GBT 5009.38-1996 蔬菜、水果卫生标准的分析方法.pdf

中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 蔬菜、 水果卫生标准的分析方法 G B / T 5 0 0 9 . 3 8 -1 9 9 6 Me t h o d f o r a n a l y s i s o f h y g i e n i c s t a n d a r d o f v e g e t a b l e s a n d f r u i t s 代替 G B 5 0 0 9 . 3 8 - - 8 5 ， 主要内容与适用范围 本标准规定了蔬菜、 水果中卫生指标的分析方法。 本标准适用于蔬菜、 水果中六六六、 滴滴涕、 有机磷农药、 汞、 锡、 氟、 砷、 甲基托布津、 多菌灵各项卫 生指标的分析。 2 弓 ! 用标准 G B / T 5 0 0 9 . 1 1 食品中总砷的测定方法 G B / T 5 0 0 9 . 1 5 食品中 锅的测定方法 G B / T 5 0 0 9 . 1 7 食品中总汞的测定方法 G B / T 5 0 0 9 . 1 8 食品中 氟的测定方法 G B / T 5 0 0 9 . 1 9 食品中 六六六、 滴滴涕残留量的测定方法 G B / T 5 0 0 9 . 2 0 食品中 有机磷农药残留量的测定方法 3 感官检查 外观正常， 不能有腐烂霉变现象。 4 理化检验 4 . 1 六六六、 滴滴涕 按G B / T 5 0 0 9 . 1 9 操作。 42 有机磷农药 按G B / T 5 0 0 9 . 2 0 操作。 4 . 3 汞 按G B / T 5 0 0 9 . 1 7 操作。 4 . 4 锅 按G B / T 5 0 0 9 . 1 5 操作。 4 . 5 氟 按G B / T 5 0 0 9 . 1 8 操作。 4 . 6 砷 按 G B / T 5 0 0 9 . 1 1 操作。 4 . 了 甲基托布津、 多菌灵 4 . 7 门原理 中华人民共和国卫生部1 9 9 6 一 0 6 一 1 9 批准1 9 9 6 一 0 9 一 0 1 实施 G s / T 5 0 0 9 . 3 8 -1 9 9 6 用甲醇自样品中提取出甲基托布津， 在p Hl -2 时， 用二氯甲烷提取， 甲基托布津经闭环反应转变 为多菌灵， 提纯后， 用紫外分光光度法进行定量测定。多菌灵经提取后可直接测定吸光度而进行定量 定星时为了排除各种作物中的干扰影响， 采用作图法， 求得校正吸光度， 再根据校正吸光度和甲基 托布津( 或多菌灵) 的关系绘制成标准曲线。 多菌灵具有苯并咪哇的特异吸收， 植物成分干扰不大。 4 . 7 . 2 试P H 4 . 7 . 2 . 1 甲醇 4 . 7 . 2 . 2 二氯甲烷 4 . 7 . 2 . 3 三氯甲烷。 4 . 7 . 2 . 4 石油醚 沸程3 0 - 6 0 C , 4 . 7 - 2 . 5 乙 酸一 乙酸铜溶液: 称取2 g 乙 酸铜， 加1 0 0 m L冰乙 酸， 稍加热溶解， 用水稀释至2 0 0 m L , 4 . 7 . 2 . 6 盐酸( 1 +1 1 ) : 量取盐酸9 0 m L ， 加水稀释至1 0 0 0 m L . 4 . 7 . 2 . 7 氢氧化钠溶液( 8 0 g / L ) : 称取8 g 氢氧化钠， 加水溶解并稀释至1 0 0 m l 。 4 . 7 . 2 . 8 氢氧化按溶液( 1 +7 ) : 量取氨水1 0 m L ， 加水稀释至8 0 m L , 4 . 7 . 2 . 9 氯化钠溶液( 1 0 0 g / 1 ) 。 4 . 7 . 2 . 1 0 甲 基托布津标准溶液: 准确称取5 0 . 0 m g甲 基托布津， 置于烧杯中， 用三氯甲 烷溶解并移至 5 0 m 工 容量瓶中， 稀释至 刻度。 此 溶液每 毫升 相当 于l . 0 m g甲 基 托布津。 4 . 7 . 2 . 1 1 甲基托布津标准使用液: 吸取 1 0 . 0 m L甲基托布津标准溶液， 置于1 0 0 m L容量瓶中， 加三 城甲 烷稀释至刻度， 此溶液每毫升相当于1 0 0 . 0 p g甲 基托布津。 4 . 7 . 2 . 1 2 多菌灵标准溶液: 准确称取5 0 . 0 m g 多菌灵置于烧杯中， 用盐酸( 1 十1 1 ) 溶解移入5 0 m L 容 I瓶中， 并稀释至刻度。 此溶液每毫升相当于1 . 0 m g 多菌灵。 4 . 7 . 2 . 1 3 多菌灵标准使用液: 吸取1 0 . 0 m L多菌灵标准溶液， 置于1 0 0 m L容量瓶中， 加盐酸( 1 +1 1 ) 稀释至刻度， 此溶液每毫升相当于1 0 0 . 0 p g 多菌灵。 4 . 7 . 3 仪器 4 . 73 . 1 紫外分光光度计。 4 . 7 . 3 . 2 空气冷凝管， 或用 6 0 c m长的玻璃管( 自制) 。 4 . 了 . 4 分析步骤 4 . 7 . 4 . 1 标准曲线的制备 4 . 7 . 4 . 1 . 1 甲基托布津标准曲线: 吸取。 , 0 . 1 , 0 . 3 , 0 . 5 m l甲基托布津标准使用液( 相当于。 , 1 0 , 3 0 , 5 0 h g 甲基托布津) ， 分别置于3 0 m l圆底离心管中， 挥干溶剂后， 各加1 0 m l 一 乙 酸一 乙 酸铜溶液及2 粒 玻璃珠， 接 r 空气冷凝管， 小火缓缓煮沸o . 5 h ， 取下， 用2 0 m L盐酸( 1 -1 1 ) 从冷凝管顶端洗涤冷凝管 和圆底离心管. 并移入 1 2 5 m l ， 分液漏斗中， 用二氯甲烷提取二次， 每次 1 0 m l - ， 弃去二氯甲烷层， 酸溶 液中加2 5 m l氢氧化钠溶液( 8 0 g / L ) 至p H 6 . 0 -6 . 5 ( p H试纸试) ， 用二氯甲 烷提取二次， 每次2 0 m l ， 含并 几 氯甲 烷提取液， 用1 0 m L水洗涤一次， 静置分层后， 将二氯甲 烷层分入另一个干的分液漏斗中， 准确加入1 0 m l 盐酸( 1 十 1 1 ) ， 振摇5 m i n , 静置分 层后， 盐酸提取液 用l c m石英比 色 杯， 以 盐酸( 1 + 1 1 ) 调肯 分光光度计零点， 测读2 5 0 - 3 0 0 n m的吸光度， 以波长为横坐标， 吸光度为纵坐标， 绘制吸收图谱。 将图谱上2 6 0 n m和2 9 0 n m吸光度读数点连成直线， 设直线上2 8 2 n m的吸光度为A ， 吸收图谱上 2 8 2 n m 的吸光度为A ， 两者之差为 A ( A A =A , , 2 n m-A z e 2 n m， 为校正吸光度) 。 再以校正吸光度为纵 坐标 甲基托布津的含量为横坐标， 绘制各甲 基托布津标准点A值的标准曲线。 4 . 7 . 4 . 1 . 2 多菌灵标准曲线: 吸取。 , 0 . 1 , 0 . 3 , 0 . 5 m l 一 多菌灵标准使用液( 相当于。 , 1 0 , 3 0 , 5 0 p g 多菌 灵)片于盛有2 0 m L盐酸( 1 +1 1 ) 的分液漏斗中， 各用二氯甲烷提取二次， 每次1 0 m L ， 弃去二 氯甲烷 1， 水z i ii li 1 11 氢氧化按( 1 +7 ) 中和到p H为6 . 0 -6 . 5 ( p H试纸试) ， 用二氯甲烷提取二次， 每次2 0 m l ， G B / e 5 0 0 9 . 3 8 -1 9 9 6 提取液用1 0 m L水洗涤一次， 以下按4 . 7 . 4 . 1 甲 基托布津标准曲线自 “ 将二氯甲 烷层分入另一个千的 分液漏斗中， 准确加入1 0 m L盐酸( 1 +1 1 ) ” 起依法操作， 并绘制吸收图谱， 计算出 A值后， 绘制多菌灵 的标准曲线 4 . 7 . 4 . 2 样品的提取和分离 称取5 0 . 0 g 切碎、 混匀的样品， 加5 0 m l甲醇振摇0 . 5 h ， 用布氏 漏斗抽滤， 容器和滤器用甲醇洗 涤二次 每次 1 5 2 0 m L抽干后， 滤液移入烧杯中， 抽滤瓶用约1 0 m L水洗涤 洗液并入滤液内， 在水 浴上用空气流吹去部分甲醇后， 移入分液漏斗中， 加3 0 m L氯化钠溶液( 1 0 0 g / L ) ， 用石油醚振摇提取 二次， 每次2 5 m l ， 弃去石油醚， 加盐酸酸化至p H为1 -2用p H试纸试) ， 用二氯甲 烷提取二次， 每 次2 5 m l - ， 合并二氯甲 烷提取液， 用2 5 m L水洗涤一次， 分出二氯甲 烷层留作甲基托布津测定用。 水洗涤液合并入水层， 留作多菌灵测定用。 4 . 7 . 4 . 3 甲基托布津的测定 二氯甲 烷提取液自 然挥干后， 用1 0 m L乙酸 乙酸银溶液分次溶解残渣， 并移入3 0 m L圆底离心管 中， 加2 粒玻璃珠， 以下按4 . 7 . 4 . 1 . 1 自 “ 接上空气冷凝管” 起依法操作， 计算出样品的 A值， 再与甲基 托布津的标准曲线比较， 计算样品中的含量 4 . 7 . 44 多菌灵的测定 取4 . 7 . 4 . 2 中留作多菌灵测定的水溶液， 用氢氧化钱( 1 +7 ) 中和至p H 6。 一 6 . 5 , 然后按4 . 7 . 4 . 1 多菌灵标准曲线自 “ 用二氯甲 烷提取二次” 起依法操作， 计算出样品中的 A值， 再与多菌灵标准曲线比 较， 计算样品中的含量。 甲基托布津在植物中的主要代谢物是多菌灵， 是甲 基托布津水解和闭环所形成， 因而目 前甲基托布 津的残留量是以这两个化合物测得的残留量之和表示。 4 . 7 . 45 计算 ( m, + m, ) X 1 0 0 0 m, X 1 0 0 0 式中: X 样品中甲基托布津和多菌灵含量, m g / k g ; 。 ， 测定用样品中甲 基托布津的质量, r g ; 阴 测定用样品中多菌灵的质量， F x g m样品质量+ g = c B / T 5 0 0 9 . 3 8 -1 9 9 6 1 6 1 4 i 米 目 日 考 0 . 1 6 阅 a 0 . 1 4 0 . 1 2 下1| 一 一 0 . 0 8 0 . 0 6 11|，|IJ |1。阅心-1 .1 ，1阅心1 0 . 0 6 0 . 0 4 0 2 6 0 2 9 8 波长. n m 含f + / + H A A, - 1 0 A A 一0 . 0 5