升血丸补血作用的实验研究.doc

升血丸补血作用的实验研究袁军清摘要 目的 研究升血丸对血虚小鼠的补血作用。方法 用腹腔注射环磷酰胺和皮下注射乙酰苯肼的方法分别制造小鼠血虚模型，观察升血丸对血虚小鼠血小板数、白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量的影响，比较不同剂量升血丸对血虚小鼠的补血作用。 结果 各升血丸剂量组小鼠血小板数、白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量均有不同程度的升高，中剂量组最为明显。 结论 升血丸具有一定的补血作用。关键词升血丸；血虚模型；贫血；小鼠 Experiment study of enriching blood effect of Shengxue pillAbstract:Objective It is to research the enriching blood effect of Shengxue pill in mice with blood deficiency.Methods Blood deficiency mouse models were made respectively by intraperitoneal injection,erythrocyte and the contents of hemoglobin were observed,and the enriching blood effects of different dosage of Shengxue pill on bolld deficiency were compared. Result The amounts of platelet,leukocyte,erythrocyte and the contents of hemoglobin in every Shengxue pill group wer increased more or less,and the increasing degree in middle-dose group was the most obviously.Conclusion Shengxue pill has an enriching blood function.Key words: Shengxue pill;blood deficiency model;anaemia;mouse升血丸是治疗再生障碍性贫血（再障）的中药方剂，由熟地、当归、山茱萸等组成，具有补肝肾、生精血之功，适用于肝肾虚损、精血不足所致的面色萎黄，头目眩晕，全身乏力，心悸气短，腰膝酸软，手足麻木，身热汗出，口渴思饮，大便干结，出血倾向，再生障碍性贫血见上述请候者。毒理学实验结果表明，升血丸对大鼠的一般状况、体质量、血液学指标、生化指标及主要脏器系数均无明显影响；各脏器肉眼及镜下观察亦无明显病理改变，该药无明显毒性反应，其无毒反应剂量为6.0g/(kg.d)。本实验采用化学性损伤血虚证模型，观察升血丸对血虚模型小鼠血小板数、白细胞数、血红蛋白含量的影响，以便为临床应用提供实验依据。1 实验资料1.1 动物 昆明种小鼠，体质量（202）g，雌雄各半，由河北省试验动物中心提供，许可证号：SCXK（冀）2003-1-003；动物饲料为全价颗粒饲料，亦由河北省试验动物中心提供。小鼠按组分笼饲养，10只/笼，颗粒饲料喂养，自由饮水，自然光照，温度2024，相对湿度40%60%。1.2 药物与试剂 升血丸，血康医院制剂室提供，批号：070601，每克相当于生药2.2g，用蒸馏水配成0.2g/mL浓度备用；升血小板胶囊，国药准字Z20025029，陕西郝其军制药有限责任公司生产；复方阿胶浆，国药准字Z37021317，山东东阿阿胶股份有限公司生产；注射用环磷酰胺，国药准字H31021702，上海华联制药有限公司生产；乙酰苯肼，批号：060720，沈阳市新西试剂厂生产。1.3 仪器 CA-800全自动血球分析仪（日本）；XF-1C型血红蛋白仪，南京普郎医用设备有限公司生产。1.4 统计学处理 采用SPSS数据处理软件，各组数据以xs表示，用t检验。2 方法与结果2.1 对环磷酰胺致小鼠血小板、白细胞减少的影响1 取小鼠60只，随机分为空白对照组，模型组，升血丸低、中、高剂量组（分别为0.9g/kg、1.8g/kg和3.6g/kg,各相当于成人剂量的4.5倍、9.0倍和18倍），升血小板胶囊阳性对照组（1.8g/kg，相当于成人剂量的18倍）。各组给药剂量为0.1mL/10g，空白对照组和模型组给予等容量蒸馏水，每24h灌胃1次，连续给药10d。各给药组和模型组分别于给药第4天和第8天腹腔注射环磷酰胺80mg/kg，空白对照组注射等容量生理盐水，于末次给药2h后各组小鼠眼眶采血，计数外周血血小板数和白细胞数。结果给药前各组小鼠血小板数和白细胞数无明显差异，模型组小鼠注射环磷酰胺后血小板数和白细数显著阺低（P均0.01），升血丸各剂量组血小板数和白细胞数明显高于模型组。见表1。表1 各组小鼠血小板数、白细胞数比较（xs）组 别n血小板数/（109L-1）白细胞数/（109L-1）给药前给药后给药前给药后空白对照组1059.410.4660.710.975.881.316.062.18模型组1058.711.2628.89.226.331.473.060.88升血丸低剂量组1055.18.4440.517.186.582.264.761.04升血丸中剂量组1064.111.4547.515.7260. 1.565.581.52血血丸高剂量组1060.110.0044.218.325.681.435.171.28升血小板胶囊组1064.411.844.412.375.931.664.861.37注：与模型组比较，P0.05；与模型组比较，P0.01。2.2 对乙酰苯肼致小鼠血虚模型红细胞、血红蛋白的影响2 取小鼠60只，随机分为6组，分组情况及给药剂量同2.1，阳性对照药为复方阿胶浆（18mL/kg）。于实验的第1，4，7天皮下注射2%乙酰苯肼生理盐水溶液，首次剂量为200mg/kg,后2次减半，造模的第9天即可造成溶血性血虚模型。造模的同时开始灌胃给药，空白对照组和模型组给予等容量蒸馏水，每天1次，连续10d。于末次给药2h后各组小鼠眼眶采血，观察动物的一般特征及红细胞数和血红蛋白变化情况。结果造模第4，5天，空白对照组小鼠皮毛光泽而致密，眼睛明亮，活动敏捷，鼻唇湿润呈淡粉色，尾巴粗、圆，色粉红。模型组一般状态最差，活动减少，精神萎靡，闭目，尾、耳颜色苍白，被毛粗乱、蓬松且无光泽，体质量随饮食及饮水量减少而下降。升血丸低量组一般状态比模型组稍好，中、高剂量组及复方阿胶浆组逐渐趋于正常，毛色有光泽而致密，活动灵活，耳、尾略露血色。模型组小鼠皮下注射乙酰苯肼后，红细胞数和血红蛋白值均较空白对照组小鼠明显下降（P均0.01）；升血丸各剂量组及复方阿胶浆组小鼠红细胞数和血红蛋白值均高于模型组，见表2。表2 各组小鼠红细胞数、血红蛋白含量比较（xs）组 别n红细胞数/（109L-1）血红蛋白/（g/L）空白对照组107.472.79162.524.89模型组103.691.51107.324.4升血丸低剂量组105.491.43131.830.54升血丸中剂量组106.381.94138.522.20血血丸高剂量组106.212.01136.517.46升血小板胶囊组106.041.58138.620.58注：与模型组比较，P0.05；与模型组比较，P0.01。3 讨 论 血虚证是临床常见病症，多由于生血乏源、失血过多、肾精亏损、大病等引起，目前对血虚证的病理研究主要集中于临床体征、血细胞功能、免疫功能、骨髓造血功能的改变等有关方面3-4。环磷酰胺是目前应用的免疫抑制剂中作用较强的药物之一，它可以使免疫器官萎缩，抑制造血系统的功能。本实验采用腹腔注射环磷酰胺的造模方法，系利用环磷酰胺的非特异性细胞毒作用，杀灭处于不同细胞周期的细胞，并能抑制骨髓，可使小鼠产生各种类型的贫血及骨髓造血障碍，使造血细胞生成减少，1次或多次给予小鼠能造成血虚证模型2。乙酰苯肼是一种强氧化剂，对红细胞有缓慢的进行性损伤作用，促进血红蛋白变性形成海氏小体，最终造成机体内溶血性贫血，导致肌肤、黏膜、毛发、脏器的失养而出现中医血虚证候，造成血虚动物模型2。本实验结果显示，模型组小鼠一般状态最差，血小板数、白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量均显著低于空白对照组，说明小鼠血虚模型成功建立。而不同剂量升血丸组血小板数、白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量指标均有不同程度升高，特别是对白细胞的恢复作用明显，接近空白对照组水平。提示升血丸对血虚小鼠造血功能的改善是十分有益的，对于血虚小鼠，升血丸小剂量呈现出补血作用趋势，中剂量补血作用最佳，高剂量效果亦非常明显，与阳性对照药升血小板胶囊和复方阿胶浆作用相当。总之，升血丸对环磷酰胺致小鼠血小板和白细胞减少有明显增加作用，可改善乙酰苯肼引起的溶血性贫血状态，升高红细胞和血红蛋白值，为临床合理用药提供了一定的实验依据。参