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文档简介
倒数第3天 基因工程,依纲静悟 回归双基,1957年,生物学家了解到,病毒感染的细胞能产生一种因子,这种因子能作用于其他细胞,干扰病毒的复制,故将其命名为干扰素;从1987年开始,用基因工程方法生产的干扰素进入了工业化生产,并且大量投放市场。 (1)若已知干扰素的氨基酸序列,则获取目的基因的较简单方法是_;目的基因还可以从_文库获取,而从cDNA文库中不一定能得到,原因是_ _。 (2)用限制酶处理质粒和目的基因后,用_酶处理,可形成基因表达载体,该载体的化学本质是_;基因表达载体除含有干扰素基因外,还必须有_、_和_等。,考前热身 启动思维,【热身练23】,(3)若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用_处理,使其成为_,并在一定温度作用下完成_。 (4)转基因技术是否成功,需要对受体细胞进行分子水平的检测,首先是检测受体细胞_上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用_。最后还要检测目的基因是否翻译成了相应的蛋白质,利用的技术是_。 解析 (1)若已知干扰素的氨基酸序列,则可以通过逆转录法获得目的基因;cDNA文库是部分基因文库,因为cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的,因此目的基因可以从基因组文库中获取。(2)用限制酶处理载体和目的基因后,将目的基因与载体连接,需要使用DNA连接酶处理,基因与载体的化学本质是相同的,都是DNA;干扰素基因是目的基因,此外,载体还要有启动子、终止子、标记基因等。(3)目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化。(4)检测目的基因使用DNA分子杂交技术;检测蛋白质采用的是抗原抗体杂交技术。,答案 (1)人工合成法 基因组 cDNA是由生物发育的某个时期的mRNA逆转录产生的(其他合理答案也可) (2)DNA连接 DNA 启动子 终止子 标记基因 (3)Ca2 感受态细胞 转化 (4)染色体DNA DNA分子杂交技术 抗原抗体杂交技术,质粒在基因工程中具有重要作用,请回答下列与质粒有关的知识。 .构建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。如图是天然土壤农杆菌Ti质粒的结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析回答问题。 (1)人工改造时用限制酶处理,其目的为:第一,去除质粒上的_(基因),保证TDNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;第二,使质粒带有单一限制酶作用位点,有利于_;第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。,【热身练24】,(2)(多选)质粒上的_基因被删除,不会影响到转基因微生物的性状 ( )。 A四环素抗性基因 B复制原点 C终止子 D卡那霉素和新霉素抗性基因 (3)若用限制酶分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的现象是_。 .如图是利用质粒作为载体,利用定点突变技术获取人们所需蛋白质的过程示意图。请据图回答问题。,(1)该图示过程体现了_(至少写出两项)等现代生物技术的综合运用。 (2)当前基因工程中扩增目的基因常用的方法是_,图中_(填写图中序号)过程即为此项应用。 (3)过程需使用的酶是_,它具有的重要特性是_。 解析 .(1)示意图中标注了天然土壤农杆菌Ti质粒部分基因及部分限制酶作用位点,若用限制酶处理,可以作用于tmr基因和tetr基因,结合问题上下文的含义可填写相关内容。(2)从选项上看,质粒上的标记基因被删除,不会影响到转基因微生物的性状表达。(3)若用限制酶切割改造过的理想质粒后,抗四环素基因会被破坏,故以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,在含卡那霉素的培养基上能够生长,而在含四环素的培养基上不能生长。,.(1)图示中对原基因进行了修改,从而获取人们所需蛋白质,属于蛋白质工程;重组质粒导入受体细胞,属于基因工程,受体细胞需进行培养才能产生人们所需要的蛋白质,细胞的培养属于细胞工程。(2)基因工程中扩增目的基因常用的方法是PCR技术,是原有DNA的退火过程,过程的产物是扩增的目的基因,所以过程利用的技术是PCR技术。(3)过程是PCR技术中DNA的复制过程,需使用的酶是具有热稳定性的DNA聚合酶,与普通DNA聚合酶相比,它具有的重要特性是最适温度高。 答案 .(1)tetr和tmr 目的基因(或外源DNA
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