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文档简介
环境生物学实验一,生物显微镜的使用和细胞形态结构的观察,实验目的,1. 了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能,并掌握正确的使用及维护方法。 2. 在显微镜下观察植物和动物细胞,了解动物细胞与植物细胞结构的异同点。 3. 掌握生物绘图法。 4. 理解细胞是生命体结构与生命活动的基本单位。,显微镜的基本结构,机械部分 镜座 镜柱 镜臂 镜筒 载物台 转换器 调焦器 聚光器调节螺旋,光学部分 物镜 目镜 聚光器 反光镜 内光源照明系统,显微镜的使用步骤: (1)取、放显微镜的正确做法 一手握镜臂,一手托镜座托在胸前。放在距离桌边5-10cm左右为好。 (2)对光 先将低倍物镜对准通光孔,调整反光镜(外光源显微镜)或电源电压,使视野中的光线明亮而不刺眼。 (3)放置标本 将玻片中有标本的地方移到通光孔的中央。,显微镜的使用步骤: (4)调焦点 慢慢转动粗准焦螺旋,从侧面注视使物镜与玻片接近工作距离5mm左右。 (5)使用低倍镜观察 移动标本,找到需要观察的位置。用细准焦螺旋调清楚物像。 (6)使用高倍镜观察 将高倍镜换入,然后用细准焦螺旋调清楚物像。,(7)使用油镜观察 在观察线粒体、细菌等细小的结构时需要使用100倍的物镜。100倍的物镜需要在油的介质中工作,故称油镜或油浸物镜。油镜需在物镜与标本之间充上一种折光率与玻璃一样高的介质。通常使用香柏油,才能使物像清晰。 (8)使用油镜的方法 先低倍,后高倍,再用油镜。用油镜前要将观察对象移到视野的中央,移开高倍物镜,将香柏油滴在标本的盖玻片上,直接换入油镜,使镜头浸在油中。转动细准焦螺旋,调整焦点,使物像清晰。 (9)观察后用“显微镜的保养”中介绍的方法及时去除镜头上的香柏油。,需要注意的几个问题,一、正确使用准焦螺旋的问题 实验中极易出现以下错误: (1) 不经过低倍镜,直接在高倍镜下调焦; (2)在高倍镜下用粗准焦螺旋调焦,且转动的速度很快; (3)不管载物台上升或下降,眼睛始终在往目镜中看视野。 调节焦距一定要在低倍镜下调,先转动粗准焦螺旋,物镜靠近载玻片,当视野中出现模糊的物像时,就要换用细准焦螺旋调节,缩小寻找范围,提高找到物像的速度。,二、物镜转换的问题 使用低倍镜后换用高倍镜,往往喜欢用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,原因是转换器的材料质地较软,精度较高,螺纹受力不均匀很容易松脱。一旦螺纹破坏,整个转换器就会报废。 手握转换器的下层转动板转换物镜。,三、正确用眼的问题 用显微镜观察物体时,应双眼同时睁开,左眼往目镜内注视,右眼试图向视野内注视,如此反复训练,就会达到双眼同时睁开观察的要求。,四、使用结束后显微镜的复原 显微镜使用完毕,关闭电源,拔下插头;将物镜镜头转开,取下玻片,擦净载物台和物镜,调动粗准焦螺旋,将载物台下降至最低点,将各部分还原。罩上防尘罩。 五、显微镜的保养 (1)注意防潮; (2)保持清洁,注意防尘(镜头的清洁方法); (3)防止酸碱等腐蚀性的液体玷污显微镜,在观察临时装片时,防止里面的液体流出。,实验内容,1. 动物细胞结构的观察,(1)人口腔粘膜细胞涂片标本的制备 吸取醋酸洋红或碘液,滴一滴在一干净载玻片中央,将消毒牙签粗的一端伸入口腔,在口腔颊内壁上轻轻刮取粘膜上皮细胞,将刮下的白色粘性物质放入载玻片上的染液内,分散均匀。染色5-10 min后,加盖盖玻片(细节)。,(2)观察 将制备好的装片标本置显微镜下观察: 先用低倍镜观察,可见人口腔粘膜上皮细胞呈扁圆形或扁平多边形。再寻找较分散、轮廓清晰的单个细胞,移至视野中央转高倍镜观察; 在高倍镜下观察的结构: 细胞膜,细胞核,细胞质。,2、植物细胞结构的观察,(1)临时装片的制作 取一干净载玻片,滴一滴碘液在玻片中央。用尖头镊子从洋葱肉质鳞片内表面撕下一小块膜质表皮,平铺在载玻片的碘液滴上,用镊子将其轻轻压入液滴中,使之展开,盖上盖玻片,用吸水纸吸去盖玻片周围多余的碘液。,洋葱鳞片表皮细胞临时装片标本的制备与观察。,(2)观察 将制备好的装片标本置显微镜下观察: 先用低倍镜观察,可见许多长柱状细胞排列整齐,彼此相连。选择其中一个较典型的细胞移至视野中央,再转高倍镜观察, 在高倍镜下可见细胞最外面为一层棕黄色较厚的结构,即细胞壁。细胞壁以内是着色较浅近于透明的细胞质,细胞质内有一个或几个或大或小的透明的液泡,在细胞中央或靠近细胞壁,有一个椭圆形细胞核,调节细调螺旋,可见核内有1-2个染成棕黄色,折光较强的核仁,细胞质外围有一薄层细胞质膜,但在光镜下不易分辨。,红辣椒表皮细胞的观察 (1)临时装片的制作 剪取一小片辣椒,用解剖刀切去肉质部分,然后用刀片轻刮,将肉质部分全部刮去,只剩下一层表皮。然后,用镊子将表皮放在载玻片上,加上一滴水,盖上盖玻片。 (2)观察 先在低倍镜下找到标本,然后按照上面的方法,逐渐增加放大倍数并调节粗、细调焦螺旋直到看到清晰的图像。观察细胞的形态,注意是否能看到胞间连丝。,体视显微镜又称实体显微镜或解剖镜。观察的是标本的表面,有很强的立体感。,实验报告,实验目的 实验材料 实验试剂和器械 实验内容(显微镜的使用和细胞结构的观察) 实验结果(绘制人口腔黏膜细胞和洋葱鳞片表皮细胞) 思考题,生物绘图注意事项,绘图时使用铅笔(HB) 在图的正下方表明图题 图注用直线引出标注结构的名称,并且注字最好在图的右侧或两侧排成竖行,上下尽可能对齐;引出的直线间不可交叉 画图时要线条流畅匀称 染色深浅不同的地方用点的疏密不同来表示,不可用阴影表示 图中的点要垂直点下去,不可拖尾,带勾,1、普通光
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