缺氧实验.ppt

小白鼠实验性缺氧,武汉科技大学医学院病理生理学教研室 实验指导教师：刘亚昆,实验目的,复制低张性与血液性缺氧的动物模型。 观察低张性缺氧时，不同神经机能状态对机体缺氧耐受性的影响。 观察一氧化碳及亚硝酸盐中毒对机体的影响，并了解相关急救知识。 掌握缺氧的分类及不同类型缺氧的特征。,氧代谢四大环节： 外界氧气的含量与肺组织的摄取氧； 血液系统的携带氧； 循环系统的运输氧； 组织细胞的利用氧； 缺氧：由于组织氧的供应减少或对氧的利用障碍， 而引起机体代谢、功能和形态结构异常变化的病理过程。,理论基础,吸入气中氧分压降低 低张性缺氧 肺通气、换气功能障碍 静脉血分流入动脉 血液性缺氧 血红蛋白含量减少、供氧不足 血红蛋白结构、功能异常 循环性缺氧 全身循环功能障碍 局部循环功能障碍 线粒体功能受抑制用氧障碍 组织性缺氧 呼吸酶合成减少 线粒体损伤,缺氧的分类,缺氧时体征及血氧改变,呼吸运动的变化规律（频率、幅度、节律）； 循环系统的变化规律（心率、心肌收缩力、 心输出量）； 皮肤粘膜颜色的变化规律（紫绀、苍白等）； 存活时间的变化； 中枢神经系统的变化规律； 血氧变化。,血氧分压（PO2):溶解于血液的氧分子所产生的张力； 血氧容量（CO2max）:100ml血液中的血红蛋白，在氧分压为13.3kPa（100mmHg）,温度为38时，所能结合氧的最大毫升数； 血氧含量(CO2): 标准状态下，100ml血液中实际含有的氧量（毫升数）； 血氧饱和度(SO2) :Hb的氧饱和度，即Hb结合氧的百分数，约等于血氧含量和血氧容量的比值。,常用血氧指标,各种类型缺氧的血氧特点,实验动物与药品器材,成年小鼠，雌雄不拘； 钠石灰、甲酸、浓硫酸、5亚硝酸钠、1亚甲蓝、生理盐水 ； 密封广口瓶、一氧化碳发生装置、刻度吸管、1ml注射器及针头、酒精灯等。,观察指标,动物一般状况 呼吸频率和深度 存活时间 皮肤粘膜颜色改变,乏氧性缺氧 （1）选取体重相近的小鼠3只。 分别做 红（甲）、 蓝（乙）、 无（丙）标记 分别腹腔注射 1%咖啡因、 2%乌拉坦、生理盐水 （注射剂量：0.1ml/10g） （2）安静15分钟，放入广口瓶中（已加钠石灰少许） 观察记录小鼠 缺氧前呼吸次数、深度和粘膜颜色等指标 塞紧瓶塞，开始记录存活时间，并每 3min重复观察其他指标1次，如有其他变化，随时记录，直至动物死亡。 （3）动物死亡后立即检测耗氧量，并计算耗氧率： 耗氧率（R）=总耗氧量（A）/体重（W）/存活时间（T）,实验方法,血液性缺氧 1. 一氧化碳中毒性缺氧 CO与血红蛋白的亲和力O2与血红蛋白的亲和力,碳氧血红蛋白（HbCO）不能与O2结合，还可抑制红细胞的糖酵解，使2，3-DPG生成减少，氧离曲线左移，HbO2中的O2不易释放。 （1）准备一氧化碳发生装置 将1只小鼠放入广口瓶中，观察其正常表现后与一氧化碳发生装置连接 用刻度吸管取甲酸3 ml放于试管内，沿试管壁缓慢加入浓硫酸2 ml，塞紧瓶口（间断加热） 观察各项指标。 （2）当小白鼠出现中毒表现（痉挛、跌倒）时，立即关闭CO发生装置，迅速将小白鼠放入通风处进行抢救。待小白鼠恢复正常后，再重复上述实验步骤直至死亡，并记录存活时间。,实验方法,2. 亚硝酸钠中毒性缺氧 亚硝酸盐可使血红素中的二价铁氧化成三价铁，形成高铁血红蛋白，与羟基结合牢固，失去结合氧的能力。 选取体重相近的小鼠2只，观察正常指标 腹腔注射5亚硝酸钠0.3 ml 立即取其中 1只动物腹腔内注入l亚甲蓝溶液0.3 ml；另 1只立即注入生理盐水 0.3 ml 观察各项指标，比较2只小鼠的表现及死亡时间。,实验方法,注意事项,广口瓶一定要密闭。 进行亚硝酸钠中毒实验时，要事先用注射器准备好抢救药品，以便及时解毒。 亚甲兰勿污染环境。 浓硫酸是强腐蚀药品，加液时要小心。 给小鼠腹腔注射时，应稍靠左下腹，勿损伤肝脏，但也应避免将药液注入肠腔或膀胱。,实验动物和器材,实验动物,小白鼠,捉拿小鼠的方法,腹腔注射方法,（一）低张性缺氧动物实验 【基本体征】,注射乌拉坦的小白鼠对缺氧的耐受性最强。,注射咖啡因的小白鼠对缺氧的耐受性最差。,动物皮肤、黏膜出现明显的紫绀；,呼吸加深加快到变浅边慢，最后呼吸停止。,出现明显的烦躁不安，最终动物死亡。,Discuss and Analysis,动物所处的环境中空气氧消耗