米曲霉研究进展与应用.pdf

第 4期 2 0 0 8 年 4月 中国调味品 CHI NA CoNDI M ENT NO 4 Ap r 20 08 米 曲霉研究进展 与应用 刘 丽萍 ， 刘丽华 ( 内蒙古工业大学 生物工程系 ， 呼和浩特0 1 0 0 5 1 ) 摘要 ： 综述 了米曲霉在基础相关领域、 发酵产物领域、 宏观诱变及微观诱 变领域 的研究与应 用 并提 出展望。 关键词： 米曲霉； 酶制剂； 诱 变 中图分号 ： T S 2 6 1 1 2 文献标识码 ： A 文章编号 ； 1 O O O 一9 9 7 3 ( 2 0 0 8 ) 0 4 -0 0 2 8 -0 5 St u d y an d a ppl i c a t i on o f As p er gi l l u s or y z a e i n d i f f er e n t d o mai n s LI U Li p i ng LI U Li - hu a ( De p a r t me n t o f Bi o l o g y ， I n n e r M o n g o l i a Un i v e r s i t y o f Te c h n o l o g y，Hu h h o t 0 1 0 0 5 1 ， Ch i n a ) Ab s t r a c t S t u d y a n d a p p l i c a t i o n o f As p e r g i l l u s o r y z a e i n d i f f e r e n t d o ma i n s i n c l u d i n g f o u n d a - t i o n a n d c or r e l a t i o n ，ma c r os c op i c a nd m i c r o s c o pi c m u t a t i o n， pr o du c t i on o f f e r m e nt we r e s u mm a r i z e dI t s de v e l o pme n t p r o s p e c t wa s pr o p os e d Ke y wor ds a s p e r g i l l u s o r y z a e ； e nz y m e； mut a t i o n 米曲霉( As p e r g i l l u s o r y z a e ) 是一种好气性 真菌 ， 分类学归属于半知菌亚门、 曲霉属。菌丝一 般呈黄绿色， 酸度较大的培养基上呈绿色 ， 酸度较 小的培养基上 呈黄色 ， 老化后逐渐为褐色。分生 孢子梗生长在厚壁的足细胞上， 分生孢子头呈放 射形 ， 顶囊球形或瓶形。培养适温 3 7 。米曲霉 主要存在于粮食、 发酵食 品、 腐败有机物、 土壤等 处， 是我国传统酿造食 品酱、 酱油和酒类 的生产菌 种， 也可用于生产各种酶制剂、 有机酸、 糖化饲料、 益生素等。在众多曲霉属家族 中， 米 曲霉 占有着 重要的地位 。随着应用领域的蓬勃发展， 人们对 米曲霉 的关注 日渐增长。 1 米 曲霉基础领 域 的研 究 1 1 米 曲霉基 因组 的破译 日本研究人员历经四年零四个月时间成功的 破译 了米 曲霉基 因组， 并于 2 0 0 5年 1 2月在自 然 杂志上发表了分析结果 ： 米曲霉基因组大约有 收稿 日期 t 2 o 0 8 一O 2 1 9 基 金项 目t 内蒙古 自治区科学基金 资助项 目( 2 0 0 7 1 1 O 2 O 2 O 6 ) 作者简介 。 刘丽 萍( 1 9 7 8 一) ， 女 ， 在读硕士研究生 。 3 8 0 0万个碱基对 ， 共有 8条染色体， 包含约1 2万 个基 因。这一成果为从微观领域研究米曲霉打下 了一个 良好 的基础。 1 2 米 曲霉原 生质体 制 备 、 再 生和 融合 为了更进一步研究 米曲霉 ， 制备原生质体就 变得尤为重要 。原 生质体 ( P r o t o p l a s t ) 即在高渗 压溶液中， 用酶法将细胞壁分解除掉 ， 剩下由原生 质膜包住的球状胞体。它保持了原细胞的一切活 性 。原生质体因去掉细胞壁屏障而对诱变剂的敏 感性增强、 变异率提高， 而且表面易形成 电极性， 使不同种原生质之间相互 易于吸引、 脱水粘合而 形成聚集物 ， 因而原生质体诱变、 融合是菌种选育 的一种行之有效的方法 。 王燕 1 等人利用纤维素酶 、 溶壁酶、 蜗牛酶三 种酶混合 ， 并按 5： 3： 1的配 比， 结果达到了最优 的破除细胞壁的效果。章运 2 等人考 虑了菌龄 、 酶解温度、 酶解时间、 再生培养基的稳渗剂等多种 因 素 ， 对沪酿3 0 4 2 的原生质体制备与再生做了 维普资讯 第 4期 专论综述米曲霉研 究进展与应用 2 9 相关研究 。同时此项研究也为其他米曲霉的原生 质制备提供 良好的思路。 1 3 米 曲霉生长因素影响 除了一些常规 的培养物配比不同对米 曲霉的 生长产生影响外 ， 张剑 3 还分别研究了提取脂肪酸 后的环境污染源柄海鞘残渣以及银杏叶对米 曲霉沪酿 3 0 4 2生长的影响。柄海鞘残渣做为部 分氮源 ， 可有效增加菌体的生长量 ， 但柄海鞘残渣 的浓度要受到限制 ， 否则菌体生长将会受到抑制。 这与稀土元素生 物效应 中的 Ho r me s i s 现象很相 似 4 ； 银杏叶则对米曲霉 3 0 4 2 菌生长存在 明显 的 抑制作用 ， 而且当银杏叶添加量逐渐增加， 其抑制 作用越来越强。随着对菌种资源的保护以及生态、 环保意识的提高， 此类研究越来越值得重视。 1 4 米 曲霉富硒作用 硒是人体生长发育所必须的微 量元 素， 人体 缺硒会患克山病、 大骨病、 高血压 、 冠心病、 皮肤病 等， 儿童缺硒会影响发育， 导致智力低下。但硒多 以无机状态存在且转化为有机硒才能更好的被人 体利用 ， 同时有机硒还有较高的生理活性和较低 的毒性 。米 曲霉是很好的富硒载体， 文献记载 引： 亚硒酸钠浓度 为 1 0 0 mg L时， 米 曲霉 的生物量 最大 ， 富硒能力 最高， 其 中有机硒 ( 如硒代蛋氨 酸 、 硒代半胱氨酸、 硒代胱氨酸等)含量达到 9 5 以上， 应用前景很好。 2 米 曲霉发酵产物系的研究与应用 2 1 米 曲霉发酵产各种酶制剂 2 1 1 发酵产蛋 白酶及应用 米曲霉在食品酿造方面的应用历史悠久 ， 近些 年在饲料加工方 面 的研 究也 日趋深 入 ， 这些 方 面的 研究主要集中在米曲霉发酵产蛋白酶方面上。最近 有文献报道， 米 曲霉发酵产蛋白酶可以水解鳕鱼粉 制备蛋白胨。蛋白胨广泛应用于食品、 发酵、 医药、 卫生、 临床细菌检验及科研等方面。可见蛋白酶在 产品深加工领域也将会创造更大效益。 2 1 2 发酵产淀粉酶及应用 淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总 称 ， 包括 旷淀粉酶、 淀粉酶、 糖化酶和异淀粉酶。淀 粉酶是一种诱导酶， 这类酶的形成只有在底物存在 时才能生成， 其作用是将 淀粉或糖浆中残留的淀粉 进一步彻底降解为单糖即葡萄糖、 果糖等。单糖对 产品的色、 香、 味、 体都有重要影响。 2 1 3 发酵产 f 半乳糖苷酶及应用 f - 半乳糖苷酶可消除乳糖不耐症 ， 米 曲霉所 代谢出的 f - 半乳糖苷酶能够水解牛乳和乳清 中的 乳糖， 成为可 以吸收和甜 味品质好的半乳糖 和葡 萄糖。同时又能合成低聚半 乳糖 ， 此糖是 双岐杆 菌增值 因子 ， 难以被人体消化， 能改善便秘 ， 具降 低血糖 ， 促进钙的吸收， 抗龋齿等作用 6 。 2 1 4 发酵产脂肪酶及应用 脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一 ， 可 以 催化解脂、 酯交换 、 酯合成等反应 ， 将脂肪 分解成 脂肪酸和甘油并广泛应用 于油脂 加工、 食 品、 医 药 、 日化等工业。不 同来源的脂肪酶具有不 同的 催化特点和催化活力 。王小花 7 J 等人对米曲霉产 胞外脂肪酶培养条件进行优化 ， 筛选 出麦芽糖为 最佳碳源 ， 蛋白胨为最佳氮源， 平高级脂肪醇与环 氧乙烷加成物为最佳 的表面活性剂 ， 为米 曲霉产 脂肪酶方向的研究提供了参考 。 2 1 5 发酵产纤维素酶及应用 纤维素酶系一般包括三种水解酶 ， 即内切葡 聚糖酶( c x ) 、 外切葡 聚糖 酶( C 1 ) 、 f - 葡 萄糖 苷酶 ( p G) 。纤维素酶在食 品、 饲料 、 农副产品加工、 石 油开采和资源再利用等方面具有广泛应用前景 。 黄晓东 8 等人利用豆渣对米 曲霉进行 固态发酵得 出： 提取物的抗氧化性增强 。经分析验证 ， 米 曲霉 代谢所产生的 p 一 葡萄糖苷酶 ( p G ) 使豆渣 中异黄 酮糖苷酶酶解 为异黄酮苷元 。异黄酮苷元具有很 强的抗氧化性。 2 1 6 发酵产果胶酶及应用 果胶酶是分解果胶 的酶的通称 ， 也是一个多 酶复合物。果胶酶主要是由果胶裂解酶、 聚半乳 糖 醛酸 酶 、 果 胶 酸 盐裂 解 酶 和果 胶 酯 酶 组 成 。果 胶酶可以降低果汁的粘度、 澄清果汁、 提高果汁超 滤通量、 提高葡萄酒得率及过滤速度 ， 其应用对食 品加工业做出了很大贡献。 汤鸣强 g 等对米 曲霉 固体发酵生产果胶酶进 行研究， 得出米 曲霉菌株 F - 8 1发酵条件及浸提条 件。 2 1 7 发酵产氨基酰化酶及应用 氨基酰化 酶是一类 能专一水解 N 一 乙酰一 DL _ 氨基酸的酰胺键的酶， 由于这种立体专一性， 所以 很早就被用来拆分 DL - 氨基 酸。L _ 型、 I ) 型氨基 维普资讯 3 0 中 国 调 味 品 总第 3 5 0期 酸在医药 、 食品、 饮料等行业都有很好的应用。 石开风 1 阳等人对固定化 菌体拆分消旋物质 及酶活动力学进行初步 的研究 ， 并对拆分后产品 进行初步提纯。 另外 ， 通过硫酸铵分级沉淀、 S e p h a d e x G5 0凝 胶层 析 和 D E AE S e p h a r o s e阴离 子交换 层 析方 法 对米 曲霉 3 0 4 2所产氨基酰化 酶进行提取 ， 并 同 时考察了温度 、 p H值 、 缓 冲体系的离子强度和金 属离子对米曲氨基酰化酶酶活的影响。 2 1 8 发酵产植酸酶及应用 目前植酸酶在饲料添加剂市场需求很广。可 以提高禽肉、 禽蛋的氮 、 磷、 钙利用率。 陈惠 1 妇等人对微生物产植酸酶的条件及热 稳定性 进行 研 究 ， 对 比了黑 曲霉 9 7 0 1 、 米 曲霉 9 7 1 2 、 根霉 9 7 0 2三种霉菌的固体培养法生产植酸 酶的条件。由文献是对 比研究 ， 所 以要单 向研究 米曲霉 ， 可参考此法进行深入研究 。 2 1 9 发酵产大豆异黄酮糖苷酶及应用 大豆异黄酮以游离甙元和结合型的糖苷形式 存在， 前者生理活性很好， 后者必须转化为甙元的 形式才能更好的被吸收。大豆异黄酮有抗肿瘤作 用， 尤其是对与激素有关的肿瘤 ， 如乳腺癌和前列 腺癌有显著抑制作用 ， 另外对治疗和预防心脑血管 疾病有很好的疗效。但大多数大豆异黄酮都是以 结合型糖苷形式存在， 所以用米曲发酵产分解糖苷 的酶的研究具有社会意义和经济效益。曾莹 1 等 人研究并优化 了米 曲霉高产大豆异黄酮糖苷酶发 酵条件， 为这一领域的研究实践做出了贡献。 2 1 1 O 发酵产腺苷酸脱氨酶及应用 腺苷酸( AMP ) 脱氨酶是一种氨基水解酶 ， 它 能够定量脱去腺苷酸嘌呤碱基上的氨基 ， 生成肌 苷酸( I MP ) 和 NH3 。I MP可用 于生产药品和强 力味精 。AMP脱氨酶是构成嘌呤核苷酸代谢循 环的 3种主要酶类之一 ， 它对维持体内腺苷酸能 荷和机体免疫 力有重要作用。此外 ， 它还是核酸 酶解法生产呈味核苷酸( 钠盐是新一代 的核苷酸 类食品鲜味增强剂) 的重要酶类之一。国内虽在 2 O世纪 8 O和 9 O年代对曲霉 AMP脱氨酶进行了 研究 ， 但 目前尚未工业 化生产。段作 营 1 。 等人通 过实验获得 了米曲霉 3 8 0 0固态发酵产腺苷酸 ( AMP ) 脱氨酶的适宜培养基并对 组成进行 了优 化 ， 确定 了麸 曲中 AMP脱氨酶的浸提条件 ， 对其 进行 了初步纯化 ， 为将来工业化生产提供依据 。 2 1 1 1 发酵产 S I 核酸酶及应用 S I 核酸酶( s I n u c l e a s e ) 是从米曲霉中分离纯化 的一种金属蛋白， 分子量为 3 2 k D a ， 是一种耐热的酶 ( 3 7 6 5 “ C ) 。可用于分析 D N A： R NA杂交体的结 构， 去掉双链核酸中突出的单链尾从而产生平末端， 打开双链 c D N A合成 中产生的发荚环。 V ( “ 等人 于 1 9 7 3年对米曲霉产的 S I 核酸酶进行了纯化和进 一 步的性质研究， 至今相关的资料并不多见。 2 1 1 2 发酵产复合酶及应用 2 1 1 2 1 米曲霉菌丝体可以催化药物合成 3 ， 4 一 二羟苯 L - 丙氨酸是一种药物 ， 它不仅可 以选择性的调节因神经鞘受损后心肌膜能量代谢 所产酶的的水平 ， 而且还可 以治疗帕金森病 。米 曲霉 UV 7 可产酪氨酸羟化酶 、 酪氨酸 酶和 B 一 酪 氨 酸酶 ， 这三种 酶可 以催 化 L - 酪 氨酸 合 成 3 ， 4 一 二 羟苯 L - 丙 氨酸 ， 这 一微生 物 学 转 变 为生 化 领 域通 往药物域又开辟一条新径 1 。 2 。 1 1 2 。 2 米曲霉催化甘油生产 1 ， 3 一 丙二醇 1 ， 3 一 丙二 醇( 1 ， 3 - P D O) 是 一种 重 要 的化 工 原 料 ， 是有机合成的中间体 ， 主要用作聚酯和聚氨酯 的单体， 以及溶剂 、 分析试剂 、 抗冻剂和保护剂等。 苑广志 1 阳 等人采用 以甘油为 唯一碳 源和以甘油 与葡萄糖共同作碳源的方 法从米 曲霉菌 AS 3 0 4 2 和 UV 一 4 8出发， 筛选到两株催化甘油生产 1 ， 3 一 丙 二醇的霉 菌。生物催化法生产 化工原料具 有节 能、 环保 、 高效等特点 ， 成为人们研究热点 ， 也为进 一 步产业化打下基础。 2 2 米 曲霉 发酵产 有 机酸 的研 究与应 用 2 2 1 发酵 产 曲酸 曲酸是一种具有抗菌作用 的有机酸， 对水果 、 蔬菜有护色作用 ， 还可以消除人体 内自由基 ， 同时 具有抑制黑色素生成酶活性的能力 ， 还可用作摄 影 、 胶片去斑剂等 ， 因此在食 品、 化妆 品、 农业 、 医 药、 化工等行业有着广 阔的应用前景 。董静 1 刀 等 人研究了复合诱变对米曲霉 2 3 3 6产酸量 的影响 ， 经过紫外线 、 6 0 C o诱变筛选出 1株不产黄 曲霉毒 素且高产曲酸、 能利用玉米淀粉为碳源的变异株。 2 2 2 发酵产圆弧偶氮酸 圆弧偶氮酸是一种神经毒。赵珊 阳等人利用 反相高效液相色谱法分析米曲霉发酵液中的圆弧偶 氮酸。该方法为米曲霉代谢产物研究开辟新径。 维普资讯 第 4期 专论综述米曲霉研 究进展 与应用 3 1 2 3 用米曲霉作为牲畜的益生素 益生素是一种含有大量有益菌及其代谢产物 和生长促进因子 的活菌制剂 ， 它能维持肠道微生 物平衡、 提高机体健康水平。1 9 9 4年我 国批准 了 6种益生菌菌株可以使用， 其 中包括米曲霉( 其余 5种为芽孢杆 菌、 乳酸杆菌、 粪链球 菌、 酵母菌和 黑曲霉) 。米 曲霉及其提取物对牲畜 、 家禽的消化 功能、 生产功能都有很 大影响。孙安权 1 妇等人研 究了米曲霉提取物对瘤胃生态及奶牛生产性能的 影响。瘤胃是反刍动物 的一种特殊的消化器官 ， 在消化过程 中起到很重要的作用。 此项 研究 表 明， 米 曲霉 发酵 提取 物艾美 福 ( Ama f e r m) 通过刺激纤维素分解菌 的生长， 提高 纤维素酶的产量 ， 提高饲草 中纤维的消化率， 改善 反刍动物瘤 胃生理功能， 稳定瘤胃 p H 值， 从 而达 到降低奶牛代谢疾病 ， 提高反刍动物的生产性能 及体况， 显著提高奶 牛抗热应 激的能力 。Ha n等 人( 1 9 9 9 ) 通过对产蛋鸡饲喂米曲霉益生素的实验 得出结论： 不能排 除外源性米 曲霉在 胃肠道 中与 内源 性 菌 群 有 协 同互 作 的作 用 。Gr i me s等 ( 1 9 9 7 ) 进行了一项试验 ， 以测定米 曲霉和黑 曲霉 的发酵产物 F e r ma c t o ” 福美多” 对产蛋母鸡 的功 效。F e r ma c t o是我 国农 业部批准进 口美 国培一 埃公司生产 的益生素饲料 添加剂 。试验 结果表 明， 向产蛋母鸡 日粮 中添加 0 1 的米 曲霉益生 素可以影响营养元素消化、 调节胆固醇代谢及肠 道菌群 ， 并减少氨气的产生。 3 米曲霉诱变筛选领域的研究 一 般采用对细胞或原生质体进行物理诱变及 化学诱 变， 并筛选 出高产各种酶类 的菌株 ； 还有从 基因工程方面对米曲霉进行诱变。 3 1 物 理 、 化 学 诱变 文献 中记载的诱变方法有快 中子、 钴 6 O 射 线、 紫外线、 甲基磺酸 乙酯 ( E MS ) 、 氯化锂 、 硫酸 二 乙酯 ( DE S ) 、 N+离子束 注入等， 诱变对象除 了 细胞外还有原生质体。其中低能离子诱变原理较 繁杂 ， 分为能量沉积 、 动量传递 、 质量沉积 以及 电 荷交换 ， 其应用前景也值得观注 。 3 2 基 因调 控诱 变 反义 R NA( a n t i s e n s e R NA) 是指 mR N A 互补 的 R NA分子。这种 反义 R N A 能与 mR NA分子 特异性地互补结合 ， 从而抑制该 mR N A 的加工与 翻译 。通过人工合成反义 R NA的基 因， 并将之导 入细胞内， 转录出反义 R NA， 即能抑制特定基 因的 表达 ， 阻断该基因的功能， 有助于了解该基 因对细 胞生长和分化 的作用。x F z h e n g等人 2 。 通过 构建一株 由反义 R NA表达而低产丝氨酸羧肽 酶 的米曲霉突变株， 实现了高产多种蛋白酶的愿望 。 实验结果表明该株所产的丝氨酸羧肽酶只是亲代 产此酶的 3 O 。体外蛋白降解分析证 明人类 的溶 解酵素( 具有多种酶分解功能) 可被纯化的 0号酶 降解 ， 因此可 以使用 这株突变株去产各种蛋 白酶 类 。张宇玲 2 1 等人构建了高产米曲霉果胶酸内切 水解酶( P G A) 的基因工程菌， 并成功实现其在原核 系统 中重组表 达 ， 同时 也对 P G A在 大 肠杆 菌 系 统 中表达的条件进行了研究。 4 结果 与展望 生物工程菌的应用时代久远， 从古到今 ， 给人 的感叹是万物造化之神奇 ， 那么小 ， 一度 曾是看不 见 的， 却能有“ 四两搏千斤” 之功效 。随着科技 的 进步和人们对效率 的追求 ， 在微生物领域对米 曲 霉的研究还应该放在高产各类 酶方面， 即从产 酶 基 因的宏观环境与微观环境着手 ， 采用更先进 的 诱变方式以及更有效 的基 因调控 机制， 这样效果 将会更好 。 参考 文献： 1 王 燕 ， 车 振明 ， 唐洁 ， 等 米 曲霉 酶法破壁 的研究 J 3 食品工业科 技 ， 2 0 0 6 ， 2 7 ( 2 ) ； 1 2 1 1 2 2 2 章运 ， 傅力 沪酿3 0 4 2 米 曲霉 原生 质体 制备 条 件的 研究 J 3 石河子大学学报 ( 自然科学版) 。 2 0 0 4 ， 2 2 ( 6 ) ； 519 52 1 3 3 林剑 海 鞘残渣对米 曲霉沪 酿3 0 4 2 生长 和酶活 力的 影响 J 3 中国酿造 。 2 0 0 6 ( 3 ) t 3 5 3 7 4 3 张信连 。 杨维 东 。 刘 洁生 ， 等 稀土元 素生 物效应 中的 H o r m e s i s 现象 J 生物技术革新， 2 0 0 4 。 1 4 ( 6 ) ： 8 2 8 4 I s 3 逯家辉 。 高朝 辉 。 龙宇 飞 。 等 沪酿3 0 4 2 米 曲霉富硒条 件的探索 J 中国调味品。 2 0 0 5 ( 6 ) ； 1 O 一1 4 6 3 赵 龙飞 。 徐亚 军 米 曲霉 的应 用研 究进展 J 中国酿 造 2 0 0 6 ( 3 ) 。 8 1 O 7 王小花， 洪枫。 朱利民。 等 米曲霉产胞外脂肪酶培养条 件的优化D 食品与发酵工业。 2 0 0 5 ( 4 ) t 2 5 2 8 I s 3 黄晓东。 叶生梅 。 高新义， 等 米曲霉固态发酵豆渣及其提 取物抗氧化性的研究 J 食品科技 ， 2 o 0 5 ( 5 )t 8 0 8 幺 9 3 汤鸣强 ， 卞矛 。 李琼华 米 曲霉 固体发酵生产果 胶酶的 维普资讯 3 2 中 国 调 味品 总第 3 5 0 期 研 究 J 福建师 范大学福清分 校学报 ， 2 0 0 6 ， 7 3 ( 2 ) ： 31 35 1 O 石开风 ， 曹飞 ， 周华 ， 等 米曲氨基酰化酶液态发酵 条 件的研究 J 食 品与发酵工业 2 0 0 4 ， 3 0 ( 7 ) ： 7 8 8 1 1 1 陈惠 米 曲产植 酸酶产 酶条件及热稳定性 的研究 J 四川农 业大学学报 ， 1 9 9 9 1 2 曾莹 ， 李彦 ， 何 平 米 曲霉 产大豆 民异黄酮糖 苷梅发 酵条件的研究 J 中国酿造 ， 2 0 0 5 ( 7 ) ： 1 9 2 1 1 3 段作营 ， 刘军昌， 毛忠贵 米曲霉腺苷酸脱氨酶的产 酶条件D 无锡轻工大学学报， 2 0 0 2 ， 2 1 ( 5 ) ： 4 7 2 4 7 1 4 Vo g t V m P u r i f i c a t i o n a n d f u r t h e r p r o p e r t i e s o f s i n - g l e s t r a n d s p e c i f i c n u c l e a s e f r o m As p e r g i l l u s o r y z a e J E u rop e j u r n a l o f B i o c h e mi s t r y 1 9 7 3 ( 3 3 ) l 1 92 19 7 1 5 l k r a m U 1一Ha q，S i k a n d e r Al 1 Mi c r o b i o l o g i c a l Tr a n s f o r ma t i o n o f L Ty r o s i n e t o 3 ，4 - Di h y d r o x y - p h e n y l LAl a n i n e( L Do p a)b y aM u t a n t S t r a i no f A s p e r g i l l u s o r y z a e UV一 7 J C u r r e n t Mi c r o b i o l o g y， 2 0 0 2 ( 4 5 ) ： 8 8 9 3 1 6 苑广志 ， 田晶， 徐龙权 ， 等 曲霉发 酵甘油生产1 ， 3 - 丙 二醇的研究D 食 品与发酵工业， 2 0 0 6 ， 3 2 ( 1 ) ： 4 9 5 1 1 7 董睁， 孟宪军， 郑艳 ， 等 复合诱 变对米 曲霉2 3 3 6 产酸 量的影响 J 食 品与发酵工业 ， 2 0 0 5 ， 3 1 ( 9 ) ： 3 2 3 4 1 8 赵珊， 李业鹏 ， 计融 ， 等 反 相高效液相色谱法 分析米 曲霉 发 酵 液 中 的 圆弧 偶 氮 酸 J 中 国食 品卫 生 杂志， 2 0 0 3 ， 1 5 ( 2 ) ： 1 2 8 1 3 0 1 9 孙 安权 ， 沙海锋 米 曲霉提取物对瘤 胃生态及奶 牛生 产性能 的影 响 J 乳业科 学与技 术 ， 2 0 0 6 ， 1 1 9 ( 4 ) ： 1 8 4 1 86 2 0 X F Z h e n g Y K o b a y a s h i M T a k e u c h i C o n s t r u c t i o n o f a l o w 。 。s e r i n e。 。t y p e -c a r b o x y p e p t i d a s e 。 。p r o - d u c i n g mu t a n t o f As p e r g i l l u s o r y z a e b y t h e e x p r e s s i o n o f a n t i s e na e RNA a nd i t s u s e a s a h o s t f o r h e t e r o l o- g o u s p r o t e i n s e c r e t io n J Ap p l Mi c r o b i o l B i o t e c h n o l ( 1 9 9 8 ) 4 9 ： 3 9 4 4 2 1 张宇 玲 ， 赵 庆 新 ， 朱 泓 ， 等 米 曲 霉 ( As p e r g i l l u s o r y z a e ) 果 胶酸内切水解 酶( P GA) 在原核系统 中重组 表达 口 生物工程学报 ，2 0 0 7 ， 2 3 ( 1 ) ： i 0 1 1 0 5 ( 上接 2 7页) 参考文献 ： 1 Av r a h a m F J a l v b o u t，Md Ab u l Ha i d e r S h i p a r F o r - ma t i o n o f p y r a z i n e s i n h y d r o x y a c e t a l d e h y d e a n d g l y c i n e n o n e n z y ma t i c b r o wn i n g M a i l l a r d r e a c t i o n ：A c o mp u - t a t i o n a l s t u d y J F o o d C h e mi s r t y ，2 0 0 7 ( 8 ) ： 1 - 9 2 付莉 ， 李 铁 刚 简述 美拉 德反 应 J 食 品科技 ， 2 0 0 6 ( 1 2 )t 9 - 1 2 3 S a r a I F S Ma r t i n s wi m M F J o n g e n Ma r t i n u s A J S v a n B o e k e 1 Ar e v i e w o f M a i l l a r d r e a c t i o n i n f o o d a n d i mp l i c a t i o n s t o k i n e ti c m o d e l i n g J F 0 o d S c i e n c e a nd Te c h n o l o g y ，2 0 0 1 ( 1 1 ) ： 3 6 4 3 7 3 4 CS c a ma n S Na k a i ， M A mi n l a r i E f f e c t o f p H ， t e mp - e r a t u r e a n d s o d i u m b i s u l fit e o r c y s t e i n e o n t h e l e v e l o f M a i l l a r d b a s e d c o n u g a t i o n o f l y s o z y me wi t h d e x t - r a n， g a l a c t o ma n n a n a n d a n n a n J F 0 o d C h e mi s t r y ， 20 06， 9 9： 3 68 38 0 5 S o t t a w a t B e n j a k u l ， Wi t t a y a c h a i L e r t i t fi k u l ， F r i e d r i c h B a u e r An t i o x i d a n t a c t i v i t y o f M a i l l a r d r e a c t i o n p r- o d u c t s f r o m a p o r c i n e p l a s ma p r o t e i n s u g a r mo d e l s y 。 。 s t e m J F o o d C h e mi s t r y ，2 0 0 5 ，9 3 ： 1 8 9 - 1 9 6 6 Ab r a h a m F J a l b o u t。Md A b u l Ha i d e r S h i p a r ， J o s e Lu i s Na v a r ro De n s i t y f u n c t i o n a l c o mp u t a t i o na l s t u d i e s o n r i b o s e a n d g l y c i n e M a i l l a r d r e a c t i o n l F o r ma t i o n o f t h e Ama d o r i r e a r r a n g e me n t p r o d u c t s i n a q u e o u s s o l - u t i o n J F o o d C h e mi s t r y ， 2 0 0 6 ( 9 ) l 1 - 8 7 S u L i n C h e n， S h u - Y i J i n， C h i n - S 0 r l g C h e n R e l a t i v e r e a c t i o n o f g l u c o s e a n d g a l a c t o s e i n b r o wn i n g a n d p y - r u v a l d e h y d e f o r ma t i o n i n s u g a rg l y c i n e mo