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文档简介
实验二、血涂片制备 WBC分类计数,要求,初步掌握血图片制备、瑞氏染色原理方法,WBC染色后形态学特点及其分类计数方法,流程图:,原理: 血标本 形态特点/颜色差异 分类计数 操作: 涂片 染色 镜下观察(低倍镜、油镜) 计算,涂片,瑞氏染色,血涂片制备,血 涂 片制 备,推片,载玻片,血液,将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄),一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明,涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号,李四,B 1 2 3,瑞氏染色机理,主要成分:碱性美兰与酸性伊红 物理吸附、化学亲和与电荷作用,复杂的机理使细胞不同部位着色不同。,瑞氏染色的原理,组成:酸性染料伊红和碱性染料美兰溶于甲醇中 酸性染料与细胞中的碱性物质,如血红蛋白,嗜酸性颗粒结合,使其染成红色 碱性染料与细胞中的酸性物质,如核染色质,嗜碱性颗,血小板等结合,使其染成蓝色。 而中性颗粒可与两者都结合,染成紫红色,【操作】 1、血涂片制备 标记 推片 干燥 2、染色 染液(I液)数滴覆盖整个血膜 滴加等量或稍多的缓冲液(II液) 流水冲洗 干燥,5-10min,血 涂 片 染色,勿冲洗再加瑞氏染色液5-8滴后将液和液充分混匀静置10分钟,直接流水冲洗3-5分钟 (切勿先倒掉染液),涂片经水洗干燥后用油镜 分类计数100个白细胞,李四123,涂片干燥后加瑞氏染色液5-8滴覆盖整个血膜1分钟,干燥 染色 冲洗,瑞氏染液 盖满血涂片,1min,缓冲液 1-2倍,5-10min,晾干,干燥,3、低倍镜观察 全片浏览WBC分布与染色 4、油镜观察 一定方向顺序分类100个WBC 5、计算 各类细胞百分率,血涂片的观察,低倍镜观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱) 2. 细胞分布情况 油镜下分类计数:体尾交界处。 油镜分类时应按一定走向,不要重复计数。,李四123,外周血镜下WBC,外周血中常见细胞形态,中性粒细胞: 胞体呈圆形,胞质量丰富 胞质中含有大量细小均匀的紫红色中性颗粒 核分为2-5叶,叶间有核丝相连,嗜酸粒细胞 胞体呈圆形 胞质中充满粗大、均匀整齐、紧密排列的橘红色嗜酸性颗粒 胞核常分两叶,形似眼镜,嗜碱粒细胞 胞体呈圆形 胞质中含少量粗大、大小不均、排列不规则的紫黑色嗜碱性颗粒,常覆盖在核上,核分叶常不明显。,单核细胞 胞体呈不规则性或椭圆形 胞质量丰富,常呈毛玻璃样半透明 胞核大,形状不规则,呈椭圆形,肾形,马蹄形或不规则分叶,有时折叠卷曲,染色质细致疏松如网状,淋巴细胞 胞体呈圆形 胞质量较少,仅在和的一侧出现,染色呈天蓝色或深蓝色透明 胞浆中偶见几颗大小不等的紫红色嗜天青颗粒 胞核圆形,染色质粗糙紧密,偶见凹陷,大淋巴细胞,胞体圆形/椭圆形 胞质透明、淡蓝色 胞质内可有少量粗大、不均匀紫红色颗粒 胞核 圆/椭圆/肾形 染色质粗紧成块,深紫红色,核外缘光滑,白
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