白血病免疫型.ppt

白血病的免疫分型,一.急性白血病FAB分型：1976年提出,以形态为基础。,ALL,AML,M0 微小分化型急性髓细胞白血病, 原始细胞30% M1 急性髓细胞白血病未分化型, 原始细胞90% M2 急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞30-89% M3 急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞30% M4 急性粒单核细胞白血病，原始细胞30%，单核20-80% M5 急性单核细胞白血病，原单+幼单30% M5a 未分化型，原单细胞80% M5b 部分分化型，原单细胞30%，有核红细胞50% M7 急性巨核细胞白血病，原巨核细胞30%,L1 以小细胞为主，大小一致 L2 以大细胞为主，大小不一 L3 以大细胞为主，大小一致,二.急性白血病的MIC分型：1985-1986提出 MIC：Morphology Immunology Cytogenitics,80年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现， 利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步 鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床 治疗及判断预后起着重要的作用,三.免疫分型的作用： 1.区分ALL、AML：形态、组化难以诊断的病例（不典型、 治疗后） 2.将ALL分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型 3.对M0、M6 、M7具有诊断意义： M0：形态似ALL、组化（-）, 髓标志+, T,B- M6：GlyA+，CD71+ M7：CD41+，CD61+（IIb/IIIa）,四.正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及 白血病细胞免疫标志特点,(一）. 正常B细胞标志： CD19 CD22 TdT CD34 CD10 CD20 FMC7 CD23 I期 ： + + + + + II期： + + - - + -/+ III期： + + - - - + 期： + + - - - + + +,泛B标志：CD19，HLA-DR，cCD79a/CD22 幼稚B标志：CD34，TdT， CD10， 成熟B标志：CD23，FMC7,B-ALL的分型,亚型 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg 急性早期B前体细胞白血病 + + + + - - early B-precursor ALL 急性前B细胞白血病 + -/+ + + + - Pre B-ALL 急性B细胞白血病 + - - - -/+ + B-ALL,意义：Common B-ALL 预后相对较好，CD34+B-ALL比CD34- 预后好，但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对 差，但随化疗方案改进，预后有所改善。,CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期 ： + + + + +/- II期： + + + - + +/- III期： + + + - + +/+ + + 期： + + + - - +/+ +/- +/- 泛T：CD2，CD5，CD7， cCD3 幼稚T：CD34，TdT，CD1a, CD4/8， 成熟T：CD3，CD4，CD8,(二）.正常T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分4期,T-ALL的分型,分型 CD7 CD2 TdT CD3c/m 急性早期T前体细胞白血病 + - + + early T precursor ALL 急性T细胞白血病 + + - + T-ALL,T-ALL特点： 1. 幼稚T细胞数量增多：CD34+，TdT+ 2. 泛T标志丢失 3. CD4/8双+或CD4/CD8单阳,意义：儿童：ALL发病率占肿瘤的25%， B-ALL 预后比T-ALL相对好 成人：ALL 发病率20% T-ALL 预后比B-ALL 好。,(三).正常粒细胞标志,全粒细胞标志：CD13，CD33， cMPO 幼稚粒细胞：CD34，CD117，HLA-DR， 成熟粒细胞：CD15，CD11b，CD10，CD64,cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10 幼稚粒 + + + + + + - - - - 成熟粒 + + - - - + + + + +,(四).正常单核细胞标志：,全单核细胞标志：CD33，CD13，HLA-DR 幼稚单核细胞标志：CD34，CD117， 成熟单核细胞标志：CD14，CD64,HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64 幼稚单 + + + + + - - 成熟单 + + + - - + +,(五).成熟粒、单核细胞主要区别： 成熟粒细胞：CD33+ HLA-DR- CD14- CD64+dim 成熟单核细胞：CD33+ HLA-DR+ CD14+ CD64+,正常BM各系细胞比率： 淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%； 单核：2-6%；粒细胞：40-60%；有核红：50%,FCM的主要测定指标：FSC，SSC，FL1，FL2，FL3（FL4） FSC：反应细胞的大小。SSC：反应细胞内颗粒性。 FCM设门法： FSC/SSC： 缺点： 不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开 CD45/SSC：CD45是WBC抗原，RBC、Plt为阴性。 CD45在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱， 在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。 优点：能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开。 特异分析白血病细胞免疫表型,FCM标记方法： 单标：一种单抗/tube: FL1,FSC,SSC(三参数） 双标：(两种单抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四参数） 三/四标：(三种单抗/tube)(四种单抗/tube)：FL1-FL3/4,FSC,SSC,Side scatter,CD45,CD7,CD117,CD34,CD5,CD19,HLA-DR,CD11b,CD117,Pre-B-ALL,CD10-,CD34-,Side scatter,CD45,CD20,CD117,CD34,CD19,CD34,HLA-DR,CD5,HLA-DR,CD10,CD117,CD33,CD33,CD38,CD23,CD23,Lamda,Forward Scatter,AML-M0:R3细胞表达CD34,CD38,CD117,HLA-DR,CD33,AML-M1:R3细胞表达CD117,CD7,CD34,CD33,HLA-DR,CD13,CD64,AML-M2:R3细胞表达CD117,CD34,CD19,HLA-DR,CD33,CD64,CD13,CD7,CD33,CD10,CD7,CD45,CD5,CD64,CD34,CD11b,CD117,Side scatter,CD64,CD11b,CD34,CD19,CD13,HLA-DR,Forward Scatter,CD14,Side Scatter,AML-M4:R3表达CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD64,CD13;R414.35%,CD45,CD5,CD14,CD34,CD11b,CD117,Side scatter,CD64,CD11b,CD10,CD13,HLA-DR,Forward Scatter,CD14,Side Scatter,AML-M5:R3,R4表达CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD11bCD64,CD13,CD14,CD19,CD33,CD10,CD7,CD7,CD64,CD45,CD64,CD34,CD5,CD19,CD11b,CD11b,GlyA,GlyA,CD45,CD5,CD19,CD64,CD34,CD11b,CD64,CD11b,CD117,诊断白血病主要标志： B-ALL：CD34，HLA-DR，CD19，CD10+/-