ProGRP检测及临床应用继教解析.ppt

2019/10/9,1,胃泌素释放肽前体(ProGRP)检测及临床应用,蚌医一附院检验科 朱安友,2019/10/9,2,ProGRP 生物学特性 ProGRP 实验室检测 ProGRP 临床应用,内 容,2019/10/9,3,是一种神经内分泌激素。 普遍存在于非胃窦组织、脑和肺的神经内分泌细胞、神经纤维中。,1. ProGRP 分布特点和功能,一、ProGRP生物学特性,参与刺激胃的G细胞分泌胃泌素；参与平滑肌细胞的收缩、 促进细胞间的相互作用，如上皮细胞分裂、增殖等。,胃窦,2019/10/9,4,2. ProGRP 是GRP稳定的前体,* aa = amino acid,115, 118, 125,proGRP,1 27 31 98,GRP,aa*,血液中不稳定 t1/2 2 min,根据其部分氨基酸的变异可分为3种生物大分子，它们具有共同的C末端序列(31-98)，能够在血浆中稳定表达,多个裂解产物,氨基酸链,一、ProGRP生物学特性,未被识别的序列,GRP稳定的前体,2019/10/9,5,GRP在成人和胎儿肺组织和SCLC中发现 (Yamaguchi et al.),GRP成为SCLC的标志物 （Maruno et al.),1983,2013,1989,1995,二、ProGRP实验室检测,2009,Production and molecular size heterogeneity of immunoreactive gastrin-releasing peptide in fetal and adult lungs and primary lung tumors. Yamaguchi K, Abe K, Kameya T, et al. Cancer Res. 1983;43(8):3932-9.,1、ProGRP 检测发展历程,雅培化学发光法ProGRP试剂盒 国食药监械(进)字2012第3400277号,第一个ELISA方法的ProGRP上市,Elecsys ProGRP检测试剂盒,Immunoreactive gastrin-releasing peptide as a specific tumor marker in patients with small cell lung carcinoma. Maruno K, Yamaguchi K, Abe K, et al. Cancer Res. 1989 Feb 1;49(3):629-32.,Enzyme immunoassay of immunoreactive progastrin-releasing peptide(31-98) as tumor marker for small-cell lung carcinoma: development and evaluation. Aoyagi K, Miyake Y, Urakami K,et al. Clin Chem. 1995;41(4):537-43.,Development and analytical performance evaluation of an automated chemiluminescent immunoassay for pro-gastrin releasing peptide (ProGRP). Yoshimura T, Fujita K, Kinukawa H, et al. Clin Chem Lab Med. 2009;47(12):1557-63.,Multicenter evaluation of a new progastrin-releasing peptide (ProGRP) immunoassay across Europe and China. Korse CM, Holdenrieder S, Zhi XY, et al. Clin Chim Acta. 2015 ;438:388-95.,北京科美化学发光ProGRP试剂盒，并申请了国家专利。,2019/10/9,6,2、ProGRP 检测原理,二、ProGRP实验室检测,GRP,1 27 31 98 115 118 125,采用双抗体夹心法,固相载体,标记抗体,包被抗体,2019/10/9,7,3、ProGRP 检测原理,二、ProGRP实验室检测,双抗体夹心法,吖啶酯标记抗体,磁性微粒子包被抗体,71-75 84-88,40-60,雅培化学发光,2019/10/9,8,4、ProGRP 检测原理,二、ProGRP实验室检测,双抗体夹心法,三联吡锭钌标记抗体,磁性微粒子包被抗体,？-？,？-？,罗氏电化学发光,二者结合区均为 不易降解区,2019/10/9,9,5、标本要求,二、ProGRP实验室检测,首选血浆样本，EDTA和肝素锂抗凝血浆都适用。血清中的ProGRP可被在凝集进程中形成的丝氨酸蛋白酶降解。 罗氏电化学发光法也可采用血清标本。 稳定性：2-8保存72小时，20保存9小时，-20保存12周。 勿使用添加叠氮化合物作为稳定剂的样本。,2019/10/9,10,6、影响因素,二、ProGRP实验室检测,ProGRP在血液中的浓度受活动、饮食和精神等因素影响较小。日内和日间波动不大。 随着年龄增长而升高，同龄女性高于男性; 吸烟人群显著高于非吸烟人群; 体重指数( BMI) 是一个重要影响因素，肥胖人群ProGRP 水平较高; 溶血对ProGRP浓度影响不大; 肾衰可以导致血浆ProGRP假阳性。,2019/10/9,11,7、检测性能,二、ProGRP实验室检测,ELISA和化学发光两种方法检测ProGRP的灵敏度和特异性均较好，能够满足实验需要。,ARCHITECT i2000SR化学发光分析仪检测胃泌素释放肽前体的性能评价,结果表明，各项分析性能指标均达到要求，能满足临床需要,2019/10/9,12,8、Architect和Roche检测系统的结果比对,二、ProGRP实验室检测,Multicenter evaluation of a new progastrin-releasing peptide (ProGRP) immunoassay across Europe and China. Korse CM, Holdenrieder S, Zhi XY, et al. Clin Chim Acta. 2015 ;438:388-95.,Roche检测可溯源至Architect的ProGRP检测,2019/10/9,13,9、参考范围和临界值,二、ProGRP实验室检测,Abbot ARCHITECT i2000 分析系统 中国人群参考范围： 18岁50岁 ProGRP57.26pg/mL 50岁 ProGRP81.42pg/mL,Reference intervals for plasma pro-gastrin releasing peptide (ProGRP) levels in healthy adults of Chinese Han ethnicity. Zhang J, Zhao Y, Chen Y. Zhang J, Zhao Y, Chen Y. Int J Biol Markers. 2014;29(4):436-9,Bubanovi等的研究认为以65.89pg/mL作为SCLC诊断的最佳临界值,2019/10/9,14,ProGRP是诊断神经内分泌癌的肿瘤标志物,三、ProGRP临床应用,小细胞神经内分泌癌（SCNEC),大细胞神经内分泌癌（LCNEC),2019/10/9,15,ProGRP,SCLC是一种神经内分泌癌 ProGRP SCLC的特异性标志物,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),继续关注?,2019/10/9,16,ProGRP对SCLC诊断有很高的特异性 SCLC存在ProGRP显著释放和升高,source: Petra Stieber, Inst. F. Klin. Chemie, Klinikum der Universitt Mnchen Grosshadern，2010,cut-off ProGRP: 50 pg/mL,ProGRP在各种肿瘤升高的频率,SCLC,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,17,ProGRP对SCLC诊断的敏感性最高,!,肺癌标志物SCLC和NSCLC的敏感性. 结果来自Molina et al. 2009等人的研究. Copied from a book from Molina R et al. Clinical value of tumormarkers current status and future prospects,ProGRP与其他标志物的比较,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,18,ProGRP与其他标志物的比较 ProGRP与其他标志物相比ROC曲线下面积最大,source: Molina et al. Tumor Biol. 2008; 30, 121129,ProGRP对SCLC鉴别诊断价值最高,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),ProGRP150，敏感性65%，特异性94%,ProGRP300，敏感性60%，特异性98%,2019/10/9,19,source: Sunaga et al. Oncology 1999, 57, 143148,如果治疗有效，ProGRP水平显著下降； 如果治疗无效ProGRP保持稳定或升高。,ProGRP监测SCLC的疗效价值,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,20,source: Sunaga et al. Oncology 1999, 57, 143148,ProGRP 评估SCLC的复发 能够反映患者是否出现疾病的复发,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),复发的患者，ProGRP显著升高,ProGRP是复发监测敏感性最高的标志物（74%）,2019/10/9,21,ProGRP是SCLC生存的独立预后因子,可对高危患者进行密切的监测！,SCLC的生存与治疗后ProGRP的水平存在相关性,如果SCLC治疗后ProGRP升高，提示患者生存不佳或预后不良。,source: Shibayama et al. Lung Cancer 2001, 32, 6169,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,22,ProGRP vs. NSE在SCLC鉴别诊断的作用,NSE的局限性 在局限期SCLC低敏感性 神经内分泌肿瘤特异的肿瘤标志物，其他恶性肿瘤也可出现一场升高， 10-15%的NSCLC升高 红细胞和血小板含有NSE 溶血易出现假阳性 溶血的样本检测没有意义 血清快速分离是必须的 标本需要快速储存在+4 (短期储存，不能超过1h) 或 -30 (长期储存）,source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and references cited therein,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,23,ProGRP的优势 在正常人和SCLC人群存在较大差异 在SCLC的中位值显著高于NSE临床更容易进行决策 比NSE敏感性高，包括对局限期 溶血样本不会出现假阳性 对其他恶性肿瘤，有更高的特异性,source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and references cited therein,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),ProGRP vs. NSE在SCLC鉴别诊断的作用,2019/10/9,24,ProGRP和NSE具有互补性,同时使用两个标志物 局限期敏感性增加约13% 广泛期的敏感性增加约15%,source: Molina R. EJCMO 2009, 1, 25-32 and references cited therein,ProGRP不能完全替代NSE在SCLC的应用价值,三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),ProGRP vs. NSE在SCLC鉴别诊断的作用,2019/10/9,25,肺癌标志物临床指南 NACB推荐,source: NACB: Practice Guidelines And Recommendations For Use Of Tumor Markers In The Clinic: Lung Cancer (Section 3P),三、ProGRP临床应用小细胞肺癌（SCLC),2019/10/9,26,三、ProGRP临床应用前列腺小细胞神经内分泌癌,Prostatic small-cell neuroendocrine carcinoma with disease progression monitored by measurement of serum progastrin-releasing peptide. Yashi M, Muraishi O, Tokue A. BJU Int. 2000 Dec;86(9):1091-2.,ProGRP升高，ALP轻度升高 血浆中PSA和PAP一直正常 初期化疗敏感,ProGRP,ALP,15个月,Case rep