课件：臭氧治疗椎间盘突出动物实验.ppt

臭氧治疗椎间盘突出症相关实验研究,颈腰椎间盘突出症是常见病。 临床上表现 颈椎间盘突出：颈项痛、一侧上肢疼痛和麻木感 腰椎间盘突出：腰腿痛，以坐骨神经疼痛、麻木 为主,椎间盘突出症状和体征的机制 机械压迫学说或神经牵拉学说 治疗上摘除突出椎间盘，如传统的外科手术治疗、椎间 盘切（抽）吸术、化学（激光）溶核术等,椎间盘突出症状和体征的机制 化学性或和免疫性炎症学说 治疗上需要抗炎，传统方法如摘除突出椎间盘或使椎间 盘内压降低回缩无法完全消除症状和体征,椎间盘突出症状和体征的机制 目前的研究认为椎间盘突出症以上两种情况均同时存 在，其中引起炎症的炎症介质是引起疼痛的根本原因， 而感觉和运动异常才是机械性压迫所致,椎间盘突出症状和体征的机制 侯树勋等人发现大鼠自身髓核组织可见导致神经根周围 产生肉芽组织及大量炎性细胞，毗邻神经根出现空泡变 性。大鼠术侧受影响肢体机械痛觉敏感性升高,唐家广. 中国脊柱脊髓杂志, 2004,141: 64,椎间盘突出症状和体征的机制 Olmarker等人以猪为实验对象得到同样的结果。且证 明TNF是触发和维持椎间盘突出局部炎症反应和神经 根炎症的关键物质。其他IL-1和IFN亦有同样的作 用，只是较弱,Olmarker K, et al. Spine, 1996, 21: 411,椎间盘突出症状和体征的机制 近年来的研究发现，突出的椎间盘细胞可合成和分泌 多种炎症介质，如TNF、 IL-1、 IL-6、磷酯酶A2、前 列腺素2等，并通过前列腺素2产生致痛作用,Takahashi N, et al. Spine, 2006, 31: 523 Ozaktay AC, et al. Eur Spine J, 2006,椎间盘突出症状和体征的机制 Satoh等发现椎间盘突出髓核组织内有抗原抗体复合物沉 积，正常髓核组织中则没有 Pennington等证实正常狗髓核中存在IgG，一旦髓核突出 或漏出纤维环之外则可激活补体级联反应引起炎症,Satoh K, et al. Spine, 1999, 24: 1980 Pennington JB, et al. Spine, 1988, 13: 909,因此，治疗椎间盘突出应包括两方面： 解除突出椎间盘对神经根的压迫和/或牵拉 消除神经根周围的炎症,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 俞志坚等以犬为实验对象 椎间盘内注射医用纯氧、6、30、50ug/ml臭氧， 1个月及 2个月后取髓核标本，大体标本、光镜及电镜下与正常 椎间盘髓核对照,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 结果显示注入医用纯氧的髓核与正常髓核相似，注入30 及50ug/ml臭氧的髓核则明显变化，肉眼观明显甚至完全 萎缩，光镜及电镜下髓核细胞大量死亡，纤维组织增 生，注入6 ug/ml臭氧的髓核改变则较轻微,臭氧治疗椎间盘突出的有效性,臭氧治疗椎间盘突出的有效性,2019/8/7,15,可编辑,臭氧治疗椎间盘突出的有效性,臭氧治疗椎间盘突出的有效性,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 Iliakis等以新西兰兔为实验对象, 椎间盘内给予6ug/ml、 27.5ug/ml及70ug/ml三种浓度的臭氧 田锦林等以小型猪为实验对象，椎间盘给予30g/ml、 60g/ml和90g/ml浓度的臭氧 尹常宝等以新西兰兔为实验对象，椎间盘内注入 10g/ml、30g/ml、50g/ml、80g/ml浓度的臭氧 三实验均取得与俞志坚等实验几乎一致的结果，并发现臭 氧浓度过高时，对邻近组织结构（如终板）的损伤也较大,Iliakis E, et al. Rivista di Neuroradiologia, 2001, 14(S): 23 田锦林, 等. 中国介入影像与治疗学, 2007, 4: 304 尹常宝, 等. 中国疼痛医学杂志, 2007, 13: 217,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 Iliakis等将浓度30ug/ml和55ug/ml的臭氧1ml注入新西兰兔 棘突旁肌肉组织内，ELISA检查显示30g/ml臭氧致注 射区域可观察到TNF-含量持续性升高，20小时后仍维 持较高含量；IL-1含量亦呈持续性升高，20小时后含 量更高；而IFN-则表现为持续降低。50g/ml臭氧时 则使局部TNF-含量没有明显变化，而IL-1及IFN-含 量明显降低,Iliakis E, et al. Rivista di Neuroradiologia, 2001, 14(S): 23,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 Valacchi G等实验显示臭氧（浓度为20ug/ml、40ug/ml、 80ug/ml）可以引起青年成人血小板释放血小板生长因子（PDGF）、转移生长因子1（TGF-1）和IL-8 Eiko K等实验发现1ppm臭氧暴露3天可使Wistar系小鼠支气 管肺泡灌洗液内IFN-和NO的产生受到抑制 Giuseppe V等发现臭氧及其水化产物H2O2能够刺激脐静脉 上皮细胞释放NO及IL-8,Valacchi G, et al. Mediat Inflamm, 1999, 8: 205 Eiko K, et al. J Leuk Bio, 1999, 66: 76 Giuseppe V, et al. Mediat Inflamm, 2000, 9: 271,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 Bocci V等用25、50、75、100g/ml四种浓度的臭氧 与正常人血液标本混合后测定致炎因子IL-1、IL-2、 IL-12、IFN-及TNF-和抗炎因子IL-10、TGF-1的 水平。发现在75、100g/ml浓度时细胞因子的产生被 抑制，在25、50g/ml臭氧浓度时除IL-12因子外，其 他所有因子，包括致炎因子和抗炎因子均出现升高，没 有出现哪一方占优势的情况,Bocci V. Oxygen-Ozone Therapy, 2002, 141,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 由上面的实验结果来看，臭氧对炎症相关细胞因子（包 括致炎因子和抗炎因子）的合成和分泌有何影响尚不 确切。情况比较紊乱。但有一点是明确的，那就是臭 氧的确能影响细胞因子的产生。在临床工作中，我们 的确可观察到臭氧的抗炎效应,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 获得臭氧抗炎效应的条件是什么？ 臭氧浓度 臭氧的给予方式 组织微环境 局部炎症环境 机体免疫状态,臭氧治疗椎间盘突出的有效性 臭氧能引起髓核组织的失水萎缩，必须达到一定浓 度，如30或50ug/ml才能有明显的效果，但浓度过高 时，将明显损伤周围组织 臭氧的确能影响致炎因子和抗炎因子的释放，但并 不呈现抑制致炎因子释放，促进抗炎因子释放的理 想模式 。但临床过程显示臭氧的抗炎作用，因此臭 氧对与炎症相关的细胞因子的影响比我们想像的情 况可能要复杂得多，有待于更深一步的研究,臭氧治疗椎间盘突出的安全性 俞志坚等将臭氧注入犬椎旁间隙，动物处死后，HE染色 光镜下观察：注射30ug/ml组和50ug/ml臭氧组绝大部 分终板标本术后1周呈水肿样改变，并在1个月和2个月 时表现为轻中度增厚。个别腰大肌标本显示少量肌 纤维轻度萎缩。神经根和脊髓则无明显病理变化。注 射医用纯氧组及6g/ml组各标本均未显示明显异常改 变,臭氧治疗椎间盘突出的安全性 田锦林等以小型猪为实验对象，发现浓度为90ug/ml浓 度和60ug/ml浓度可致终板及椎旁肌肉损伤 在蛛网膜下注射10ml浓度为90g/ml的高浓度臭氧 后，术前、术后30分钟、1周、1个月及3个月各时间点 脑脊液常规及生化检查均未见异常变化，脊膜囊、脊 髓及神经根外观无肉眼及影像学可见异常，光镜下脊 髓、蛛网膜及软脊膜亦无异常发现,田锦林, 等.中国介入影像与治疗学, 2007, 4: 304 Tian JL, et al. AJNR, 2007, 28: 1051,臭氧治疗椎间盘突出的安全性 张维、傅志俭等在新西兰兔蛛网膜下腔注射医用纯氧、浓度为30、50、80ug/ml的臭氧各2ml，结果显示蛛网膜下腔注射三种浓度臭氧并不影响兔行为学；与空白对照组比较， 注射臭氧后1、2、4小时脑脊液中： SOD活性：纯氧和各臭氧组脑脊液中在各测定时点均升高 MDA浓度：纯氧组和30ug/ml、50ug/ml臭氧组在注射后4小时降低，80ug/ml组在注射后1、2小时升高 SOD/MDA：纯氧组和30ug/ml、50ug/ml臭氧组在注射后各时点升高，80ug/ml组在注射后1、2小时降低 超微结构检查显示大脑皮层及脊髓出现轻度损伤，且随臭氧浓度增加而加重,张维, 等. 中华麻醉学杂志, 2006, 26: 552 傅志俭, 等.中华麻醉学杂志, 2007, 27: 703,臭氧治疗椎间盘突出的安全