医学微生物学病原学诊断和防治.ppt

1,第8章 细菌感染的检查方法 与防治原则,Essentials: 1.了解致病菌的检查程序 2.掌握病原菌标本的采集和送检原则,2,致病菌的检验程序,3,第一节 细菌感染的诊断,细菌学诊断主要内容: 直接查病原菌及其成分（抗原、产物、核酸） 用已知的抗体检测标本中未知的抗原 -血清学鉴定(serological identification) 间接查患者血清中特异性抗体 用已知的抗原检测标本中未知的抗体 -血清学诊断(serological diagnosis),一、病原菌检测 Pathogenic bacteria,s Assays,避免杂菌污染,不同期不同标本,用抗生素以前,采集病变明显部位,运送注意保存,标本必须新鲜,（一）标本的采集和运送 Principles for Specimen Collection,5,（二）病原菌检测的方法 Method of Pathogenic bacteria,s detection,1、形态结构检查 Morphological 2、分离培养鉴定 Isolation & Culture 3、抗原检测 Detection of Bacterial Antigens 4、其他检测,1、形态结构检查Morphological Non-stained microscopic observation Dark-field microscopy Observing the movement of live bacteria Stained microscopic observations, 一般程序： 标本涂片 固定 染色 镜检 初步鉴定,7,病原菌检测的主要技术,（1）显微镜放大技术 A.普通光学显微镜 B. 电子显微镜 （2）染色技术,8,2, Isolation & Culture:,Size Shape Color Surface features Smooth - Rough Transparency(透明度) Hemolysis,(1)Colony,9,(2)Biochemical Reactions P29,Sugar Fermentation H2S Test Citrate utilization,(3)Animal experiment,Animals Mouse Guinea Pig Rabbit Dog Monkey (4)Virulence Test Median lethal dose, LD50 Median infective dose, ID50 (5) Antibiotic Susceptibility Test,11,3、抗原检测 Detection of Bacterial Antigens,用已知Ab检测待测Ag血清学鉴定 特点：特异性强 敏感性高 Ag的检出与病原菌的死活无关,抗原检测方法： 沉淀反应 协同凝集试验 免疫荧光法 对流免疫电泳 另外: McAb(特异性和敏感性) 酶免疫测定（EIA） 胶体金标记等 核酸杂交技术 PCR技术,13,二、血清学诊断 (serological diagnosis),用已知的细菌或其特异性抗原去检测患者体液中有无相应抗体以及抗体效价的动态变化可作为某些传染病的辅助诊断 主要适用于抗原性较强的细菌和病程较长的传染病的诊断,14,标本：血清和其他体液 标本要求:双份血清(早期；恢复期) 诊断： 恢复期或一周后血清Ab效价比早期升高4 倍及4倍以上 现症感染,15,凝集试验： 肥达试验（ Widal test）-诊断伤寒、副伤寒 外斐试验（Well-Felix）-诊断立克次体病 中和试验：-诊断链球菌性风湿病 补体结合试验： -检测Q热柯克斯体 ELISA： -检测炭疽芽胞杆菌保护性抗体,血清学诊断常用方法：,思