试管中备用。3静脉给予0.01%去甲肾上腺素0.5ml，观察血压及尿量变化。4剪断分离出的一侧迷走神经，移动鼠标，选择刺激项，用保护电极以中等强度刺激迷走神经外周端（约0.51min），使血压下降50mmHg左右，观察血压及尿量变化。5静脉给予1%呋塞米溶液0.5ml/kg体重，观察并记录血压及尿量变化，尿量增多时，取1ml置于试管中备用。6整理并记录曲线，血压、尿量、尿糖具体数据，填入表中，分析、讨论实验结果。【注意事项】1注意保护耳缘静脉。静脉穿刺时应从耳缘开始，逐步移向耳根，才能多次利用此静脉进行注射。2进行每项实验之前，应记录血压和尿量作为对照。每项实验之后应等药物（或刺激）效应基本消失，再进行下一项实验。3观察实验效果一般约需几分钟（即15分钟），但有的项目（如呋塞米）需时稍长，可在5分钟以后观察。【结果】实验项目 血压（mmHg）尿量（滴/分）前后前后静脉注射生理盐水（2040ml）静脉注射葡萄糖（2.0ml/kg）0.01%去甲肾上腺素（0.5ml）1%呋塞米溶液（0.5ml/kg）刺激迷走神经(外周端)【附注】尿糖定性实验 试管内加斑氏试剂1ml，再加尿液2滴，在酒精灯上加热煮沸。加热时，应注意振荡试验，防止试液煮沸时溢出管外。冷却后观察尿液和沉淀的颜色。如溶液的颜色由绿色转变成黄色或砖红色，表示尿糖试验阳性。【结果分析与体会】【讨论题】 1本实验中哪些因素可影响肾小球的滤过？哪些因素影响肾小管和集合管的重吸收和分泌？ 2. 静脉注射50%葡萄糖溶液和生理盐水引起多尿的机制是什么？ 3给速尿后尿量增多的机制是什么？其临床应用及注意事项有哪些？ 【指导教师评阅】 实验四 药物血浆半衰期的测定【目的】 了解药物血浆半衰期（t1/2）的简单测定方法；学习兔采血术。【材料】器材：755型紫外可见光分光光度计、离心机、计算器、婴儿秤、50ml烧杯、10ml试管、试管架、5ml注射器、7号针头、0.5ml、1ml、5ml吸管、吸球、纱布。药品：0.02%水杨酸钠标准溶液、10%水杨酸钠溶液、10%三氯醋酸溶液、10%三氯化铁溶液、0.5%肝素（生理盐水配制）溶液、蒸馏水。【实验对象】 家兔【方法】1试管四支，编号，每管加入10%三氯醋酸3.5ml。2取家兔一只，称重。用0.5%肝素浸润的注射器从心脏取血2.0ml分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）各1ml，摇匀静置。3由耳缘静脉缓慢注射水杨酸钠200mg/kg(按2ml/kg给药)，并记录给药时间。4分别于给药后5min、