酶类药物及其生产工艺.ppt_第1页
酶类药物及其生产工艺.ppt_第2页
酶类药物及其生产工艺.ppt_第3页
酶类药物及其生产工艺.ppt_第4页
酶类药物及其生产工艺.ppt_第5页
已阅读5页，还剩6页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

常见的酶类药物及治疗作用,常见酶类药物,1、L-天门冬酰胺酶工艺路线,L-天门冬酰胺酶工艺说明 菌种培养 大肠杆菌37培养24h普通牛肉培养基; 种子培养 16玉米浆，接种量 1 1.5，37，通气搅拌培养 48h; 发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8，37通气搅拌培养 6 8h，离心分离发酵液，得菌体，加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干成菌体干粉;,提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37搅拌1.5h，308mol/L醋酸调节pH4.24.4，压滤，滤液加入2倍体积的丙酮，放置34h过滤，收集沉淀，自然风干，得干粗酶。 取粗制酶，加入03甘氨酸，调节pH8.8搅拌1.5h离心，上清液6030min热处理。上清液加 2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶沉淀，0.01mol/L，pH8磷酸缓冲液溶解，离心得上清酶溶液。,精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀，清液再调 pH7.7加入50聚乙二醇，浓度达到 16。2 5放置 4 5天，离心得沉淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀，同法反复 1次，pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液溶解，50聚乙二醇处理 1次，即得无热原的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸缓冲液，在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤，分装，冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸胺酶成品，每I支 1万或 2万单位。,二、细胞色素C生产工艺 临床上主要用于组织缺氧的急救和辅助治疗药物，适用于治疗脑、心肌缺氧和其它因缺氧引起的一切症状。,工艺过程 绞碎、提取、压滤 取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌健等，绞肉机中绞碎。称取心肌碎肉，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀，用硫酸调pH4左右，常温搅拌提取压滤，滤液用氨水调节pH6.2，离心得提取液。心渣再加等量蒸馏水同上法重复提取1次，合并两次提取液。 中和、吸附、洗脱 提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋白，吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石，搅拌吸附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞色素 C的人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤，然后装柱，用 25硫酸氨溶液洗脱，得洗脱液。,盐析、浓缩、透析 洗脱液加入固体硫酸镀达到 45饱和度，使杂蛋白析出，过滤。收集透明滤液，缓缓加入 20三氯醋酸，边加边搅拌使细胞色素 C沉淀析出，离心收集沉淀。再将沉淀溶于蒸馏水，装入透析袋中，透析至无硫酸根为止，过滤得细胞色素C粗品溶液。,吸附、洗脱、透析 粗品溶液通过处理好的 Amberite IRC50（NH4）树脂柱吸附，然后将树脂移入大烧杯中，水洗至澄清为止，再分别上柱，用06mol/L磷酸氢二钠与0.4mol /L氯化钠混合液洗脱，洗脱液用蒸馏水透析去氯离子，得细胞色素C精品溶液。 制剂 取含相当于1.5g的细胞色素C精品液，加200mg亚硫酸氢钠，搅拌溶解再加双甘肽1.5g混合均匀，用氢氧化钠调节p
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论