GB15193.9-2003显性致死试验.pdf

I C S 0 7 . 1 0 0C 5 3中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准GB 1 5 1 9 3 . 9 - 2 0 0 3代替 G B 1 5 1 9 3 . 9 -1 9 9 4显性致死试验Do mi n a n t l e t h a l t e s t2 0 0 3 - 0 9 - 2 4发布2 0 0 4 - 0 5 - 0 1 实施华 人 民 共 和 国 卫 生 部国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B 1 5 1 9 3 . 9 -2 0 0 3o il吕本标准全文强制。本标准代替G B 1 5 1 9 3 . 9 -1 9 9 0显性致死试验 。本标准与 G B 1 5 1 9 3 . 9 -1 9 9 4 相比主要修改如下:在“ 范围” 中增加了受试物的具体内容: 食品生产、 加工、 保藏、 运输和销售过程中所涉及的可能 对健康造成危害的化学、 生物和物理因素， 检验对象包括食品添加剂( 含营养强化剂) 、 食品新 资源及其成分、 新资源食品、 辐照食品、 食品容器与包装材料、 食品工具、 设备、 洗涤剂、 消毒剂、 农药残留、 兽药残留、 食品工业用微生物等; 在“ 实验动物” 中: 将“ 成年小鼠( 体重3 0 g 以上) 或大鼠( 体重2 0 0 g以上) ” 改为“ 成年小鼠( 性 成熟， 体重3 0 g 以上) 或大鼠( 性成熟， 体重2 0 0 g 以上) ” ， “ 动物数量” 雄性动物每组不少于1 0 - 1 5 只， 雌性动物每组不少于2 0 只一3 0 只， 改为雄性动物每组不少于 1 5 只， 雌性动物每组不 少于 3 0只受孕鼠;将“ 分组” 下的两项内容“ 组数” 和“ 动物数量” 合并改为“ 剂量及分组” ， 高剂量组的设计方法增 加一条“ 急性毒性试验给予受试物最大给予剂量( 最大使用浓度和最大灌胃容量) 测不到 L D s 时， 则以1 0 g / k g 体重、 人的可能摄人量的1 0 0 倍、 或受试物最大耐受量为最高剂量” ;增加“ 结果判定” 内容。自 本标准实施之日 起， G B 1 5 1 9 3 . 9 -1 9 9 4 同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口本标准起草单位: 同济医科大学、 上海医科大学。本标准主要起草人: 朱清华、 柳启沛。本标准于 1 9 9 4 年首次发布， 本次为第一次修订免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 51 9 3 . 9 - 2 0 0 3显 性 致 死 试 验范围 本标准规定了显性致死试验的基本技术要求。 本标准适用于评价食品生产、 加工、 保藏、 运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的化学、生物和物理因素的致突变作用和对人体可能产生的危害( 检测染色体结构和数量的损伤， 但不能检测基因突变和毒性作用) ， 检验对象包括食品添加剂( 含营养强化剂) 、 食品新资源及其成分、 新资源食品、 辐照食品、 食品容器与包装材料、 食品工具、 设备、 洗涤剂、 消毒剂、 农药残留、 兽药残留、 食品工业用微生物等2原理 致突变物可引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变， 以致不能与异性生殖细胞结合或导致受精卵在着床前死亡， 或导致胚胎早期死亡3 试验动物 选用健康动物， 符合试验规格， 且有合格证号。经生殖能力预试， 受孕率应在 7 0 %以上者。雄性成年小鼠( 性成熟， 体重3 0 g 以上) 或大鼠( 性成熟， 体重2 0 0 g 以上) ， 预先接触受试物， 再进行交配。交配用的成年雌鼠， 不接触受试物。雌性鼠为雄性鼠的5 -6 倍量。每组雄鼠一般不少于 1 5只， 雄鼠与雌鼠交配， 使每组产生至少 3 0 只受孕雌鼠。4 荆量及分组 试验至少设3 个受试物剂量组。高剂量组应引起动物生育力轻度下降。各组受试物剂量可在1 / 1 0- V 1 / 3工 _ D s 。 之间急性毒性试验给予受试物最大剂量( 最大使用浓度和最大灌胃容量) 求不出L D s 。 时，则以1 0 g / k g 体重、 人的可能摄人量的1 0 。 倍、 或受试物最大给予剂量为最高剂量， 再下设2 个剂量组，另设溶剂对照组和阳 性对照组。阳性对照物可用环磷酞胺( 4 0 m g / k g 体重) 雌性动物每组不少于3 0只受孕鼠。一般应同时做阳性和溶剂对照组。5 操作步骤5 . 1 给予受试物5 . 1 . 1 给予途径: 应采用灌胃法， 或用喂饲法。5 . 1 . 2 给予受试物的方法: 灌胃法一般一日一次， 或一日两次， 连续 6 天或 3 个月。5 . 2 交配 给予雄鼠受试物后， 按雌雄鼠2: 1比例同笼交配 6 天后， 取出雌鼠另行饲养。雄鼠则于 1 天后， 再以同样数量的另一批雌鼠同笼交配， 如此共进行5 批6 批。5 . 3 胚胎检查 以雌雄鼠同笼日 算起第 1 5 天一1 7 天， 采用颈椎脱臼法处死雌鼠后， 立即剖腹取出子宫， 仔细检查、计数， 分别记录每一雌鼠的活胎数、 早期死亡胚胎数与晚期死亡胚胎数。5 . 4 胚胎鉴别 活胎: 完整成形， 色鲜红， 有自然运动， 机械刺激后有运动反应 早期死亡胚胎: 胚胎形体较小， 外形不完整， 胎盘较小或不明显。最早期死亡胚胎会在子宫内膜上 6 7免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB 1 5 1 9 3 . 9 - 2 0 0 3隆起如一小瘤。如已完全被吸收， 仅在子宫内 膜上留一隆起暗褐色点状物。晚期死亡胚胎: 成形， 色泽暗淡， 无自然运动， 机械刺激后无运动反应6 数据处理受孕率( %)=孕鼠数交配雌鼠数X 1 0 0一总着床数 =活胎数+早期胚胎死亡数+晚期胚胎死亡数平均着床数 =总着床数受孕雌鼠数. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . (3)早晚期胚胎死亡率( 0 o )=早( 晚) 期胚胎死亡数X 1 0 0 ， (4) 平均早期胚胎死亡数按试验组与对照组动物的上述指标分别用 Xz总着床数早期胚胎死亡数受孕雌 鼠数 。 。 ， ， 甲:. 5)检验、 单因素方差分析或秩和检验法， 进行统计分析， 以评定受试物的致突变性 。7 结果判定 根据以上计算出的受孕率、 总着床数、 早期和晚期胚胎死亡率予以评价。试验组与对照组相比， 受孕率或总着床数明显低于对照组; 早期或晚期胚胎死亡率明显高于对照组， 有明显的剂量反应关系并有