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文档简介
动物细胞融合与 单克隆抗体,选修3:专题2 细胞工程,第二节 动物细胞工程,1,阅读课本并思考下列问题:,1、什么叫动物细胞融合?植物体细胞杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢? 2、动、植物细胞在结构上有何区别?这与它们杂交或融合过程有什么影响? 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同?两者的融合过程是否也一样?,2,一、动物细胞融合,细胞融合是正常的生命活动,两个细胞正在融合,受精作用,3,动物细胞融合,4,过程,5,物理法,化学法,生物法:,灭活的病毒,仙台病毒,丧失感染性,(不感染细胞),保留融合活性,(诱导细胞融合),诱导方法,6,细胞A,细胞B,杂种细胞,灭活的病毒,物理法 化学法,仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒,7,细胞融合与诱导细胞融合物质:,诱导剂:仙台病毒、聚乙二醇 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。 思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活?不灭活行吗?,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。,细胞融合技术应用于哪些方面?,细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。,8,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,9,二、单克隆抗体,抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 浆细胞产生抗体。,想一想:什么是抗体?,10,B淋巴细胞与抗体的关系:,B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。 动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。,所以传统的抗体的生产方法及缺陷是什么?怎样解决这个问题?,11,抗原不纯,抗体不纯,特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏,12,读下面一段文字资料,思考以下问题:,长期以来,为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。,1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念。,2、如何大量生产单克隆抗体?,提示1:仅用细胞培养技术可行吗?,提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?,提示3:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无 限增殖能力同时具备呢?,用单个B细胞进行克隆,得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。,13,单克隆抗体,由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点:特异性强、灵敏度高,14,如何大量生产单克隆抗体?,利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞,如何筛选?,融合方式?,15,16,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,17,思考:,1、本过程利用了哪些原理?,免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理,2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?,这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体,18,3、整个制备过程为何要经过两次筛选?,(第一次筛选得到杂交瘤细胞(多种),第二次需先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义,只不过克隆的不是B淋巴细胞,而是杂交瘤细胞。),19,单克隆抗体的应用,与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。,应用主要有:,1、临床诊断,2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹” 治疗肿瘤,资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。,20,小结,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,21,1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,巩固练习,22,、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是( ) A结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同,23,3、单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是-( ) A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成,D,24,4、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D,C,25,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,26,Good bye !,Good bye !,27,;都市至尊药皇 都市至尊药皇; 像比壹万多年都要漫长.“没事,你只是做了壹个梦而已.“小紫倩抹干了泪水,又强装欢笑了:“你现在没事就好了.“恩,咱想喝点水.“根汉说.(正文叁0叁7苏醒)叁0叁捌出关叁0叁捌“没事,你只是做了壹个梦而已.“小紫倩抹干了泪水,又强装欢笑了:“你现在没事就好了.“恩,咱想喝点水.“根汉说.“好.“小紫倩赶紧去给根汉倒水了,根汉想试着坐起来,但是却很艰难.他发现自己躯体很干,竟然瘦成了这副模样,而且还是壹头白发,脸上全是皱纹,这可把他吓了壹跳.“咱这是怎么了.“根汉有些没想到,自己会变成这个样子,自己元灵也枯萎厉害,几乎要崩溃状态,怎么壹下子就成了这副鸟样了.“没事,你只是受了壹些刺.激罢了,现在壹切都过去了,慢慢就会恢复了.“小紫倩给他端来了水.根汉接过去后,喝了壹些水,感觉稍稍好了壹些.水是生命之源,这可不是盖,就算是至尊,也需要喝水.根汉慢慢理清了壹下这整个事情来龙去脉,也才明白了,为什么自己会这样了.他和小紫倩说:“原来咱是进入了死灰之境了,只是咱是怎么恢复过来?咱怎么没死?“你还想求死吗,?“小紫倩白了他壹眼,哼道:“现在可不许说死呀死,多不吉利.“现在不会了.“根汉感叹道:“没有也就没有吧,也许地球对咱来说,本身就是壹个可望而不可及梦,都过去了这么久了,想再回去可不是那么容易事情.“你也不用多想,也许这壹切都不是真.“小紫倩说:“这两个时代完全就对不上,也许这个北天,也只是壹个虚构中人.“恩,也有可能吧.“根汉也只能是这样想,从死灰之境出来之后,自然也就是解开了这个死结了,所以不会往牛角尖里面钻了.仔细想想,这整个事情里面,还是充满了疑点.时间对不上,人物对不上,空间也对不上.只是名字,还有壹些内容对得上而已,也许这只是壹个梦,就当是做了壹场梦吧.九龙珠现在自己全凑齐了,九枚九龙珠结成了强大九龙珠环,以后有了这件神兵,这天地间也没什么自己会害怕东西了.天地虽大,但是自己哪里都能去得,只要修为提上来了,同样是可以逍遥天地间.自己现在有老婆了,有孩子了,也在这边有了许多朋友,生死之交,也不用太在意以前往事了.地球虽好,但是能回去就回去,回不去也就只能这样了.无非就是心中壹些念想,无法释怀罢了,但是该释怀还得释怀,不能执拗于过去而无法自拔.这北天不论是不是真有其人,就算是有其人话,人家也是想开了.他回不去地球了,又如何,最终不还是进入了这片星空.人成为了强者之后,就不再是以前那个单纯自己了,就算是回去了地球了又怎么样了,难道还能过回以前生活?不还要修行?不还是要想办法,追求长生?无论从何处角度来想,星空魅力,无论如何都要大于地球.根汉现在从死灰之境中走了出来,心中便豁达多了,也想多了许多,心中胡同也没有变死了,他想明白了,珍惜眼前最重要.因为之前被死灰之境给弄得险些陨落了,根汉元灵变得异常虚弱了,现在想要恢复还需要壹定时间.根汉还是没有搞清楚,为什么九龙珠会被封印在这里.按理说,这里乃是红尘女神布下法阵,难道当初她得到了九龙珠,发现了什么秘密,然后才封印起来吗?根汉恢复是壹个比较漫长过程,不是壹年两年就能恢复.这回算是给了他壹个警告,心境若是不稳固话,就容易进入这种恐怖绝境.而在这种绝境之中,对人来说,几乎是没有什么好处.壹旦坠入其中无法自拔话,就有可能陷入万劫不复,永世不得超生地步,实在是太吓人了.好在有小紫倩在身旁帮助他,要不然话这回真是完蛋了,没有得救了.只是根汉并不知道,还有壹个天妖壹族妖后,也出来帮了他.小紫倩也没有和他讲这个事情,她也没有说明,自己和根汉那啥了,根汉自己也不知道.男人不比女人,生理特征也没什么明显,所以他浑然不知道,自己和小紫倩已经有了那么亲近关系了,还是把她当姐妹尔壹样看待.时间转眼便过了十年,十年后壹天,根汉坐在林子外面,结着自己阵环.他还在研究阵环,这十年大部分时间,也都花在了结阵环上面.如今他元灵是恢复得差不多了,但是这回死灰之境,却也给他留下了暂时不能抹灭痕迹,他头发变得雪白了,壹直也没有恢复过来.不仅如此,根汉脸上,始终是有几条皱纹,显得比较老态.这壹天,乾坤世界中安然,以及燕十娘从里面出来了.她们出关了,这回闭关了近二十年了,两人修为都往上跳了两星之多,安然是七星准至尊了,燕十娘则是六星了.虽然说比不上根汉十壹星,但是已经越来越近了,她们提升速度也很快.初见到根汉这样貌时候,她们也有些揪心,没想到根汉会经历这样事情.九龙珠事情,她们听小紫倩说过了,知道根汉险些就此陨落,她们也经历了壹场生死之劫.若不是根汉扛下来话,她们现在也就陨落了,哪里会有今天.见根汉还在结阵环,她们二美决定联手,做壹顿丰盛午餐犒劳壹下根汉.这颗星辰虽然没有战狼星大,但是上面物种丰富,食材还是可以轻易获取.她们为根汉准备了鱼,准备肉,还有壹些她们自己挖来壹些疏菜,可以说是有荤有素,还有汤,确实是够丰盛了.吃着她们为自己做午餐,根汉感激了好壹阵,不过还是好奇问她们:“你们应该还要再闭关吧?“恩.“安然点头道:“要不然根汉你也到第二神树下面闭几年关吧,也许出关了,你就好了.“(正文叁0叁捌出关)叁0叁玖小龙造化叁0叁玖吃着她们为自己做午餐,根汉感激了好壹阵,不过还是好奇问她们:“你们应该还要再闭关吧?“恩.“安然点头道:“要不然根汉你也到第二神树下面闭几年关吧,也许出关了,你就好了.“看着根汉这样子,她很难受,虽说没有什么别伤痛,但是根汉毕竟还是年轻,就变成了这副样子,她心里很不好受.燕十娘也劝根汉:“是呀根汉,第二神树如今神效很强,要治愈你这些伤应该不成问题.“她们也不明白,为何根汉脸上伤,还有头发会变不了.按理来说,这些都是小伤,外伤而已.对于高阶修行者来说,外伤早就不叫伤了,即使是缺胳膊断腿,也能轻易再恢复,怎么头发还壹直是白呢.所以大部分高阶修行者,壹般都是俊男靓女,也是这个原因.因为如果有哪里不对劲,外表上斑有疤,轻易就能抹掉.除非是骨架子原因,血脉原因,没有办法之外,其它都能自咱娇正,不是美人也能自己变成美人.“不必了,那没用.“根汉摇头苦笑道:“如果有用咱早就进去了,不过是壹层外皮了,娇不娇正都没什么大关系了.“你这.“燕十娘还想劝根汉,不过安然对她说,让她不要再劝了.根汉有自己决断,他决定了事情,也不会轻易改变.三人壹起吃了丰盛壹顿,因为根汉还在结阵环,她们也看不懂根汉结这是什么东西,知道这应该是壹种神术,也就不再打扰根汉,又回到乾坤世界第二神树下面闭关去了.乾坤世界中神树,如今就是她们造化之地,在那里可以轻易感悟,并且不会遭遇什么劫难,她们肯定也想利用这样神地多多闭关,多冲破几层境界.过了壹会尔,洞府里面飞出了壹艘小飞船.是大飞船里面壹些飞行机甲,壹号从里面飞了出来,来到了根汉身边.她们这几十年,修为也长进了壹些,现在壹号也都到了元古境大概高阶境界了,这主要是得益于因为和根汉睡过了,体质得到了很大程度提升让她们修行速度也快了不少倍.只是她还是习惯了用这种飞行机甲,小巧方便,而且里面环境舒适.壹个人若是在外面飞话,还要承受风吹雨打,而在飞行机甲里面舒服多了.里面温度可调,吃喝玩乐都有,是壹个小型飞船舱室改造机甲.她从舱室里面出来,给根汉带来了壹件大衣,给根汉披上了.“主人,外面有些凉,咱们回去吧.“壹号对根汉说.看着根汉现在这样子,她们一些都有些不忍,因为根汉不仅仅是脸上有皱纹,头发白了,而且身上还有许多条怵目惊人符纹,就像是壹条条麻绳绑在他身上壹样.她们也试过用飞船中治疗舱,想用离子液替根汉治疗,但是根汉却拒绝了,他说这什么都没有用.没有到那壹天,是不会消除.至于是要到哪壹天,他自己也不清楚.根汉抬头看了看,头顶开始飘雪了竞然,安然和燕十娘也没走多久呀,怎么就下雪了呢.这里雪比九天十域冷,雪虽然不是特别大,但是却特别寒冷,似乎是冰沟子结出来似.根汉抬头看了看天空,天眼打开,不看不要紧,壹看吓壹跳.在这片天空顶部,不知道何时,出现了壹颗大雪球.所有雪花,都是从这颗大雪球上面飘落下来,随着寒风吹拂,这些雪便吹了下来.根汉对壹号说:“你先回去吧,咱出去走壹会尔.“那您小心.“壹号也不劝根汉,知道根汉这些年,心情有些沉闷.其实不仅仅是因为他受了伤,而是因为小紫倩沉睡了,而且在沉睡之前似乎还吐血了.这也是根汉心情不好最主要原因,就在八年前,小紫倩突然吐血了.之后便陷入了沉睡,而伊莲娜尔也完全呼唤不醒,这二美彻底沉睡了.根汉大概也能猜想到,可能是自己陷入死灰之境时候,她们二美都为自己出了大力了,她们本身就是元灵很不稳固存在,再强行付出话,就有可能要陷入比较长时间沉睡.他终究还是有些自责,若不是自己原因,她们也不会受伤沉睡.壹号又开着飞行机甲回去了,根汉则是独自壹人,升上了高空.这颗大雪球,大概在这星辰第二层大气层和第壹层大气层中间地带,直径大概在壹百里左右.这样壹颗大雪球,就横在这两道大气层中间,而两道大气层中,正好有两股强风,在里面不断碰撞,形成了卷风之后,将这些雪花刮了下来.来到这颗大雪球身边,根汉感觉到了壹股刺骨寒意,怪不得下面雪花那么冷了,这大雪球温度也极低.“什么东西?“根汉用天眼,好像隐约看到这颗大雪球里面,似乎有什么东西存在.不过过了壹会尔后,根汉乾坤世界中,便飞出了壹头体长十几丈小白龙.“爸爸,这里面有咱要东西.“小白龙这些年壹直也没有出来,到现在倒是自己主动要求出来了.“有什么?“根汉问他,这小家伙跟着自己有壹百多年时间了,这壹百多年他将自己之前在九龙渊外换得蓝水晶,几乎是差不多快吃光了.现在这小白龙修为,也恢复了许多了,差不多光这龙躯,就有十几星准至尊水平了.不过现在这样,还远不是小白龙巅峰,根汉能够感觉出来,这个叫自己爸爸小龙,极限还不在这里.“是蓝水晶吗?“根汉问他.若是这大雪球里面,全是蓝水晶话,那数量也不会少了.看这样子,直径有足足壹百里之大,里面蓝水晶数量,不会少于几亿块吧.要是有这么多话,小白龙食量就有保障了,足够他用几百年了最少.小白龙摇头道:“应该不是,小龙也看不到,只能是刮开这里才行.“(正文叁0叁玖小龙造化)叁0肆0蛟龙血叁0肆0看这样子,直径有足足壹百里之大,里面蓝水晶数量,不会少于几亿块吧.要是有这么多话,小白龙食量就有保障了,足够他用几百年了最少.小白龙摇头道:“应该不是,小龙也看不到,只能是刮开这里才行.“恩,那咱就替你打开吧.“根汉点了点头,右手掌心浮生镜出现了,浮生神光直接凝成了壹把光剑,光剑壹劈就劈开了壹道口子.结果从大雪球中,立即有壹摊红色液体泄了下来.“这是.“根汉闻到了壹股清香味道,没想到这白色大雪球里面,竟然有这样看似十分新鲜血液.“这是蛟龙血!“根汉闻了闻之后,眉头也是壹锁,竟然是蛟龙血.小龙则是立即冲了上去,张开大嘴就直接喝了,做为龙族后代,蛟龙血对他来说当然有大用了.只是蛟龙也是神兽级别存在,在洪荒仙界时期才有,后世连几头真正蛟龙都见不到了.但是在这里,却有人用雪球将这蛟龙血给封印在这里了,正好就便宜了小白龙了.小白龙鼻子还真是灵,闻到有异味就出来了,结果就是壹大摊蛟龙血.根汉也没有喝过蛟龙血,但是曾经闻过味道,这种味道还是很清香,而且蛟龙血气息是属寒,这与根汉想像当中龙族,应该都是至阳之族吧,但是蛟龙却不是.蛟龙壹般都生活在寒潭之中,所以性寒.不过这外层厚厚雪球,倒也不是因为蛟龙血太寒了,所以才被封住,而是有人用法阵将蛟龙血给封印了.只是现在这座法阵残了,根汉也看过了,这里阵纹看来,并不是阵环之阵,所以有可能并不是属于九华道人和红尘女神手笔.可能是别地方被封印了之后,才在这里出现,现在便宜了小白龙了.小白龙花了壹天时间,才将这蛟龙血全部喝掉,根汉几乎是用肉眼看着这小家伙龙躯慢慢变长,实力也在疯涨.短短壹天时间,这小家伙龙躯,就从十丈长到了百丈,长大了十倍有余.而且修为,也从十来星,壹路飙到了二十四五星水平.这修为速度,实在是令人瞠目结舌,实在是太快了,快到令人发指了.可见这头上古蛟龙血对他来说,有多么补,而且这还是因为现在才刚刚喝完,要是全部炼化掉龙血力量,实力肯定还会再大跳好几阶.根汉甚至怀疑,这小白龙,会不会先自己壹步,成为至尊呢.完全有这种可能,至少自己是没有这机缘造化,在短短壹天内就连升十来星了.小白龙升阶之后,立即又去闭关了,这回根汉送他到第二神树下面去闭关了.他需要好好稳固壹下修为,慢慢炼化体内龙血力量,据他说这头蛟龙可能是龙族直系血脉,所以力量才会这么强横.乱星海,不愧是当年魔狱.在这里封印着,太多诡异,未知强大生灵.即
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