《革兰氏阴性球菌》PPT课件.ppt

第七章 革兰阴性球菌,奈瑟菌属 Neisseria 医学检验系,脑膜炎奈瑟菌,N. meningitis meningococcus,奈瑟菌属 （Neisseria）,奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌毛 人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌，两种细菌DNA序列有70的同源性 主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎奈瑟菌有多糖成分,脑膜炎双球菌,形态与染色,G- ，0.6-0.8m 肾形或豆形，成双排列，凹面相对； 病人脑脊液（CSF）中典型，多位于中性粒细胞内； 无鞭毛和芽胞；新分离株具有荚膜和菌毛,培养特性与生化反应,培养特性 专性需氧。营养要求高。最常用的培养基是巧克力色培养基 生化反应 可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，数日后菌体自溶,抗原构造、抵抗力,致病性与免疫性,致病物质 荚膜 菌毛 内毒素 所致疾病 流行性脑膜炎（简称流脑） 人类是唯一的易感宿主 免疫性 6月2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群,脑膜炎奈瑟菌,鼻咽腔繁殖,繁殖入血,菌/败血症,中枢神经系统,主要侵犯蛛网膜,暴发型脑膜炎,微循环衰竭、内毒素休克、DIC,儿童和成人的脑膜炎症状,微生物学检查法,标本 直接涂片镜检 如镜下见到中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，即可作出初步诊断 分离培养与鉴定 巧克力色血琼脂平板 快速诊断法 对流免疫电泳 SPA协同凝集试验,脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis),脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis),革兰阴性双球菌,肾形或豆形,生物学性状 形态染色： G- ，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相背），有荚膜及菌毛 培养特性 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板，形成光滑透明“露滴样”菌落 专性需氧，510%CO2，35-37（40 30均不生长）pH7.47.6 易产生自溶酶,生物学性状 生化反应：氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖和麦芽糖 抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血清群又可分为若干血清型 抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感,脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis),氧化酶试验 阳性：紫红色 阴性：无色,生化鉴定（光滑露珠样菌落）,脑膜炎奈瑟菌的鉴定,氧化酶： + DNA酶： - 营养琼脂生长： - 葡萄糖： + 麦芽糖： +,防治原则,综合性预防措施 隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风 流脑疫苗： 6个月-2岁接种两次，间隔1月 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗 青霉素、磺胺大剂量治疗,脑膜炎接种,淋病奈瑟菌，淋球菌,Gonococcus,脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌,相似点： 生物学性状 差异： 荚膜：有荚膜（脑），分离初期有荚膜（淋） 质粒：很少有质粒（脑），有质粒（淋）； 所致疾病：引起脑膜炎（脑），引起泌尿生殖系统疾病（淋）。 感染部位不同，标本取材部位不同,两者关系,形态与染色,革兰染色阴性，0.6-0.8m 肾形、成双排列 有菌毛，无芽胞和鞭毛，新分离株有荚膜,男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）,男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）,女性急性淋病患者阴道分泌物涂片（革兰染色）,培养特性 生化反应,培养特性 需氧，营养要求高。常用的培养基为巧克力色血液琼脂平板 生化反应 除葡萄糖外，不分解其它糖类,与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型呈滴露样菌落,主要菌体表面抗原构造,菌毛 与粘附有关，免疫原性不强 脂多糖抗原 经常变异，相应抗体不能防止再感染 外膜蛋白 PI：主要外膜蛋白，将淋病奈瑟菌分为18个血清型 PII：吸附易感细菌的蛋白,致病物质,菌毛 脂多糖（内毒素） IgA1蛋白酶,所致疾病,淋病 人类是淋球菌唯一的天然宿主 成人淋病绝大多数通过性接触感染，是重要的性传播疾病（sexually transmitted disease，STD） 新生儿淋球菌性结膜炎 “脓漏眼”,微生物学检查法,标本 保暖（运送时35C保温）、保湿、立即送检 直接涂片镜检 分离培养与鉴定 巧克力色培养基快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术,生物学特性 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似， G，双球菌，咖啡豆状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外 培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌落 生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖（脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）,淋病奈瑟菌,淋病奈瑟菌鉴定依据：,1. 涂片染色为革兰阴性双球菌； 2. 巧克力平板上为半透明、灰白色、凸 起滴露状菌落； 3. 氧化酶及触酶均阳性； 4. 只分解葡萄糖，产酸不产气； 5. 血清学试验阳性。,防治原则,预防淋病应取缔娼妓、防止不正当的两性关系 新生儿1%硝酸银滴眼，或红霉素、四环素眼药膏 药物首选青霉素，但多有耐药性，应用新型青霉素族抗生素,脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较,小 结,化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌， 淋病奈瑟菌,N. gonorrhoeae,N.meningitidis,S. pneumoniae,staphylococcus,Streptococcus,脓汁或 喉拭子,涂片、革兰染色、镜检,血琼脂平板,观察菌落特征 及溶血情况,生化反应、致病力试验及药敏试验,病原性球菌的鉴别,由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌，可初步诊断为淋球菌,37 24h,葡萄球菌鉴别,金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 色素 金黄色 白色 -溶血素 + - 血浆凝固酶试验 + - 耐热DNA酶试验 + - 甘露醇发酵试验 + - 致病力 强 弱或无 脓汁标本 找出两种菌落 Gram染色 甘露醇发酵试验,菌落小、半透明 、表面光滑、边缘整齐 G+ 、链状,完全溶血 乙型链球菌 不溶血 丙型链球菌 草绿色不完全溶血环 甲型链球菌 肺炎链球菌,菊糖发酵试验 -（紫色） +（黄色） 胆汁溶菌试验 -（混浊） +（澄清）,喉拭子标本 找出两种菌落 Gram染色,痰培养肺炎链球菌检验全程报道,姚军,微生物检验,1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:,1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:,2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:,2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:,3.传代后的纯培养物:,3.传代后的纯培养物:,传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但仍然很湿润.,4.Optochin抑制试验:,抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.可能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好.把杂菌带进去了.尽管如此,抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).,5.生化反应:,用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1滴.5%CO2,35培养1824h后读取并记录结果.,6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是阴性对照：,7.药敏试验（K-B法）：,7.药敏试验（K-B法）：,思考题,一、填空题：,一、填空题：,二、是非题：,三、选择题：,三、选择题：,三、选择题：,三、选择题：,四、名词解释：,1、血浆凝固酶 2、葡萄球菌A蛋白,问答题,1、如何从脓汁标本中检出金黄色葡萄球菌，请写出检验程序，鉴定依据？ 2、肺炎链