GB-T5009.116-2003畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定(高效液相色谱法).pdf

I C S 6 7 . 0 4 0C 5 3中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B / T 5 0 0 9 . 1 1 6 -2 0 0 3 代替 G B / T 1 4 9 3 1 . 1 -1 9 9 4畜、 禽肉中土霉素、 四环素、 金霉素残留量的测定（ 高效液相色谱法）D e t e r mi n a t i o n o f o x y t e t r a c y l i n e ， t e t r a c y l i n e a n d c h l o r t e t r a c y c l i n e r e s i d u e s i n me a t（ H P L C2 0 0 3 - 0 8 - 1 1 发布2 0 0 4 - 0 1 - 0 1 实施华 人 民 共 和 国 卫 生 部国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布中中免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 5 0 0 9 . 1 1 6 -2 0 0 3R li胃 本标准代替G B / T 1 4 9 3 1 . 1 -1 9 9 4 ( 畜、 禽肉中土霉索、 四环素、 金霉素残留量测定方法（ 高效液相色谱法） 。 本标准与G B / T 1 4 9 3 1 . 1 -1 9 9 4 相比主要修改如下： 一 修改了标准的中文名称， 标准中文名称改为 畜、 禽肉中土霉素、 四环素、 金霉素残留量的测定 （ 高效液相色谱法） ； 一按（ ; B / T 2 0 0 0 1 . 4 - 2 0 0 1 标准编写规则第4 部分： 化学分析方法 对原标准的结构进行 了修改 。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归日。 本标准起草单位： 辽宁省食品卫生监督检验所、 大连卫生检疫所、 沈阳市卫生防疫站、 辽宁省卫生职工医学院 。 本标准主要起草人： 翟永信、 阎勇、 卫峰、 吴伯禄、 马勇。 原标准于 1 9 9 4 年首次发布， 本次为第一次修订。标准下载网()免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载GB / T 5 0 0 9 . 1 1 6 -2 0 0 3畜、 禽肉中土霉素、 四环素、 金霉素残留量的测定（ 高效液相色谱法）范围本标准规定了畜禽肉中土霉素、 四环素、 金霉素残留量的检测方法。本标准适用于各种畜禽肉中土霉素、 四环素 、 金霉素残留量的测定 。本标准检出限为土霉素0 . 1 5 m g / k g ， 四环素0 . 2 0 mg / k g ， 金霉素0 . 6 5 m g / k g a2原 理 试样经提取， 微孔滤膜过滤后直接进样 ， 用反相色谱分离， 紫外检测器检测 ， 与标准比较定量 ， 出峰顺序为土霉素、 四环素、 金霉素。标准加法定量。3 试剂3 . 1 乙睛（ 分析纯） 。3 . 2 0 . 0 1 m o l/ 1 _ 磷酸二氢钠溶液： 称取1 . 5 6 g ( 精确到士0 . 0 1 g ) 磷酸二氢钠（ N a H 2 P H , 2 H 2 0 ） 溶于蒸馏水中， 定容到 1 0 0 M L ， 经微孔滤膜（ 0 . 4 5 j .m） 过滤 ， 备用。3 . 3 土霉素（ O T C ） 标准溶液： 称取土霉素 0 . 0 1 0 0 g （ 精确到士0 . 0 0 0 1 g ) ， 用 0 . 1 m o l / l . 盐酸溶液溶解并定容 1 0 . 0 0 m l , ， 此溶液每毫升含土霉素 1 m g o3 . 4 四环素（ T C ） 标准溶液： 称取四环素 0 . 0 1 0 0 g （ 精确到士0 . 0 0 1 g ) 用 0 . 0 1 m o l / I盐酸溶液溶解并定容 1 0 . 0 0 m l , ， 此溶液每毫升含四环素 l M g .3 . 5 金霉素（ C T C ） 标准溶液： 称取金霉 素 。 . 0 1 0 0 g （ 精确 到士0 . 0 0 0 1 g ) ， 溶 于蒸馏 水并定容成1 0 . 0 0 ml . ， 此溶液每毫升含金霉素 1 mg o 以上标准品均按 1 0 0 0 单位 m g 折算。3 . 3 -3 . 5 溶液应于 4 以下保存 ， 可使用 1 周。3 . 6 混合标准溶液： 取 3 . 3 , 3 . 4 标准溶液各 1 . 0 0 m l ， 取 3 . 5 标准溶液 2 . 0 0 ml 、 , 置于 1 0 m l ， 容量瓶中， 加蒸馏水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、 四环素各 0 . 1 m g ， 金霉素 0 . 2 m g . 临用时现配。3 . ? 5 高氯酸溶液。仪器高效液相色谱仪（ HP L C ) ： 具紫外检测器。5 色谱 条件5 . 1 柱 ： O D S -C , （ 5 tt m) 6 . 2 mm X1 5 c m。5 . 2 检测波长： 3 5 5 n mo5 . 3 灵敏度： 0 . 0 0 2 A U F S o5 . 4 柱温： 室温。5 . 5 流速 ： 1 . 0 ml , / m i n ,5 . 6 进样量 : 1 0 p 15 . 7 流动相： 乙睛+0 . 0 1 m o l / L磷酸二氢钠溶液（ 用 3 0 硝酸溶液调节 p H 2 . 5 ) =3 5 - - 6 5 使用前用超声波脱气 1 0 m i n ,标准下载网()免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 标准最全面免费标准网( w w w . f r e e b z . n e t ) 无需注册 即可下载G B / T 5 0 0 9 . 1 1 6 -2 0 0 36 分析步骤6 . 1 试样测定： 称取5 . 0 0 g （ 士0 . 0 1 g ） 切碎的肉样（ 5 m m) ， 置于5 0 m l、 锥形烧瓶中， 加人5 高氯酸 2 5 . 0 m l ， 于振荡器上振荡提取 1 0 m in ， 移入到离心管 中， 以 2 0 0 0 r / m in离心 3 m i n ， 取上清液经0 . 4 5 ji m滤膜过滤， 取溶液 1 0 川 进样， 记录峰高， 从工作曲线 h 查得含量。6 . 2 工作曲线： 分别称取7 份切碎的肉样， 每份5 . 0 0 g ( 精确到X 0 . 0 1 g ) ， 分别加人混合标准溶液。 、2 5 , 5 0 , 1 0 0 , 1 5 0 , 2 0 0 , 2 5 0 rd（ 含上霉素、 四环素各为（ ) , 2 . 5 , 5 . 0 , 1 0 . 0 , 1 5 . 0 , 2 0 . 0 , 2 5 . 0 j i g ) ； 含金霉素0 , 5 . 0 , 1 0 . 0 , 2 0 . 0 , 3 0 . 0 , 4 0 . 0 , 5 0 . 0 ji g ) ， 按 6 . 1 方法操作、 峰高为纵坐标， 以抗生素含量为横坐标， 绘制一 上 作曲线。6 . 3 结果计算 按 卜 式计算 ：nn0一八曰00Am 一 X式 中 ：X 一 一试样中抗生素含量 ， 单位为毫克每千克（ m g / k g ) ;A试样溶液测得抗生素质量 ， 单位为微克（ !t g ) ;in