肠道杆菌.ppt

肠道杆菌,肠道杆菌(enteric bacilli),一大群居住在人和动物肠道中 生物学性状近似的革兰阴性短小杆菌,广布于自然界,多数是肠道的正常菌群,属于肠杆菌科，至少有30个菌属，120个以上的菌种,少数为致病菌，是肠道传染病的最重要病原菌,常居菌,大肠杆菌属 变形杆菌属 肠杆菌属,机会致病菌 (一般不致病),致病菌,沙门氏菌属 志贺氏菌属,二大致病菌 (肠道传染病),肠道杆菌(enteric bacilli),肠杆菌科中与医学有关的常见菌属,埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌 欧文菌属 草原居民欧文菌,菌属 代表种,肠道杆菌共同特性,1、相似的形态染色,2、简单的培养条件,兼性厌氧/需氧、普通培养基 中等大小、灰白色、湿润、光滑菌落,3、活泼的生化反应,乳糖分解试验,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,多数不分解乳糖,多数分解乳糖,肠道杆菌IMViC试验特性,吲哚 甲基红 V-P 枸橼酸盐 埃希菌属 + + 沙门菌属 + + 志贺菌属 +/ + 克雷伯菌属 +/ +/ +/ 变形杆菌属 +/ + /+ /+,H抗原 (鞭毛),O抗原 (LPS侧链),K抗原或Vi (荚膜),F抗原 (菌毛),4、复杂的抗原构造,O-Ag：耐热的菌体抗原,LPS,O特异多糖,核心多糖,类脂A,是细胞壁内毒素,S R变异,H-Ag：鞭毛抗原，不耐热,表面抗原：如K-Ag 、Vi-Ag ，不耐热 菌毛抗原：菌毛蛋白，不耐热,ECA ：肠道杆菌共同抗原 为LPS成分之一，肠杆菌科细菌有， 在鉴定分类中有意义,H O 变异,5、不强的抵抗力,弱、60 30min 水（冰）中生存期较长 化学消毒剂敏感,6、易变异,S-R变异： 光滑-粗糙 （毒力下降） H-O变异： 鞭毛脱落，O抗原外露（动力消失） 毒力变异 耐药性变异,肠杆菌科的细菌引起不同部位感染,中枢神经系统（埃希菌属）,下呼吸道（克雷伯菌属、肠杆菌属、埃希菌属 ）,血液（埃希菌属 、克雷伯菌属、肠杆菌属）,胃肠道（埃希菌属 、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属）,泌尿道（埃希菌属 、变形杆菌属、克雷伯菌属、摩根菌属）,第一节 埃希氏菌属 Escherichine,是人类和动物肠道中的正常菌群,出生后数小时就进入肠道，并终生伴随,以大肠埃希氏菌（E.coli）最为重要,大肠埃希菌,正常菌群，一般不致病,条件致病,某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染,细菌居住部位改变引起的肠外感染：,尿路感染最常见,致病菌株,在卫生学上的意义,大肠埃希菌,埃希菌属的生物学特性,一、培养特性 二、抗原结构 三、抵抗力 四、分类,培养特性,1、兼性厌氧 2、普通培养基,麦康凯培养基,主要生化特性 葡乳麦甘蔗 尿素 H2S IMViC 动力 - - + + - - +,乳糖分解实验,大肠杆菌,（）,（）,抗原结构,1、O抗原 近170种（为血清学分型依据） 2、 H抗原 近60种 3、 K抗原 近100种,抵抗力,1、较强 （水中数周-数月） 2、耐热 （60 15min） 3、抗菌素敏感，但易产生耐药性 4、胆盐、煌绿染料等敏感,分类,1、按抗原差异分类（血清学类型）：O：K：H 例：O111：K58：H2 2、按引起疾病分类（致病性类型）： ETEC 肠产毒型 EIEC 肠侵袭型 EPEC 肠致病型 EHEC 肠出血型 O157 EAEC 肠集聚型,大肠埃希菌的致病性,一、致病物质 二、所致疾病 三、免疫性,黏附因子（定居因子）特殊菌毛 强大的黏附功能 外毒素：不耐热肠毒素（LT） 耐热肠毒素（ST） Vero毒素志贺样毒素（SLT）,致病物质,肠外感染：尿路感染、腹膜炎、阑尾炎、 新生儿脑膜炎 肠内感染：ETEC霍乱样腹泻 EIEC菌痢样腹泻 EPEC婴幼儿腹泻 EHEC溶血性尿毒综合征 EAEC婴幼儿持续性腹泻,所致疾病,致病性大肠杆菌引起的腹泻,肠出血性大肠埃希菌（EHEC）： 血清型O157：H7，5岁以下儿童易感,O157：H7大肠杆菌,Enterohemorrhagic Escherichia coli,肠凝聚性大肠埃希菌(EaggEC）：侵犯婴儿,所致疾病：引起婴儿持续性腹泻、脱水，偶有血便。,致病物质,黏附素：有四种不同形态的菌毛,Enteroaggregative Escherichia coli,天然免疫：正常菌群 获得性免疫：菌毛抗原可形成同型免疫保护,免疫性,大肠埃希菌感染的诊断与防治,一、微生物学检查 二、防治,标本类型：中段尿、血液、脓液、 脑脊液、粪便 检测方法： 肠外感染：涂片镜检、分离鉴定 细菌总数计数 肠内感染：致病菌生化鉴定、毒力试验、 肠毒素测定、血清型测定,微生物学检查,临床学检查,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标, 3个大肠菌群/1L饮水 100个细菌总数/1ml饮水,卫生学检查,大肠菌群指数,每1000ml水中大肠菌群数,我国卫生标准：,细菌总数,每1ml或1g样品中细菌总数,1、加强食品卫生监督 2、疫苗：ETEC菌毛疫苗 3、抗菌素：对多数抗菌素敏感、易产生耐药,防治,第二节 志贺菌属 shigella,是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，,通称痢疾杆菌dyseatery bacteria,痢疾志贺菌,志贺菌属的生物学特性,一、培养特性 二、抗原结构 三、抵抗力 四、分类,培养特性,1、无荚膜、无鞭毛，有菌毛 2、兼性厌氧、普通培养基 3、无色半透明S型菌落 4、多数不分解乳糖，动力试验阴性 5、宋内志贺菌部分菌株出现R型菌落 迟缓发酵乳糖,动力试验,痢疾杆菌,（+）,（-）,乳糖发酵实验,大肠杆菌,（-）,（+）,痢疾杆菌,大肠杆菌,抗原结构,1、O抗原：群特异性抗原、型特异性抗原 2、K抗原：无分类意义 3、无H抗原,抵抗力,1、弱、理化因素敏感 （60 10 min） 2、37 水中存活20 d、冰块存活96 d 3、对酸敏感、化学消毒剂敏感 4 、抗菌素敏感、易发生耐药性,志贺菌的血清学分型,菌 种 群 型 亚 型 痢疾志贺菌 A110 8a、8b、8c 福氏志贺菌 B16，x，y变型 1a、1b、2a 2b、3a、3b 3c、4a、4b 鲍氏志贺菌 C118 宋内志贺菌 D1,志贺菌属的致病性,一、致病物质 二、所致疾病 三、免疫性,人类是唯一的患者和带菌者,粪口传播,感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血,病后免疫期短，不牢固,致病特点,1、侵袭力：,菌毛-有利于细菌粘附至结肠粘膜,2、毒 素：,加重局部和全身症状,内毒素,作用于肠壁,通透性增加,粘膜炎症、溃疡,局部,全身,内毒素血症,外毒素（A群1型） 志贺毒素,与内毒素协同作用,肠壁植物神经：里急后重,致病物质,痢疾杆菌致病过程,痢疾杆菌,经口而入,回肠、结肠、直肠定居繁殖,毒素入血，达中枢神经系统,肠壁上皮细胞坏死、炎症、溃疡,脓血黏液便,慢性感染、带菌者（传染源）,痊愈,急性细菌性痢疾,急性典型：发热、腹痛、腹泻、 脓血粘液便、里急后重,非急性典型：小儿中毒型：中毒性菌痢 成人易误漏诊,慢性细菌性痢疾：病程迁延二月以上,所致疾病,中毒性痢疾病人,天然免疫：无 获得性免疫：局部免疫为主，不牢固， 保护期短暂,免疫性,志贺菌属感染的诊断与防治,一、微生物学检查 二、防治,及时送/暂用30%甘油缓冲盐水保存,SS平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,毒力试验（Senery试验）,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,微生物学检查,预防：,口服减毒活疫苗： 依链株Sd活疫苗,治疗：,氯霉素、磺胺药物 （有多重耐药菌株存在）,防治原则,其中许多为人畜共患病,第三节 沙门菌属 Salmonella,一大群人与动物肠道中的寄生菌,菌群菌型甚多，仅少数对人致病,沙门氏菌电镜片,鼠伤寒沙门菌,伤寒沙门菌,目前至少有67种O抗原和2200个以上血清型, 根据其对宿主的致病性, 可分为三类,伤寒杆菌 副伤寒杆菌 (甲、乙、丙),人,肠热症,鼠伤寒杆菌 肠炎杆菌 猪霍乱杆菌,儿童伤寒,人、动物,急性胃肠炎,鸡痢沙门氏杆菌 鸡伤寒沙门氏杆菌,动物,沙门菌属(Salmonella),沙门菌属的生物学特性,一、培养特性 二、抗原结构 三、抵抗力 四、分类,培养特性,1、 G-杆菌, 周身鞭毛, 能运动, 多数有菌毛 2、兼性厌氧/需氧 3、普通培养基， 无色半透明S型菌落 4、喜胆汁,不分解乳糖,某些种类产生H2S 可根据生化反应的不同区分种与亚种,常见沙门菌的主要生化特性,硫化氢试验,伤寒杆菌,（+）,（-）,乳糖发酵实验,大肠杆菌,生化反应：常用于细菌种与亚种间的鉴别,（-）,（+）,大肠杆菌,乙型副伤寒,抗原结构,1、O抗原：已发现58种， 分组 42组， A-E组，致病菌 2、H抗原：I 相（特异相）、II相（非特异相） 具种特异性分型 3、Vi（多糖）抗原：与毒力有关,抗原构造,菌体抗原O-Ag ：脂多糖（LPS），耐热 为Ti-Ag，刺激机体产生IgM类抗体 （出现早、消失快） 鞭毛抗原H-Ag ：蛋白质， 为Td-Ag，刺激机体产生IgG类抗体 （出现迟、维持时间久） 毒力抗原：包膜（菌体表面）抗原，不耐热 Vi-Ag：有抗吞噬作用。抗原性弱，刺激机体产生抗体效价低，对其测定有助于检出带菌者 M抗原：黏液抗原，表面抗原，加热破坏,伤寒杆菌的表面抗原,Vi抗原,抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体 伴随活菌一起存在,测定VI抗体有助于检出带菌者,因为,所以,本质,抵抗力,1、强、耐低温、可在冰冻土壤中过冬 2、水中存活2-3周、粪便存活1-2月 3、理化因素敏感（ 60 30min ） 4、氯霉素等敏感 5、消毒剂敏感,沙门菌的血清学分型,组 菌名 O抗原 H抗原I H抗原II A 甲型副伤寒沙门菌 1、2、12 a B 肖氏沙门菌 1、4、5、12 b 1、2 鼠伤寒沙门菌 1、4、5、12 i 1、2 C1 希氏沙门菌 6、7、Vi c 1、5 猪霍乱沙门菌 6、7 c 1、5 D 伤寒沙门菌 9、12、Vi d 肠炎沙门菌 1、9、12 g、m E 鸭沙门菌 3、10 e、h 1、6,沙门菌属的致病性,一、致病物质 二、所致疾病 三、免疫性,侵袭力（inv基因编码产物） Vi抗原 内毒素 肠毒素,致病物质,肠热症：伤寒、副伤寒 胃肠炎：食物中毒 败血症,所致疾病,病人 带菌者,粪-口,1、肠热症：,肠壁固有层 淋巴结,淋巴液,肠系膜 淋巴结,胸导管,血,第一次 菌血症,胆囊、肝、脾、肾,第二次菌血症,发热、不适、 全身疼痛,持续高热、 相对缓脉、 肝脾肿大、 玫瑰疹、 外周血白细胞数下降,发生变态反应， 肠局部坏死溃疡 致肠出血、肠穿孔,随尿排出,2、胃肠炎（食物中毒）：最常见,鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌,大于108,食物中毒（发热、恶心、呕吐、 腹痛、水样泻）,3、败血症：,希氏沙门菌 鼠伤寒沙门菌 猪霍乱沙门菌 肠炎沙门菌,血,败血症（高热、寒战、厌食、贫血）,脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎,4、无症状带菌者,约1-5%伤寒或副伤寒患者，症状消失1年后，粪便仍可排菌，这些菌主要留在胆囊中，有传染性,天然免疫：无 获得性免疫：,免疫性,病愈后免疫力较牢固，主要是细胞免疫,沙门菌属感染的诊断与防治,一、微生物学检查 二、防治,标本类型：血液、骨髓、尿液、粪便、 呕吐物、食物 检测方法：涂片镜检 分离鉴定 肥达试验,微生物学诊断,伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症 第1周取静脉血 可疑食物 血 第1-3周取骨髓液 呕吐物 第2周起取粪、尿 液,微生物学检查,查病原,标本,SS平板,生化反应,血清学鉴定,双糖发酵等,玻片凝集试验,伤寒病人标本采集原则,微生物学检查,查抗体,1、肥达试验,原理：用已知伤寒副伤寒抗原， 测病人血清中相应抗体的定量凝集试验,用途：辅助诊断伤寒副伤寒,2、带菌者检查,测Vi抗体,Widal test,测定抗体 肥达氏(Widal)反应原理 用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原与待检血清作定量凝集试验 根据抗体含量多少及其增长情况, 辅助临床诊断肠热症,Widal test判定,正常抗体水平 H1：160 O 1：80 动态观察 H与O 抗体的比较 O抗体 IgM 型，出现早，持续半年左右， 消失后不再出现 H 抗体 IgG型，出现晚，维持数年，消失后易 受非特异性抗原刺激而重新出现,Widal test判定,H、O凝集价超过正常值 伤寒（副）可能性大 H、O凝集价低于正常值 伤寒（副）可能性小 H高、O不高 可能预防接种或非特异性回忆反应 H不高、O高 可能是感染早期或其它沙门菌 感染引起的交叉反应,防治,疫