组织学和胚胎学.ppt

组织学与胚胎学 ( histology and embryology ),绪论(Introduction) 细胞(cell),组织学与胚胎学的定义和研究内容 光学显微镜术 电子显微镜术 组织化学和免疫组织化学技术,原位杂交 组织学与胚胎学的学习方法 细胞连接 重点与小结,内容提要,一、组织学与胚胎学的定义和研究内容,组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关 功能的科学。,研究内容：,胚胎学（embryology）：研究机体发生、生长及其 发育机制的一门科学。,研究内容：,人体组织学（human organization)： 研究人体结构（微细结构）的自组织过程及其规律的科学。,研究内容：,为什么学习组织学与胚胎学？,哪个是不正常的？,问题 解决方法 观察对象太小 放大（显微镜） 观察对象无色，无反差 染色（HE染色） 观察对象生化成分不同 细胞化学、免疫组织化学 观察对象是活体 培养,二、组织学与胚胎学的研究方法和技术,(一) 光镜技术 1. 石蜡切片: 取材固定 脱水透明 包埋切片 染色封片,2. 冰冻切片、涂片、铺片、磨片等,光镜标本制作程序,切片机,3. 组织切片染色法,HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色,碱性染料,将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色,酸性染料,将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色,细胞核中的DNA和RNA、细胞质中的RNA,细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）,嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏 木精染成紫蓝色。 嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊 红染成红色。 中性: 对于两种染料亲和力都不强的性质, HE染 色着色淡。,组织结构的嗜色性,特殊染色法 ： 硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等 活体染色： 台盼蓝活体注射,地衣红染色示弹性纤维,甲苯胺蓝染色示肥大细胞,台盼蓝活体染色示巨噬细胞,血涂片Wright染色,透射电镜（transmission electron microscope）： 观察细胞内部结构 扫描电镜（scanning electron microscope)： 观察组织或细胞表面的立体结构,（二）电子显微镜技术,分辨率：电镜(0.2nm)、光镜(0.2m),透射电镜结构图,透射电镜结构图,扫描电镜结构图,(三)组织化学技术 1一般组织化学术 原理：化学或物理反应原理 应用：对组织或细胞内某种化学成分进行定性、 定位、定量及相关功能的研究。,PAS反应：过碘酸-Schiff反应(periodic acid Schiff reaction, PAS反应）是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。,糖类PAS反应,肝糖原,小肠粘原颗粒,2.免疫组织化学(immunohistochemistry) 技术： 原理：抗原和抗体特异性结合。 应用：检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。,（1）直接法,（2）间接法,免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 示胰岛B细胞呈胰岛素阳性,(四) 原位杂交技术(in site hybridization) 为核酸（DNA和RNA）组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该核酸。,（五）细胞培养术（cell culture） 细胞培养术：是把从机体取得的细胞在体外模拟体 内的条件下进行培养的技术。 原代培养(primary culture)： 传代培养(sub culture) ： 细胞系(cell line) ： 细胞株(cell strain) ：,超净工作台,培养箱,体外培养的上皮细胞 在相差显微镜下的图象,三、组织胚胎学学习方法要点,平面与立体的关系 结构与功能相联系 静态结构了解动态变化 纵横联系深化认识,平面与立体,结构与功能,舒张状态,收缩状态,静态与动态,综合与比较,四、细胞 （一）基本结构,（二）细胞连接 (cell junction) 1. 紧密连接 2. 中间连接 3. 桥粒 4. 缝隙连接,紧密连接 (tight junction) 功能: （1）阻止大分子物质由外部进入细胞间隙。 （2）有一定机械性的连接作用。,功能: （1）粘着和连接相邻细胞。 （2）保持细胞的形态。,2.中间连接(intermediate junction),3.桥粒 (desmosome) 是一种最牢固的细胞连接，多见于易受机械刺激或摩擦较多的部位。,功能： （1）利于细胞之间小分子物质和离子的交换，协调各细胞的功能。 （2）利于细胞之间传递电冲动。,4. 缝隙连接 (gap junction),两种或两种以上的细胞连接紧接连在一起，则称为连接复合体。,连接复合体,（junctional complex)：,组织学研究技术新进展,流式细胞术(flow cytometry) 流式细胞仪 形态计量术(morphome