循环中的肿瘤标志物.ppt

,循环中的肿瘤标志物,2,3,循环中的蛋白肿瘤标志物,肿瘤组织产生 分化抗原（cd系列）； 胚胎抗原（afp，cea）； 同工酶（nse）； 激素（-hcg）； 组织特异性抗原（psa, free psa）； 糖蛋白（ca系列）； 癌基因及其产物（her-2）,肿瘤与宿主相互作用产生 血清铁蛋白（ferritin）； 免疫复合物； 急性时相蛋白（crp）； 同工酶； 白细胞介素受体（ilr）； 肿瘤坏死因子（tnf）,4,肿瘤标志物的检查,敏感性和特异性的限制，对早期肿瘤的检出阳性率较低 单一选用一种肿瘤标志物对肿瘤进行诊断、监测是不够的 一种肿瘤常可能产生多种肿瘤标志物,肿瘤标志物的联合检查,6,循环中潜在的肿瘤标志物,1、新的循环肿瘤标志物 2、循环肿瘤核酸 3、循环肿瘤细胞,1、新的循环肿瘤标志物,or protein,8,1.1 热休克蛋白90（hsp 90）,作为肺癌相关肿瘤标志物的临床试验已经完成。 肝癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌等其他多个瘤种的临床试验也将在近期完成。,1.2 her-2 ecd,the oncologist 2003; 8: 307-325,血清her-2 ecd的临床应用,循环中潜在的肿瘤标志物,1、新的循环肿瘤标志物 2、循环肿瘤核酸 3、循环肿瘤细胞,2、循环肿瘤核酸,细胞中的核酸 游离核酸：游离dna；游离rna；microrna,13,循环中的游离核酸来源,schwarzenbach, h., d.s. hoon, and k. pantel, cell-free nucleic acids as biomarkers in cancer patients. nat rev cancer, 2011. 11(6): p. 426-37.,14,2.1 游离dna（cell-free dna，cfdna）,游离dna成分 基因组dna和线粒体dna 循环中的核小体 病毒dna 检测指标 肿瘤特异性杂合性缺失（loh） 肿瘤特异性基因突变 非编码基因组dna完整性 表观遗传学改变,15,2.1.1 肿瘤特异性基因突变,肺癌 egfr kras alk 结肠癌 egfr apc kras/braf v400e 乳腺癌 tp53 her-2,2.1.2 表观遗传学改变,游离dna甲基化检测被认为是肿瘤患者风险评估最有前景的检测方法之一。,summers, t., et al., serum-based dna methylation biomarkers in colorectal cancer: potential for screening and early detection. j cancer, 2013. 4(3): p. 210-6.,2.1.3不同肿瘤患者中cfdna变化检测,schwarzenbach, h., d.s. hoon, and k. pantel,. nat rev cancer, 2011. 11(6): p. 426-37.,18,2.2 循环中的microrna,microrna（mirnas） 是一种广泛存在于真核生物钟的单链小分子rna，不具有编码功能，定位于rna前提的3端或5端。参与转录后基因表达调控,19,2.2.1 microrna的产生,esquela-kerscher, a. and f.j. slack, oncomirs - micrornas with a role in cancer. nat rev cancer, 2006. 6(4): p. 259-69.,2.2.2microrna与肿瘤,cortez, m.a., et al., micrornas in body fluids-the mix of hormones and biomarkers. nat rev clin oncol, 2011. 8(8): p. 467-77.,2.2.3 不同肿瘤患者microrna水平变化,cortez, m.a., et al., 2011. 8(8): p. 467-77.,22,循环中潜在的肿瘤标志物,1、新的循环肿瘤标志物 2、循环肿瘤核酸 3、循环肿瘤细胞,3 循环肿瘤细胞（ctc）,circulating tumor cell (ctc),24,3.1 循环肿瘤细胞检测流程,pantel, k., nat rev cancer, 2008. 8(5): p. 329-40.,富集,检测,分析,采样,iset/mems centrifuge ctc-chip immunomagnetic bead,enumeration immunocytochemistry fish rt-qpcr whole-genome amplification (wga) fast,25,3.2 cellsearch 系统（veridex）,3.2.1 cellsearch 系统工作原理,27,3.2.2 ctc样本制备流程,3.2.3 结果检测分析,ignatiadis m., plos one 6(1): e15624, 2011,29,3.3 ctc临床应用参数,在转移乳腺癌患者中 阳性率70% 每7.5 ml 外周血中发现5个以上ctc患者约占50% 在非转移患者中 阳性率10% 每7.5 ml 外周血中发现5个以上ctc患者为0%,30,3.4 ctcs与靶向治疗,nadal, r., et al. expert rev mol diagn 13(3): 295-307, (2013),1、肿瘤的异质性 2、生物标志谱 3、靶向治疗,ctc：全面了解肿瘤生 物特征的窗口。,3.5 ctcs与单细胞检测,3.6 循环肿瘤细胞的体外培养,获得活的ctc (ctc-chip) 体外培养 低二氧化碳 无血清 细胞因子 循环肿瘤细胞特征确认 体外评价药物治疗效果,yu, m., et al., cancer therapy. ex vivo culture of circulating breast tumor cells for individualized testi