课件：BV及BV联合产品介绍.pptVIP

细菌性阴道病检测（BV及BV四联)产品介绍,售 后 服 务 部,细菌性阴道病菌(BV)概况 BV常见检测方法 BV单管产品及操作介绍 BV四联产品及操作介绍 注意事项及常见问题分析,主要内容介绍绍,生育期健康女性的阴道内有大量正常寄生菌（包括需氧菌 及厌氧菌）、支原体等。 常见的需氧菌有：G+菌（即革兰氏染色阳性菌）：乳杆菌、棒状杆菌、肠球菌、表皮葡萄球菌、非溶血性链球菌；G菌：大肠埃希菌、加德纳菌、厌氧菌、消化球菌、消化链球菌、动弯杆菌等。 女性的阴道内最常见的是产H2O2的乳酸杆菌，约占正常阴道菌群90%，是保证阴道微生态平衡的主要有益菌。 健康妇女正常阴道微生物群中有少量厌氧菌生长，厌氧菌与需氧菌的比例为1:2-1:5,BV概况-阴道微生态介绍,随着年龄的推移，女性身体机能或免疫力的下降，阴道的“有益菌”就会逐步下降，在外界条件发生改变可能都会影响到阴道微生态系统的“菌群平衡”，使“有害菌”过度繁殖，从而引起各种妇科疾病感染。,BV概况-阴道微生态介绍,疾病英文：bacterial vaginosis 英文缩写： BV BV主要是由于阴道正常菌群的生态平衡发生紊乱，优势菌群乳酸杆菌减少或消失，而阴道加德纳菌、厌氧菌及支原体等微生物过度生长而引起的一种以阴道分泌物增多且伴有鱼腥样气味为特征的疾病。 影响阴道微生态平衡的因素 ：雌激素水平下降；月经周期；使用节育器；不洁净性交，性交过频；滥用抗生素；营养不良与全身性疾病；阴道冲洗等。,BV概况-疾病定义,BV 的 发 病 机 理 图 示,乳酸杆菌,数量减少,H2O2,阴道内源性感染,阴 道 菌 群 失 调,致病因素,各类阴道炎症,BV概况-发病机理,产乳酸,功能减退,加德纳菌/类杆菌等数量,患病率随种族及人群而异 一般人群: 10%30% STD诊所患者: 30%37% 美国每年估计有300万有症状病例和300万无症状者 国内报道的BV患病率： 健康妇女：6.9% 妇科门诊有异常阴道分泌物的患者：9.7% 性乱人群：36.7% 孕妇：10%-25%,BV概况-流行病学,BV潜在的危险性很大，但由于该病病症不明显，过去一直忽视了其危险性。 BV对孕妇及婴儿危害较大，可引起孕妇自然流产、早产、胎膜早破、羊膜绒毛炎、羊水感染、产后子宫内膜炎、产后切口感染、婴儿体重不足，新生儿感染等，故BV的检测对妇产科有着特殊的意义。 BV是造成盆腔炎、子宫内膜炎、输卵管炎、泌尿道感染等多种妇科疾病的危险因素。 因此对BV的诊断和准确治疗在临床上具有非常大的意义。,BV概况-临床诊断意义,白带常规镜检 革兰氏染色法 (常用) Amsel四项法 (少用) 多胺快速检测法 (常用) 唾液酸酶法 (常用) 多联检测法 (常用) 阴道加德纳菌检测(如PCR/培养法等) (少用) 脯氨酸氨基肽酶法(PIP) (少用),BV常见检测方法,【操作步骤】 ：加生理盐水于采样试管或玻片上，将采集样本的拭子洗脱 到试管滴加到玻片或直接涂片，40倍视野观察结果。 【检测项目】 pH值：4.4 阴道清洁度： 滴虫、真菌检查 ； 线索细胞：指细菌性阴道病（BV）患者有许多杆菌凝聚在阴道上皮细胞边缘，在悬滴涂片中见到阴道上皮细胞边缘呈颗粒状或点画状致使模糊不清者即为线索细胞。 线索细胞占磷状上皮细胞的20%以上为BV阳性。,BV常见检测方法-白带常规镜检,目前检测BV的“金标准”，由以下四项指标构成： 1）外观：阴道分泌物增多变稀如奶状 2）pH值：阴道分泌物pH4.5 3）胺试验（嗅试验）：阴道分泌物中加入10%的氢氧化钾溶 液,出现鱼腥味 4）线索细胞：分泌物镜检有线索细胞。若镜下线索细胞占阴 道复磷状上皮细胞的比例20%，则更具有诊断价值 凡4项中3项同时阳性，即可诊断BV阳性,BV常见检测方法-Amsel四项法,【 pH值测定】,Normal：pH3.0-4.4 Unnormal：pH4.5,BV常见检测方法-Amsel四项法,湿片法：在一载玻片上加一滴生理盐水，将阴道拭子分泌物与生理盐水混合成悬液，加上盖玻片后，在高倍（400倍）镜下检查。 结果：线索细胞为阴道鳞状上皮细胞表面覆盖着许多球杆菌（主要是加特纳菌，有时合并有厌氧菌），使细胞呈斑点状、颗粒状外观，细胞边缘模糊不清呈锯齿状。 意义：当线索细胞占全部上皮细胞的20%以上时一般认为BV阳性。,正常的上皮细胞,线索细胞,【线索细胞】,BV常见检测方法-Amsel四项法,感染细菌性阴道病时，阴道加特纳菌、类杆菌、普氏杆菌、动弯杆菌等相关细菌侵蚀阴道上皮细胞过程中产生的主要代谢物，氨基酸代谢生成胺（主要为丁二胺、戊二胺、三甲胺等挥发性胺），胺在阴道酸性环境下以盐的形式存在，加10%KOH置换出氨，以气体形式挥发，可以使溴甲酚紫试纸变紫色。,BV常见检测方法-多胺法,唾液酸酶：是BV致病因子之一，是由阴道加德纳菌、普雷沃菌、厌氧菌、游动弯曲杆菌产生的一种胞外酶，其活性与这些细菌的数量成正比。BV妇女阴道分泌物中的唾液酸酶活性明显高于正常妇女，正常妇女的阴道分泌物中含很少量的唾液酸酶或不含唾液酸酶。通过检测阴道分泌物中是否含有高出正常水平的唾液酸酶，可以诊断病人是否患有BV 原 理： 采用靛青反应方法（即利用唾液酸酶分解吲哚唾液酸苷盐产生的吲哚基在氧的作用下产生蓝色的靛青反应），检测过程中样品中的唾液酸酶与细菌唾液酸酶特异性显色底物溶液接触时，底物被水解，产生唾液酸和发色基团，发色基团进一步被空气中的O2氧化变成蓝色 。,BV常见检测方法-唾液酸酶法,多项指标综合检测，在对BV诊断的同时，也可以评价女性阴道微生态的状态，理论意义上更具有优势； 可能会成为BV诊断的主流方法，目前已逐渐获得很多省份的收费认可，全国范围已经逐渐开展，部分省份和地区已经相当成熟； BV多联检测目前包括三联检测（过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶），四联检测（pH值，过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶），甚至五联（过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶，脯氨酸氨肽酶，氨基葡萄糖苷酶);,BV常见检测方法-多项目联合检测法,多项指标综合检测，在对BV诊断的同时，也可以评价女性阴道微生态的状态，理论意义上更具有优势； 可能会成为BV诊断的主流方法，目前已逐渐获得很多省份的收费认可，全国范围已经逐渐开展，部分省份和地区已经相当成熟； BV多联检测目前包括三联检测（过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶），四联检测（pH值，过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶），甚至五联（过氧化氢，白细胞酯酶，唾液酸苷酶，脯氨酸氨肽酶，氨基葡萄糖苷酶);,BV常见检测方法-多项目联合检测法,BV单管产品及操作介绍,细菌性阴道病测定试剂盒（唾液酸酶法） -BV单管,2019/8/7,19,可编辑,BV单管产品及操作介绍,试剂盒主要组成部分 BV测试管 0.3ml/瓶*20瓶 含SNA特异性显色 底物 BV终止液 2.0ml/瓶*1瓶 含2.0mol/L H2SO4,检测原理 试剂主要含有细菌唾液酸酶特异性显色底物溶液。当试剂与样本中的唾液酸酶接触时，底物被水解，产生唾液酸和发色基团，发色基团进一步被空气中的O2氧化变成蓝色。,BV单管产品及操作介绍,操作步骤 （右图）：,结果判断： 溶液或拭子头变成蓝色，BV（+）不变色，BV(-)。,插入样本,37温育，20分钟,结果保留：可滴加终止液一滴，结果至少可保留48小时,【操作步骤】,BV单管产品及操作介绍,BV单管产品优势： 进口唾液酸酶原料： 灵敏度高、特异性好 操作简便： 采样式子直接插入测试管 无需其他步骤 配备专用加热器,BV单管加热器,BV四联产品及操作介绍,细菌性阴道病联合测定试剂盒（ 化学反应法） -BV四联,规格：20T 有效期：12个月 贮存条件：2-8 组分： A 唾液酸酶检测液 1.2ml/瓶1瓶 含唾液酸酶特异性显色底物的溶液 B 过氧化氢检测液 1.2ml/瓶1瓶 含过氧化氢特异性显色液 C 白细胞酯酶检测液 1.2ml/瓶1瓶 含白细胞特异性底物缓冲液 D 样本抽提液 10ml/瓶1瓶 抽提成分 E 反应板 20人份 包被有酶及特异性显色底物 F 样本抽提管 20套,BV四联产品及操作介绍,检测原理： 试剂主要由包被有白细胞酯酶特异性显色底物和过氧化物酶的反应板、白细胞酯酶检测液、过氧化氢检测液、唾液酸酶检测液和pH精密试纸组成。当试剂与样品中的唾液酸酶、过氧化氢、白细胞酯酶接触时，底物被水解，产生发色基团和新生态氧，发色基团进一步被空气中的氧或新生态氧氧化变成蓝色。在规定的反应时间后，立即读取试验的结果。如果唾液酸酶检测孔变成蓝色，BV（+）；不变色，BV（-）。过氧化氢检测孔变蓝色，表明阴道过氧化氢浓度处于正常范围，如不变色则表明过氧化氢浓度过低，提示阴道微生态失衡。白细胞酯酶检测孔变蓝色，表明阴道可能存在炎症。内渗型pH精密试纸检测分泌物酸碱度，对照比色卡判读pH值，正常pH值应小于或等于4.4。,BV四联产品及操作介绍,【操作步骤 】, pH值, 滴加样本 抽提液, 混匀,抽提液 6-8滴, 加反应液,BV四联产品及操作介绍,1、pH值：对照所附比色卡进行判读，正常阴道pH值4.4。 2、唾液酸酶项：检测孔颜色变蓝色或绿色，BV阳性；不变色，BV阴性。 3、过氧化氢项：检测孔不变色，过氧化氢浓度过低，提示阴道微生态失 衡，过氧化氢检测阳性；颜色变蓝色或绿色，过氧化氢 浓度处于正常水平，过氧化氢检测阴性。 阳性（+）提示阴道微生态失衡 4、白细胞酯酶项：检测孔颜色变蓝色或绿色 ，白细胞酯酶阳性；检测孔 不变色，白细胞酯酶阴性。 阳性（+）表明阴道可能存在炎症,结果判读及意义：,BV四联产品及操作介绍,1、pH值：对照所附比色卡进行判读，正常阴道pH值4.4。 2、唾液酸酶项：检测孔颜色变蓝色或绿色，BV阳性；不变色，BV阴性。 3、过氧化氢项：检测孔不变色，过氧化氢浓度过低，提示阴道微生态失 衡，过氧化氢检测阳性；颜色变蓝色或绿色，过氧化氢 浓度处于正常水平，过氧化氢检测阴性。 阳性（+）提示阴道微生态失衡 4、白细胞酯酶项：检测孔颜色变蓝色或绿色 ，白细胞酯酶阳性；检测孔 不变色，白细胞酯酶阴性。 阳性（+）表明阴道可能存在炎症,结果判读及意义：,BV四联产品及操作介绍,结果常见模式的临床意义（1）：,BV四联产品及操作介绍,结果常见模式的临床意义（2）：,BV四联产品及操作介绍,BV四联产品及操作介绍,BV四联产品优势： 最关键指标-唾液酸酶采用进口原料，敏感性,特异性最好 选择的底物稳定性好，检测结果不会受到本底干扰 干化学试剂常常出现底物在包被的材质上或在贮存过程中发 生分解变色，有一定程度的本底干扰。 结果易于观察,精准性好. 反应孔为“U”型孔，背景为白色，不受本底干扰, 显色结果颜色系统一致, 阴阳性结果显而易见。 独特的阴性对照孔设计 丽珠BV联合试剂独有的阴性对照孔的设计，也可以解决一些本身带有颜色的分泌物对反应结果观察的干扰。,BV四联产品及操作介绍,BV四联产品优势： pH值试纸选用内渗型精密试纸 pH值的检测试纸选用德国进口的“Merk”内渗型精密试纸，试纸对分泌物无干扰，不会对后续的检测产生影响，检测结果更 为准确可靠。 配备专用的加热（定时）设备 提供专用的产品结果报告软件,BV四联加热器,注意事项及常见问题分析,取样：所取样本质量是BV试剂检测结果是否准确的决定性因素，正确取材要把握以下几个环节。 1、一般要求，取材之前24小时内，应无性交、无盆浴或阴道冲洗；在48小时内未使用阴道润滑剂或阴道“兴奋剂”等化学物质。 2、取材部位要准确：用无菌棉拭子收集女性阴道壁或阴道后穹隆部位尽可能多的分泌物标本。此外，为提高阳性率，还可采用重复两次取材或两个部位的标本混合后检验的方法。 3、标本量要充足，一是要尽量使用大一些的棉签取样，此外，要将棉签在取材部位旋转并停留20秒钟以上，以便吸取更多的标本。抽提样本时，请反复搅动挤压棉拭子，以便将棉拭子上的标本尽可能多的洗脱到抽提液中。 4、标本要正确保存、及时检验。试剂盒所检测物质为生物活性类物质，此类物质较容易降解、失活，请在取完标本后及时（立即）送检，以避免检测结果不准确。,注意事项及常见问题分析,操作过程中注意事项：。 1、检测液及所需数量的反应板，使用前平衡至室温。 2、抽提样本时，要反复搅动挤压棉拭子，以便将棉拭子上的标本尽可能多的洗脱到抽提液中。 3、如果标本为血、脓性等本身带有颜色的分泌物，判读结果时请与阴性对照孔进行比较，以判断是否有颜色变化。避免经期样本的检测。 4、使用水浴恒温箱加热时，要防止水滴掉入检测孔造成污染。 5、反应板上包被的活性物质在潮湿的空气中易发生变化，因此，反应板包装袋开封后请立即使用。 6、部分样本的检测物含量很高，大量水解底物，可能造成沉淀，属正常现象。 7、拆开反应板包装后，如发现孔内变蓝色时应放弃使用。,注意事项及常见问题分析,常见问题及分析：。 1、阳性率低： * 如