微生物源防腐剂ε聚赖氨酸的研究进展.pdf

微生物源防腐剂一聚赖氨酸的研究进展 杨旭艳，王爱敏，胡国华 ( 上海师范大学食品添加剂和配料研究所，上海2 0 0 2 3 4 ) 摘要：8 一聚赖氨酸( 8 一p o l y L l y s i n e ，8 一P L ) 是通过白色链霉菌( S t r e p w m y c e sa l b u l u s ) 发酵产生 的一种由赖氨酸单体在O t 一羟基和e 一氨基之间形成酰胺键连接而成的均聚氨基酸。作为生物防腐剂，8 一聚 赖氨酸具有抗菌谱广，稳定性高的特点，在中性和微酸性环境中对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、 霉菌均有一定的抑菌效果，而且其对耐热性芽孢杆菌和一些病毒也有抑制作用。此外，聚赖氨酸还具有水溶 性高、可直接食用、可生物降解、对人和环境安全无毒等特点。因而在过去几年内聚赖氨酸及其衍生物作为 食品防腐剂、乳化剂、食疗剂、生物降解纤维、高吸水凝胶、药物载体、抗癌药物增强剂、生物芯片等在食 品、医药、环境、电子方面得到了广泛应用。本文综述了e 一聚赖氨酸的结构、性质、抑菌机理、发酵生产 及其潜在应用。 关键词：防腐剂；8 一聚赖氨酸；抑菌机理；发酵生产；应用 S t u d yp r o g r e s so nb i o l o g i c a lp r e s e r v a t i v eE P o l y l y s i n e Y A N GX u - y a n ，W A N GA i - r a i n ，H UG u o h u a ( I n s t i t u t eo fF o o dA d d i t i v e s I n g r e d i e n t s S h a n g h a iN o r m a l U n i v e r s i t y ，S h a n g h a i2 0 0 2 3 4 ) A b s t r a c t ：E p s i l o n p o l y L l y s i n e ( e P L ) ，w h i c hi sn O Wi n d u s t r i a l l yp r o d u c e db YS t r e p t o m y c e sa l b u l u s ，i sa h o - 1 1 1 0 p o l ya m i n oa c i dp o l y m e r i z e db yt h ea m i d eb o n db e t w 咖d c a r b o x y la n de a m i n og r o u p s A sak i n do fp r e s e r v a l i v e 8 一P Ls h o w sa w i d er a n g eo fa n t i m i c r o b i a la c t i v i t ya n dh i g hs t a b i l i t y 8 一P Li san a t u r a l l yo c c u r r i n gb i o m a t e r i a l t h a ti sw a t e rs o l u b l e ，b i o d e g r a d a b l e ，e d i b l ea n dn o n t o x i ct o w a r dh u m a n sa n dt h ee n v i r o n m e n t ；t h u s ，i ta n di t sd e - r i v a t i v e sh a v eb e e no fi n t e r e s ti nt h ep a s tf e wy e a r sf o rab r o a dr a n g eo fi n d u s t r i a la p p l i c a t i o ms u c ha sf o o d ，m e d i c i n e ， e n v i r o n m e n ta n de l e c t r o n i c s 8 一P La n di t sd e r i v a t i v e so f f e raw i d er a n g eo fu n i q u ea p p l i c a t i o n ss u c h 曲f o o dp r e s e r v a - f i v e s ，e m u l s i f y i n ga g e n t ，d i e t a r ya g e n t ，b i o d e g r a d a b l ef i b e r s ，l l i g I l l yw a t e ra b s o r b a b l eh y d r o g e h ，d n l gc a r r i e r s ，a n t i - c 4 l n e e ra g e n te n l m n c e r ，b i o c h i pc o a t i n g s T h i sr e v i e wa r t i c l ed e a l sw i t ht h es t r u c t u r e s ，p r o p e r t i e s ，a n t i m i e m b i a lm e e h a n i s m s ，m i c r o b i a ls y n t h e s i s ，a n dp o t e n t i a l 印p l i c a t i o n so fp o l y g l y s i n e K e yw o r d s ：P r e s e r v a t i v e ；8 一p o l y l y s i n e ；a n t i m i c r o b i a lm e c h a n i s m s ；m i c r o b i a ls y n t h e s i s ；p o t e n t i a la p p l i c a t i o n a 2 l 世纪是追求“绿色”的世纪，追求“健 康”的世纪，食品安全越来越成为人们关注的焦 点。目前，在食品添加剂市场上使用的防腐剂种 类很多，但很大一部分是人工合成防腐剂，如山 梨酸钾、苯甲酸钠等。如果超剂量滥用对人体可 能会有一定的毒副作用。因此，开发绿色、安 全、高效的生物防腐剂尤其是微生物源防腐剂成 为增加市场竞争力，提高经济效益，提高人民生 活质量的重要举措。微生物源防腐剂聚赖氨酸就 是其中的重要代表之一。 作者简介：扬旭艳( 1 9 8 7 一) ，女，研究方向为食品添加剂和配料。 通讯作者 1 一聚赖氨酸的结构 聚赖氨酸的化学合成是在1 9 4 7 年首先完成 的。化学法合成的聚赖氨酸为d 型，其赖氨酸残 基之间的酰胺键是由d 一氨基和仅一羧基缩合而 成。1 9 7 7 年日本学者从放线菌培养过滤液中提取 出一种含有2 5 3 0 个赖氨酸残基的同型单体聚 合物。这种赖氨酸聚合物是由L 一赖氨酸的8 一 氨基与另一L 一赖氨酸的O t 一羧基通过8 一酰胺键 连接而成的多肽，故称为8 一聚赖氨酸( 8 一 P L ) 引。 H 一 N H c H 2 c H 2 c H 2 c H 2 一c H c O 。O H N H 2 e P L H 一 N H c H c 0 。0 H C H 2 - - - C H 2 C H 2 C H 2 一N H 2 ( I t P L 2 一聚赖氨酸的性质 2 1 一聚赖氨酸的理化性质 2 1 1 稳定性 8 一P L 纯品为淡黄色粉末，略带苦味、吸湿 性强、略有苦味、溶于水，微溶于乙醇，但不溶 于乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂口J 。聚赖氨酸具有 很高的稳定性。赵娟等H 1 研究发现，聚赖氨酸在 1 2 1 0 C 处理6 0 r a i n 仍具有优良的热稳定性；在p H 4 0 7 5 时一P L 相对抑菌活性高于9 5 ，但 在p H8 0 9 0 时其相对抑菌活性下降约1 5 ； N a + 、N H 4 + 、M 9 2 。对8 一P L 的相对抑菌活性无影 响；而A g + 、F e 2 + 、C u 2 + 浓度大于0 8 m o l L 时， 这些盐离子对供试菌的毒害作用显著于8 一P L 的 抑菌作用8 一P L 适宜的贮存条件是避光、低温， 其稳定率大于9 7 。因此，多聚赖氨酸能够承受 一般食品加工过程中的热处理，可以随原料一同 进行灭菌处理，防止二次污染。 2 1 2 最适p H 值 8 一P L 抑菌的最适p H5 8 ，也就是说其在 中性和微酸性环境中有较强的抑菌性，而在酸性 和碱性条件下，抑菌效果不太理想。这可能由于 聚赖氨酸作为赖氨酸的聚合物，在酸性和碱性条 件下易分解造成的。 2 2 聚赖氨酸的生物学性质 聚赖氨酸是一种具有抑菌功效的多肽，具有 以下特点；( 1 ) 安全性高，F u k u t o m e 【5o 等进行的 慢性毒性和致癌性联合试验表明，每日摄取食物 的8 一P L 含量在6 5 0 0 1 x g g ，属于极安全的水平； 在2 0 0 0 0 斗g g ，无明显的组织病理变化，也观察 不到可能的致癌性。2 0 0 3 年H i r a k iJ o 等用1 4 C 标 志的8 一P L 进行A D M E 试验( 动物的吸收性、分 布性、代谢性和排泄性试验) 也表明8 一P L 的安 全性。( 2 ) 抑菌谱广，在中性和微酸性环境中对 革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均 有一定的抑菌效果，而且其对耐热性芽孢杆菌和 一些病毒也有抑制作用 7 1 。但对酵母菌、霉菌的 抑菌浓度要求高，为1 2 8 t r g m L 2 5 6 1 t g m L 。单 独使用多聚赖氨酸对枯草芽孢杆菌、黑曲霉抑制 不明显，采用多聚赖氨酸与醋酸复合作用对枯草 芽孢杆菌等耐热性较强的芽孢菌抑制增强。9 3 聚赖氨酸的抑菌机理 传统研究认为，防腐剂的作用机理主要表现 在如下三个方面：( 1 ) 作用于细胞壁和细胞膜系 统，引起细胞的物质、能量和信息传递中断； ( 2 ) 作用于遗传物质或遗传微粒结构，使遗传性 状发生改变；( 3 ) 作用于关键酶或功能蛋白，使 代谢过程受阻。 1 9 8 3 年，V a a r aM 等训发现聚阳离子能破 坏G 一细菌的外膜，并进一步杀死这些细菌。 1 9 9 2 年V a a r aM 1 进一步发现，聚赖氨酸是通 过吸附到G 一细菌的外膜上，释放出大量的脂多 糖，破坏细菌外膜，而起到抑菌作用。 S h i m aS 。S a k aH 等 1 2 1 研究发现，防腐剂 主要抑制微生物的呼吸作用，导致能量物质A T P 和还原物质N A D H 亏缺，所有合成代谢受阻，活 性的动态膜结构不能维持，代谢方向趋于水解， 最后产生细胞自溶。 S h i m aS 【l 列等对聚赖氨酸的进一步研究发现 聚赖氨酸必须含有1 0 个以上赖氨酸残基才具有抑 菌活性，对氨基的化学修饰会降低其抑菌能力。 8 一聚赖氨酸通过与细胞膜作用影响微生物细胞 的呼吸，与胞内的核糖体结合影响生物大分子的 合成。 刘蔚等通过细胞损伤实验，研究8 一聚赖 氨酸对细菌的抑菌机理。结果表明：当一聚赖 氨酸作用于菌体细胞后，逐渐破坏细胞结构，最 终导致细胞死亡，从而起到抑菌作用。 4 聚赖氨酸的生产 4 1 菌种的筛选 研究发现，大多数8 一P L 产生菌集中在链霉 菌科几个不同的属和麦角真菌这2 类微生物上， 且不同菌株的产物其赖氨酸单体数也有所不 同引。因此利用理化因素对链霉菌进行诱变，从 中筛选出有利突变是常用的提高聚赖氨酸产量的 方法。 据文献报道一聚赖氨酸的合成可能途经赖 氨酸代谢支路，最后经聚合酶作用生成引。在赖 氨酸代谢通路中，存在终产物赖氨酸的反馈抑 制，因此选用赖氨酸的结构类似物S 一( 2 一氨乙 基) 一L 一半胱氨酸( A E C ) 作为抗性筛选标记 可以消除赖氨酸的反馈抑制，抗性物质甘氨酸可 以代替D 一丙氨酸掺人细胞壁，破坏肽聚糖间的 交联，影响细胞壁的通透性6 l 。诱变选育了S 一 ( 2 一氨基乙基) 一L 一半胱氨酸和甘氨酸抗性突 变株，发现突变株中9 9 表现高产。在3 L 小型 发酵罐中，8 一聚赖氨酸产量为2 0 9 L ，相对于葡 萄糖消耗的产物得率为8 9 ，而野生型菌株的8 一聚赖氨酸产量仅为5 7 9 L 。 随着对一聚赖氨酸合成机理研究的深入和 合成酶基因的定位、克隆和表达，科研人员将采 用基因工程手段，构建基因工程菌应用于8 一聚 赖氨酸的生产。 H i r o s h iT a k a g i 【1 7 等在一聚赖氨酸产生菌白 色链霉菌I F 0 1 4 1 4 7 中发现了一种高分子量 ( 3 7 k b ) 隐蔽性质粒p N 0 3 3 。杨千红等对白色链 霉菌B 一2 1 5 进行质粒消除实验，结果表明：质 粒消除后的白色链霉菌B 一2 1 5 的发酵液没有抑 菌效果，且发酵液中不产生8 一聚赖氨酸。由此 认为，一聚赖氨酸的生物合成与其产生菌的质 粒有关引。以p N 0 3 3 为载体，进行了白色链霉 菌I F 0 1 4 1 4 7 内酰胺酶基因的克隆与分析。结果显 示，内酰胺酶的产生由氨苄青霉素诱导，内酰胺 酶是由b l a L 同源基因编码。B 一内酰胺酶基因可 用作白色链霉菌I F 0 1 4 1 4 7 克隆载体的标记基因。 4 2 发酵生产 目前工业上一般采用白色链霉菌( S t r e p t o m y c e s a l b u l u s ) 作为发酵生产菌株，用合成培养基 进行发酵生产，所以发酵的培养基成分，温度， P h 对聚赖氨酸的产量影响很大。 最初用野生的S a l b u l u s 3 4 6 进行发酵的研究 中，一P L 在最优化的培养基中的积累浓度是 0 5 9 L ( 1 9 】。 K a h a r 等1 论证了利用S a l b u l u s 4 1 0 生产一 P L 中严格控制p H 和葡萄糖浓度的重要性。在8 一P L 发酵生产中，培养基的p H 通常会从最初的 6 8 降到3 6 h 后的4 2 ，然后9 6 h 内逐渐降到3 2 。 在p H 低于4 2 后，8 一P L 开始逐渐在培养基中积 累，所以在一P L 的生产中严格控制p H 是有必 要的。p H 的控制分2 个阶段，第1 阶段为菌体的 生长阶段，p H 大于5 0 ( 培养过程p H 自然下降， 当低于5 O 时，用氨水调节) ；第2 阶段为产物积 累阶段，p H 控制在4 0 。在发酵过程中，发酵液 的葡萄糖浓度控制在1 0 9 L ，当葡萄糖浓度低于 1 0 9 L 时，流加碳源和氮源( 含有8 0 葡萄糖和 8 硫酸铵的培养基) ，使葡萄糖浓度维持1 0 9 L ( 一般在4 8 h 后) ，经过4 7 d 的发酵，8 一P L 的 产率最高达4 8 3 9 L 。 姜俊云等旧采用5 L 自控式发酵罐研究了 一P L 分批发酵过程中搅拌转速和p H 对发酵指标 以及菌体细胞形态的影响。发现提高搅拌速率对 菌体生长和一P L 的合成有显著的促进作用；但 当搅拌转速达到4 0 0 r r a i n 以上时，由于剪切力过 大导致细胞死亡，8 一P L 产量下降。当p H 维持 在5 以上，有利于菌体生长；p H4 0 左右可促进 8 一P L 的合成。搅拌转速3 5 0 r r a i n 和控制p H4 0 时可获得最大的8 一P L 产量2 9 5 9 L ，菌体量 9 3 3 9 L ；此时产物一P L 对葡萄糖的得率和对 细胞干重的比生成速率分别为0 0 6 2 和0 0 0 6 I g ( g h ) 。通过对比不同发酵条件下菌丝体的形态 变化，发现当菌丝球比较均匀、形态无较大差 别、具有致密程度相当的核心时，有利于e P L 形成。 朱宏阳等刮利用产一P L 的菌株K i t a s a t o s p o - r a s p P I _ 6 3 进行发酵，当搅拌转速为3 5 0 r r a i n ， 控制p H4 0 并采用初始糖质量分数为3 及补糖 时可获得最大的8 一P L 产量6 6 5 9 L ，菌体量为 6 9 4 9 L 。 黄国昌等旧】在5 0 L 自控式发酵罐上进行8 一 聚赖氨酸发酵条件优化研究，结果表明，当控制 p H 在5 0 以上时有利于菌体的生长，但8 一聚赖 氨酸基本不合成，甚至出现降解现象；当p H 维 持在4 0 左右时，能促进8 一聚赖氨酸的合成。 搅拌转速为3 0 0 r m i n 时，有利于溶氧和传质， 4 0 0 r m i n 时，由于剪切力过大，导致菌丝断裂， 一P L 产量下降。通过控制发酵中后期p H 4 0 和 搅拌转速3 0 0 r r a i n 的p H 反馈控制自动流加补料 培养，可获得最大的8 一P L 产量7 3 6 9 L ，产率 0 0 7 2 9 g ，产量较优化前提高近1 0 倍，产率提高 2 倍。但与国外相比，国内的产量还有一定差距。 5 聚赖氨酸的应用 5 1 食品防腐剂 基于毒理学上的研究，聚赖氨酸在日本已经 作为多种食品的防腐剂广泛使用。比如，日本学 者腾井正弘在米饭中添加0 4 0 6 8 一聚赖 氨酸一醋酸制剂研究对米饭的防腐作用结果显 示：3 0 培养4 8 h 后，添加s 一聚赖氨酸防腐剂 的样品中细菌总数为6 0 1 0 3 个g ，而空白样中 细菌总数为3 6 1 0 8 个g ，表明一聚赖氨酸一 醋酸制剂有明显的抑菌作用旧3 | 。 在国内，对聚赖氨酸的应用处于实验室研究 阶段。徐红华等1 通过饱和试验设计研究了一 聚赖氨酸和甘氨酸对牛奶保鲜作用，结果表明单 独使用8 一聚赖氨酸和甘氨酸，其抑菌能力明显 低于二者混合使用的效果。混合使用时其增效随 二者用量的增加而增加；但当8 一聚赖氨酸用量 过高时，这种增效作用会有所减弱。其中添加 4 2 0 m g L 1 8 一聚赖氨酸和2 的甘氨酸抑菌效 果最佳。程涛等1 对聚赖氨酸在食醋防腐中的应 用进行试验研究，包括聚赖氨酸在食醋防腐中的 最大用量、最适用量、聚赖氨酸制剂及其复合防 腐剂。试验结果表明：在食醋中单独使用聚赖氨 酸效果不明显，当添加聚赖氨酸3 0 m g k g 、E D T A 3 0 m g k g 、山梨酸钾0 4 9 k g 、纳他霉素3 0 m g k g 作为复合防腐剂时，抑菌率达9 6 P A 上，能有 效延长食醋保质期。吕志良等1 以新鲜玉米为原 料，研制成保鲜期可达3 0 d 以上的玉米汁饮料。 研究表明：玉米汁饮料中8 一聚赖氨酸的最适添 加量为3 0 p p m ；复合稳定剂最佳配比为蔗糖脂肪 酸酯0 1 、卡拉胶O 1 、羧甲基纤维素钠 0 2 。 5 2 乳化剂 虽然8 一聚赖氨酸被视为一种天然的防腐剂， 但H i r a k i 旧刊通过研究发现，当一聚赖氨酸应用 到食品加工过程中会与蛋白质和酸性多糖互相作 用，从而导致抗菌活性的降低甚至丢失。并且8 一聚赖氨酸的乳化能力又较弱，因此限制了其在 淀粉类食品中的应用。 2 0 0 0 年Y u T i n gH o 等人m 1 通过美拉德反应 使8 一聚赖氨酸与葡聚糖结合，改善了8 一P L 的 乳化活性，s P L 葡聚糖复合物比其他商品乳化 剂具有更强的乳化作用，在N a C I 浓度为1 0 m o l L 的高浓度条件下及碱性环境中，复合物的乳化 活性均不受影响；并且，该复合物仍然拥有8 一 P L 的绝大多数抑菌活性。因此。一P L 一葡聚糖 复合物叮在加工食品中作为具有乳化和防腐双功 能作用的食品添加剂使用。 5 3 食疗剂 Y K i t o 报道了关于脂肪酶抑制剂活性特征 及8 一P L 对饭后甘油三脂的抑制作用，指出8 一 P L 能够作用于含有胆盐和磷酸胆碱的乳剂并使其 分解，从而抑制脂肪酶活性【2 9J 。可见，8 一P L 能 够制止小肠对饮食过程中脂肪的吸收，是一种良 好的食疗剂。 5 4 医药 8 一聚赖氨酸富含阳离子，与带有阴离子的 物质有强的静电作用力并且对生物膜有良好的穿 透力，因此多聚赖氨酸可用于某些药物的载体， 在医疗和制药方面得到了广泛的应用。 解放军总医院基础所的科研科研人员用海藻 酸钠一聚赖氨酸一海藻酸钠( A P A ) 微囊化牛嗜 铬细胞后( B C C ) 注入脊髓蛛网膜下，其对慢性 疼痛有镇痛作用，而且这种A P A 膜具有良好的免 疫隔离作用闭J 。 刘彦春等发现以8 一P L 包埋的支架对软骨细 胞的吸附力明显增强，且细胞分泌基质增多，表 明一P L 不但对细胞有良好的吸附，还有促进细 胞发挥正常功能的作用旧1 J 。 C 生h i n 星aF 醚o o d 删A d d i t i v e s 皇笙叁些， = ：= 竺：= ： 6 展望 聚赖氨酸具有水溶性好、可直接食用、可生 物降解、对人和环境安全无毒等特点，因而在过 去几年内聚赖氨酸及其衍生物作为食品防腐剂、 乳化剂、生物降解纤维、高吸水凝胶、药物载 体、生物芯片等得到了广泛应用。迄今为止，在 日本年产千吨一聚赖氨酸的现代化工业装置已 建成投产，一聚赖氨酸的微生物发酵已实现工 业化。美国F D A 也已于2 0 0 3 年1 0 月批准8 一聚 赖氨酸为安全食品保鲜剂。但该技术在国内总体 还处于实验室及中试阶段，因此，必需应用高新 技术手段加快对一聚赖氨酸的研究，寻求大规 模生产一聚赖氨酸的发酵条件，实现8 一聚赖氨 酸的工业化生产，以适应食品市场的需求。此 外，深入对8 一聚赖氨酸和其它防腐剂的复配使 用研究，可能会得到更好的抑菌效果，应用范围 也将更为广泛。 参考文献： 1 贾士儒生物防腐荆一8 一聚赖氨酸研究进展【】 发酵科 技通讯，2 0 0 5 。3 4 ( 3 ) ：2 2 2 5 2 S h i m aS ，S a k a iH P o l y l y s i n ep r o d u c e db yS t r e p t o m y e e s J A g r i c u l t u r eB i o c h e m i s t r y ，1 9 7 7 ，4 1 ( 9 ) ：1 8 0 7 1 8 0 9 3 S h i m aS 。H i r o y o s h iM A n t i m i e m b i a la c t i o no f8 一p o l y L l y - s i n e J T h eJ o u r n a lo fA n t i b i o t i c s ，1 9 8 4 ，11 ：1 4 4 9 1 4 5 5 4 赵娟，贾士儒，谭之磊，等生物防腐荆e 一聚赖氨酸的稳 定性 J 天津科技大学学报。2 0 0 9 。2 4 ( 4 ) ：9 一1 3 5 F u k u m m eA ，K a s h i m aM ，A i u c h iM Ac o m b i n e dc h r o n i ct o x - i e i t ya n dc a r e i n o g e n i c i t ys t u d yo fp u l y l y s i n ep o w d e ri nr a t sb y p e ro r a ld i e t a r ya d m i n i s t r a t i o n J T h eC l i n i c a lR e p o r t 1 9 9 5 ( 2 9 ) ：1 4 1 6 1 4 3 1 6 H i r a k iJ ，I e h i k a w aT ，N i n o r a i y aS U s eo fA D M Es t u d i e st o c o n f i r mt h es d e t yo fv a r e l i l o n p o l y l y s i n ea 8ap r e s e r v a t i v ei n f o o d J R e g I l l 棚T o x i c o l o g ya n dP h a r m a c o l o g y ，2 0 0 3 ，3 7 ( 2 ) ：3 2 8 3 4 0 7 李诚，石磊8 一聚赖氨酸抑菌性能研究 J 食品与发酵 工业，2 0 0 9 ( 2 ) ：3 9 4 3 8 施庆珊，陈仪本，欧阳友生8 一聚赖氨酸的抑菌特性及应 用前景 J 食品与发酵工业，2 0 0 5 ，3 1 ( 6 ) ：7 6 - 7 9 9 秦芸桦，周涛聚赖氨酸抑菌特性研究 J 安徽农业科 学。2 0 0 6 ，3 4 ( 1 8 ) ：4 7 4 0 4 7 4 l ，4 7 5 8 1 0 V s “r aM ，V u mT P o l y e a t i o ms e n s i t i z ee n t e r i cb a c e r i at oa n t i b i o d e s J A n t i m i e r o bA g e n t sC h e m o t h e r 1 9 8 3 ，2 4 ：11 4 1 2 2 11 V a a r aM A g e n t st h a ti n c r e a s et h ep e r r a e 曲i l i t yo ft h eo u t 一盱- 眦m b 眦地 J M i e r n h i o lB e y 。1 9 9 2 ，5 6 ：3 9 5 4 1 1 1 2 S h i m aS A n t i m i e r o b i a la c t i o no f 8 一P L J 】J o u r n a lo fa n t i b i o t i ，1 9 8 4 。1 3 7 ：1 4 4 9 1 4 5 5 1 3 S h m i aS ，M a t s u o k aH ，1 w a m o t oT A n t i m i e r o b i a la c t i o no fp o l y L l y s i n e J A n t i b i o t i c s ，1 9 8 4 ，3 7 ( 11 ) ：1 4 4 9 1 4 5 5 1 4 周涛，刘蔚8 一聚赖氨酸抑菌机理研究 J 食品科学， 2 0 0 9 ，1 9 ( 3 0 ) ：1 5 2 0 1 5 N i s h i k a w aM ，O g a w aK D i s t r i b u t i o no fm i c r o b e sp r o d u c i n g a n t i m i e r o b i a l g p o l y L l y s i n ep o l y m e r si ns o i lm i c r of l o r ad e - t e r m i n e db yan o v e lm e t h o d J A p p l i e da n dE n v i r o n m e n t a l M i c r o b i o l o g y ，2 0 0 2 ，6 8 ( 7 ) ：3 5 7 5 3 5 8 1 1 6 朱宏阳，陈玮玮，徐虹产8 一聚赖氨酸菌株生物合成条 件研究 J 生物加工过程，2 0 0 5 ，3 ( 2 ) ：1 5 一1 8 ，4 0 1 7 T a k a g iH ，H o s h i n oY ，N a k a m o r iS I s o l a t i o na n d 的q I l a n a l y s i so fp l a s m i dp N 0 3 3i nt h ee p s i l o n p o l y L l y s i n e p r o d u c i n ga c t i n o m y c e t eS t r e p t o m y e e sa l b u l u sI F 0 1 4 1 4 7 J 】 B i o e e iB i o e n g 。2 0 0 0 ，8 9 ( 1 ) ：9 4 9 6 1 8 杨玉红，王晓丹，康宗利，等8 一聚赖氨酸生物合成与质 粒关系的研究 J 中国酿造，2 0 0 8 ( 1 0 ) ：2 7 - 2 8 1 9 S h i m aS ，S a k a iH P o l y L l y s i n ep r o d u c e db yS t r e p t o m y e e l s P a r t l l T a x o n o m y a n df e r m e n t a t i o nl t 缸l d i e $ J A g r i 甜 t u r eB i o c h e m i s t a 7 ，1 9 8 1 ，4 5 ：2 4 7 9 - 2 5 0 2 2 0 P ，1 w a t aT ，H i r a k iJ E n h a n c e m e n t0 f8 一p o l y l y s i n e p r o d u c t i o nb yS t r e p t o m y e e sa l b u h s s t r a i n 4 1 0u 8 i I 蟾