GB-T17777-1999饲料中相的测定分光光度法.pdf

c B / T 1 7 7 7 7 - - 1 9 9 9前台本标准等效采用美国公职分析家协会( A O A C )( ( 植物中钥的测定比色法) ( 1 9 8 4 年版)本标准由原中华人民共和国国内贸易部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。本标准由国家饲料质量监督检验测试中心( 武汉) 负责起草。本标准主要起草人: 高莉红、 张勇、 武润仙、 杨林免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载中华 人民共 和 国国家标 准饲料中相的测定分光光度法G B / T 1 7 7 7 7 一 1 9 9 9D e t e r m i n a t i o n o f mo l y b e n u m i n f e e d s t u f f -S p e c t r o p h o t o me t r y1 范围 本标准规定了用分光光度比色法测定钥的方法。 本标准适用于饲料中铝的测定。2 引用标准 下列标准所包含的条文， 通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时， 所示版本均为有效。所有标准都会被修订， 使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 G B / T 6 6 8 2 -1 9 9 2 分析实验室用水规格和试验方法3 方法原理 在酸性条件下， 硫氰化钾与饲料中的钥络合， 形成的络合物用异戊醇萃取， 离心后用分光光度计在波长4 6 5 n m处， 以异戊醇为参比 测定吸光度， 校正空白后， 由标准曲线求试样中的钥含量。4 试剂和溶液 实验用水应符合G B / T 6 6 8 2 中三级用水规格， 使用试剂除特殊规定外均为分析纯.4 . 1 异戊醇: 3 一 甲 基一 1 一 丁醇， 沸点1 2 8 C -1 3 2 C ,4 . 2 硝酸( G B / T 6 2 6 - - 1 9 8 9 ) : 化学纯。4 . 3 高抓酸( G B / T 6 2 3 -1 9 9 2 ) : 7 0 0 0 -7 2 0 0 04 . 4 氨水( G B / T 6 3 1 一1 9 8 9 )4 . 5 盐酸( G B / T 6 2 2 -1 9 8 9 ) : 化学纯， 1 +1 . 8 5 水溶液。4 . 6 盐酸( G B / T 6 2 2 -1 9 8 9 ) : 化学纯， 1 +1 水溶液。4 . 7 氟化钠饱和溶液: 称取1 0 g 氟化钠溶于2 0 0 m l , 水中， 搅拌至饱和， 过滤备用。4 . 8 2 0 0 0 氯化亚锡溶液: 称取1 0 g 氯化亚锡( S n C h 2 1 1 2 0 ) 置于烧杯中， 加入1 0 m L盐酸溶液( 4 . 5 ) ,加热至完全溶解， 冷却后， 加几粒金属锡， 用水稀释至5 0 m l , 在玻璃瓶内保存。4 . 9 0 . 8 %氯化亚锡溶液: 取4 m l . 2 0 0 o 氯化亚锡溶液( 4 - 8 ) 用水稀释至1 0 0 m L 。现配现用4 . 1 0 2 0 /硫氰化钾溶液: 称取5 0 g 硫氰化钾溶于水中， 稀释至2 5 0 m l . o4 . 1 1 钥标准储备液: 称取 。 . 1 8 4 0 g钥酸钱 ( N H , ) 6 Mo , 0 2 , 4 H 2 01 ， 溶于水中， 用水稀释至1 0 0 0 m l ， 此液1 m l , 含 1 0 0 p g 钥。4 . 1 2 铂标准工作液: 准确移取1 0 m l 标准储备溶液( 4 . 1 1 ) ， 用水稀释至5 0 0 m l ， 此溶液1 m l含2 p g铝。4 . 1 3 甲基橙: 。 . 0 5 %水溶液。国家质量技术监督局 1 9 9 9 一 0 6 门4 批准1 9 9 9 一 1 2 一 0 1 实施免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 1 7 7 7 7 -1 9 9 95 仪器、 设备实验室常用仪器。2 0 0 m L高型烧杯1 2 5 m I分液漏斗分光光度计: 1 c m离心机 : 转速为 2比色皿可在 4 6 5 n m处测量。0 0 0 r / mi n e515253刘556 试样制备 取具有代表性的样品至少2 k g ， 用四分法缩减到2 5 0 g ， 粉碎过。 . 4 2 m m孔筛， 混合均匀， 装入样品瓶内密闭， 保存备用。了 测定步骤了 . 1 试样的测定 称取5 g 试样( 精确至。 . 0 0 0 1 g ) 于2 0 0 m L 高型烧杯中， 加入3 5 m L 硝酸( 4 - 2 ) ， 盖上表玻璃， 静置1 5 m i n ， 同时做试剂空白， 然后在调温电炉上小心加热， 注意避免泡沫溢出烧杯， 如泡沫冒到表玻璃上，立即停止加热， 待泡沫平息后， 继续加热溶解， 直到大部分固体消失为止。 冷却至室温， 如样品已近蒸干，加入1 0 M I 硝酸( 4 - 2 ) 和6 m L高氯酸( 4 . 3 ) , 盖上表玻璃， 放在调温电 炉上缓慢加热， 煮沸， 注意不要暴沸。 继续加热直到溶解完全， 这时溶液应为无色或浅黄色。溶解完全后， 将溶液蒸发直到残渣刚干或稍带湿润为比， 取下烧杯， 冷却， 用少量水冲洗烧杯内壁和表玻璃。再放回到电炉上煮沸几分钟， 然后移开烧杯， 冷却后用少量水冲洗烧杯内壁和表玻璃。 加入2 滴甲 基橙( 4 . 1 3 ) ， 用氨水( 4 . 4 ) 中和， 然后边搅拌边加人盐酸溶液( 4 : 6 ) ， 直至溶液刚好呈酸性， 并再多加8 . 2 m L ， 使最后的溶液含约3 %盐酸， 并加人 2 m L氟化钠饱和溶液( 4 . 7 ) , 将溶液转入 1 2 5 m L分液漏斗中， 用水稀释至5 0 m L， 加入 4 m L 2 0 %硫氰化钾溶液( 4 . 1 0 ) 充分混合， 加入1 . 5 m L 2 0 o o 抓化亚锡溶掖( 4 . 8 ) ， 再次混匀并用移液管准确加入1 5 m L异戊醇( 4 . 1), 盖上分液漏斗并充分振荡1 m i n ， 分层后弃去水相。向有机相中加入新配制的。 . 8 %的氯化亚锡溶液( 4 . 9 )2 5 m l ， 轻微振荡1 5 s ， 分层后弃去水相， 将有机相转入离心管， 以2 。 。 。 r / m i n 的转速离心1 5 m i n ， 除去水滴。 于4 6 5 n m处以异戊醇( 4 . 1 ) 为参比， 测定其吸光度， 从吸光度对钥含量的标准曲 线上求出试样溶液中铝的浓度， 同时测试剂空白中铝的含量。7 . 2 工作曲线的绘制 准确移取钥标准工作溶液( 4 . 1 2 ) 0 . 0 , 1 . 0 , 2 . 0 , 5 . 0 , 1 0 . 0 , 1 5 . 0 m L分别置于2 0 0 m L高型烧杯中，加入1 0 m L 硝酸( 4 . 2 ) 和6 m L 高氯酸( 4 . 3 ) ， 以 下按7 . 1 进行， 制备标准溶液系列， 测定吸光度。 绘制吸光度对钥含量的标准曲线。8 分析结果计算和表示a 门 分析结果的计算 分析结果按式( 1 ) 计算: (1)从 一一X式中: X - 一 每千克试样中钥的含量, m g ; m- 一 试剂空白中钥的含量， 1 g + 。- 一 由曲线查得的钥含量， k g ; I ) 7 一 试样质量， 9 。免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t )免费标准下载网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载c B / T 1 7 7 7 7 -1 9 9 9 所得结果表示到小数点后两位。8 . 2 重复性 炼个试样取两份试料平行测定， 以其算术平均值为测定结果。 每千克试料铝含WT 1 0 m g 以